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1、良性前列腺增生组织上皮细胞的体外分离、纯化、培养及鉴定按每克组织33 IU胶原酶、7.5 ml RPMI1640培养基的量于37 C摇床消化约14 h。离心、沉淀 细胞，去上清；洗涤所得消化的细胞2次。将细胞重置于装有3040 ml转送保养液的离心管 中，自然沉淀15 min ；吸取底部沉淀物，放人培养瓶，重复2次；即为所需要分离出的上皮 细胞部分。前列腺上皮细胞的培养：上皮细胞置于WAJC404培养基（含0. 5胎牛血清、0. 5 mg /L胰岛素、20 g/L霍乱毒素、0. 392 g/L 地塞米松、10 g/L EGF、100 000 IU/I 青 霉素、100 000 IU/L链霉素）
2、37C培养，2448 h后补人新鲜培养基。待细胞贴壁后，每3 d 换液一次；至大于75 满瓶，胰酶消化分瓶。形态学观察结果：获得形态较均一的细胞，倒置显做镜下可见上皮细胞呈类圆形催乳素对大鼠前列腺上皮细胞自身受体的作用30 日龄SD大鼠用胶原酶分散大鼠前列腺上皮细胞，接种于无血清但添加10ug/ml胰岛素、10ng/ml表皮生长 因子、10ng/ml霍乱毒素和5ug/ml转铁蛋白的McCoy s5A培养液中。细胞在培养箱内进行培 养。前列腺原代基质细胞培养方法的研究I型胶原酶消化1218 h,消化至组织块一经摇动即成细胞团块则认为消化充分。PBS清洗 细胞2次，150 Xg离心20 s ,去除上清液后200 Xg离心1 min。取上清液置于含10 %胎 牛血清的RPMI21640培养基中进行细胞培养酶消化法6例前列腺供者行酶消化法PS 培养。接种后第3 d 相差显微镜下显示细胞生长状 况不佳、贴壁率较差, 平均贴壁率为6. 4 %。 2 周时, 相差显微镜下观察显示细胞胞浆明显空泡化、颗粒 样物质,细胞间隙增大,在培养1 个月时细胞占瓶底 面积不足10 % ,细胞未见明显的分裂相,无法进行 传代细胞培养。
