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实验24 离体家兔肠肌运动

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实验 24 离体家兔肠肌运动一、实验目的观察某些因素对肠肌运动的影响 消化道平滑肌兴奋性较低,收缩缓慢并有自律性消化管运动的基本形式是蠕动和紧张 性收缩,小肠还有分节运动给予离体肠肌以接近于在体情况的适宜环境,消化道平滑肌仍 可保持良好的生理特性二、实验材料和方法1. 材料 家兔;麦氏浴槽,超级恒温器,张力换能器,生物信号采集处理系统;台氏溶液2. 方法2.1 实验系统连接和参数设置 麦氏浴槽中加 20ml 的台氏液,调节超级恒温器的温度, 使麦氏浴槽内温度恒定在38度通气管接95%02+5%C02混合气体通道同螺丝夹调节气体 管道的气体流量,调节至浴槽中气泡一个个逸出为止,张力换能器与生物信号采集处理系统 相连仪器参数:RM6420 系统参数:点击实验菜单中的“肠肌记录”,仪器参数:通道时间常数为直流,滤 波频率10Hz,灵敏度3g,采样频率200Hz,扫描速度1ms/div2.2 离体家兔十二指肠标本制备 取家兔一只,用木追击其头部至昏,立即剖开腹腔,找到十二指肠大乳头处,然后取10cm左右一段置于氧饱和的台氏液中,用注射器吸取台氏液 将肠内容物冲洗干净,后将其剪成小段(约1~1.5cm),换以新鲜台氏液备用(注意操作时 勿牵拉肠段以免影响收缩功能)。

去小肠肠管于盛有台氏液的培养皿中,在其两端对角壁处, 分别用缝针穿线并打结注意保持肠道通畅,勿使其封闭2.3 标本固定 肠管一端连线于浴槽固定钩上,然后放入38摄氏度的麦氏浴槽中再将 肠管的另一段系结在张力换能器的悬臂梁上,调节张力至2~3g2.4.1在浴槽中滴加入Ach,观察其反应,反应稳定后换液冲洗2.4.2 在浴槽中滴加肾上腺素溶液后,观察其反应,反应稳定后换液冲洗2.4.3在浴槽中滴加HCI,观察并记录其收缩幅度,反应稳定后换液冲洗2.4.4在浴槽中滴加NaOH,记录其收缩幅度,待曲线恢复至基线或基本稳定后换液冲洗2.4.5 将浴槽中台氏液的温度降低到25摄氏度,观察其反应,反应稳定后换液冲洗2.4.6 同螺丝夹调节气体管道的气体流量,调节至浴槽中无气泡冒出为止,观察其反应并记 录三、实验结果生物信号波形加入Ach后的肠肌运动 加入肾上腺素后的肠肌运动加入NaOH后的肠肌运动 加入Hcl后的肠肌运动四、实验讨论(1) ACh 可明显兴奋胃肠道平滑肌,使其收缩幅度、张力、蠕动增加其作用机制是:Ach作用于十二指肠 M受体,使平滑肌Ca2+通道开放,Ca2+内流,Ca2+胞浆浓度 增加,平滑肌收缩加快加强,表现为收缩力变大,频率增强。

【1】(2) NE的作用主要在于受体的不同,肌肠细胞膜上存在 a和B受体,a受体又分为a 抑制型受体和a兴奋型受体NE作用于a抑制型受体,对小肠的作用是抑制的,引起肠肌 膜上一种特异性受体活化,使K+外流增多,细胞膜发生超级化,肠肌兴奋性降低,肌张力 减弱同时,NE还作用于B受体(主要是內受体),作用机制是:①引起肠肌细胞膜中的 cAMP合成增多,cAMP激活肠肌膜及肌浆网上Ca2+泵活动,使肌浆中Ca2+浓度降低; ② K+及Ca2外流增加,加速膜的超极化,促进了肌肠肌张力降低3) 消化道平滑肌对化学刺激敏感,小肠的 PH 约为 7.0~8.0 ,过高或过低的 PH 都会 影响肌肠的收缩,滴加1滴NaOH后,台氏液的PH值处于7.8~8.0之间,处于肌肠收 缩的最适PH,肌肠运动加强其作用机制,细胞外 OH-升高时,促进Ca2+通道开放, 使Ca2+内流增加,Ca2+胞浆浓度增加,平滑肌收缩加快加强,表现为收缩力变大,频 率增强4) 滴加一滴 HCL 后,台氏液的 PH 低于肌肠收缩的最适范围( 7.0~8.0),收缩减弱其机制是:当细胞外H+升高时,机制Ca2+通道开放,使Ca2+内流减少,Ca2+胞浆浓度 降低;同时可干扰肌肉的代谢和肌丝滑行的生化过程: H+能与Ca2+竞争钙调蛋白的结合位点而使肌球蛋白ATP酶活性降低,使肌原纤维对Ca2+的敏感性和Ca2+从肌质网的 释放减少。

因此,滴加一滴 HCL 后,表现为平滑肌收缩力变小,处于舒张状态,收缩 频率降低2】(5) 浸浴小肠的台氏液温度以37.5 °C左右为宜,低于或高于这个温度,都会影响结 果消化道平滑肌对温度刺激敏感,将 38 C的台氏液迅速换成25 C的台氏液,参与 代谢活动的各种酶活性降低,使代谢水平降低,兴奋性减弱,可出现收缩曲线基线下 移,频率变慢,收缩幅度变小曲线中还出现基线先上升再下移的现象,这是因为降 温本身对肠道是一种刺激,也可短暂地加强代谢活动,所以肌张力短暂升高6) 肌肠运动需要消耗能量,当停止通氧后,肌肠缺氧,有氧代谢障碍,产能障碍, ATP 减少,肌肠运动得不到能量供给,因此,肌肠表现为平滑肌收缩力变小,收缩频 率降低五、 实验结论一定浓度的 Ach、NaOH 可促进肌肠运动;一定浓度的 NE、Hcl 以及降低温度、停止 供养可抑制肌肠运动六、 参考文献【1】朱大年.生理学. 第7 版.北京:人民卫生出版社.2009 【2】许绍纷.神经生物学.上海:上海医科大学出版社.1999。

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