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1、现代分子生物学一.填空题1.DNA的物理图谱是DNA分子的 限制性内切酶酶解 片段的排列顺序。2.核酶按底物可划分为 自体催化 、异体催化 两种类型。3.原核生物中有三种起始因子分别是IF-1、 IF-2 和IF-3 。4.蛋白质的跨膜需要 信号肽 的引导，蛋白伴侣的作用是 辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质。5.真核生物启动子中的元件一般可以分为两种：核心启动子元件 和上游启动子元件。6.分子生物学的研究内容重要涉及构造分子生物学 、基因体现与调控 、DNA重组技术 三部分。7.证明DNA是遗传物质的两个核心性实验是肺炎球菌感染小鼠 、T2噬菌体感染大肠杆菌 这两个实验中重要的论点证据是：生物体
2、吸取的外源DNA变化了其遗传潜能 。8.hnRNA与mRNA之间的差别重要有两点： hnRNA在转变为mRNA的过程中通过剪接、 mRNA的5末端被加上一种m7pGppp帽子，在mRNA3末端多了一种多聚腺苷酸(polyA)尾巴。9.蛋白质多亚基形式的长处是亚基对DNA的运用来说是一种经济的措施 、可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响、活性可以非常有效和迅速地被打开和被关闭 。10.质粒DNA具有三种不同的构型分别是： SC构型 、 oc构型 、 L构型 。在电泳中最前面的是SC构型。11.哺乳类RNA聚合酶启动子中常用的元件TATA、GC、CAAT所相应的反式作用蛋白因子分别
3、是TFIID 、SP-1 和 CTF/NF1 。12.与DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用，转录因子与DNA结合的功能域常用有如下几种 螺旋-转角-螺旋 、锌指模体 、碱性-亮氨酸拉链模体 。13.转基因动物常用的措施有：逆转录病毒感染法、DNA显微注射法、胚胎干细胞法 。14.RNA聚合酶的基本转录因子有、TF-A、TF-B、TFII-D、TF-E她们的结合顺序是： D、A、B、E 。其中TFII-D的功能是与TATA盒结合 。15.酵母DNA按摩尔计具有32.8%的T,则A为_32.8%_,G为_17.2%_和C为_17.2%_。16.操纵子涉及_调控基因、调控蛋白结合位点和构造基
4、因。17.DNA合成仪合成DNA片段时，用的原料是模板DNATAQ 、引物、缓冲液、dNTP。 18.在琼脂糖电泳中，DNA会向 正 极移动。19.染色体涉及蛋白质、染色体两大部分。20.环状DNA双链的复制重要可分为 形、滚环形、D-环形三种类型。21.转录的基本过程涉及转录的起始、延伸、终结。22.半乳糖对细菌有双重作用；一方面可以作为碳源供细胞生长 ；另一方面它又是细胞壁的成分 。因此需要一种不依赖于cAMPCRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同步需要一种依赖于cAMPCRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从 S2 开始，无G时转录从 S1 开始。23.DNA重组技术
5、也称为基因克隆或分子克隆 。最后目的是把一种生物体中的遗传信息DNA转入另一种生物体。典型的DNA重组实验一般涉及如下几种环节：提取供体生物的目的基因或称外源基因，酶接连接到另一DNA分子上克隆载体，形成一种新的重组DNA分子。将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化。对那些吸取了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。对具有重组DNA的细胞进行大量培养，检测外援基因与否体现。24.质粒的复制类型有两种：受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为严紧型质粒 ，不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为 松弛型质粒 。25.PCR的基本反映过程涉及：变性、退火、延伸 三个阶段。
6、PCR的反映体系要具有如下条件： a、被分离的目的基因两条链各一端序列互相补的 DNA引物约20个碱基左右。b、具有热稳定性的酶如：TagDNA聚合酶。c、dNTP，d、作为模板的目的DNA序列26.哺乳类RNA聚合酶启动子中常用的元件TATA、GC、CAAT所相应的反式作用蛋白因子分别是 TFIID 、 SP-1和CTF/NF1。27.RNA聚合酶的基本转录因子有、TF-A、TF-B、TFII-D、TF-E她们的结合顺序是：D、A、B、E。其中TFII-D的功能是 与TATA盒结合。二.名词解释质粒:是染色体外可以进行自主复制的遗传单位，涉及真核生物的细胞器和细菌细胞中染色体以外的脱氧核糖核
7、酸(DNA)分子。目前习惯上用来专指细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体以外的DNA分子。在基因工程中质粒常被用做基因的载体。启动子:是DNA分子可以与RNA聚合酶特异结合的部位，也就是使转录开始的部位。在基因体现的调控中，转录的起始是个核心。常常某个基因与否应当体现决定于在特定的启动子起始过程。信号肽：在蛋白质合成过程中N端有1536个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。核受体:细胞内受体分布于胞浆或核内，本质上都是配体调控的转录因子，均在核内启动信号转导并影响基因转录，统称核受体。hnRNA:核不均一RNA，即mRNA的前体，通过5加帽和 3酶切加多聚A，再通过RNA的剪接，将外显子连接成开
8、放阅读框，通过核孔进入细胞质就可以作为蛋白质合成的模板了。 分子杂交:互补的核苷酸序列通过Walson-Crick碱基配对形成稳定的杂合双链分子DNA分子的过程称为杂交。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。基因组文库:将某种生物的基因组DNA切割成一定大小的片段，并与合适的载体重组后导入宿主细胞，进行克隆。这些存在于所有重组体内的基因组DNA片段的集合，即基因组文库，它涉及了该生物的所有基因。密码的简并性:由一种以上密码子编码同一种氨基酸的现象称为密码的简并性衰减子：在色氨酸操纵子中，当mRNA合成起始后来，除非培养基中完全没有色氨酸，否则，转录总是在长
9、162bp的前导区终结，产生一种仅有140个核苷酸的RNA分子，终结trp基因转录，由于转录终结发生在这一区域，并且这种终结是被调节的，这个区域被称为衰减子。DNA拓扑异构酶：DNA在细胞内往往以超螺旋状态存在，DNA拓扑酶催化同一DNA分子不同超螺旋状态之间的转变。DNA拓扑异构酶有两类，大肠杆菌的蛋白(MW-110000)就是一种典型的拓扑异构酶.它的作用是临时切断一条DNA链，形成酶-DNA共价中间物而使超螺旋DNA松弛化，然后再将切断的单链DNA连接起来，而不需要任何辅助因子。而大肠杆菌中的DNA旋转酶(DNAgyrase)则的典型的拓扑异构酶，能将负超螺旋引入DNA分子，该酶能临时性
10、地切断和重新连接双链DNA，同步需要ATP水解为ADP以供能。基因体现：遗传信息从DNA到RNA再到蛋白质的过程。前导肽：分析色氨酸操纵子前导肽的序列发现，它涉及起始密码子AUG和终结密码子UGA；如果翻译起始于AUG，应当产生一种14个氨基酸的多肽，这个假设的多肽被称为前导肽（事实上还没有观测到）。启动子：启动子是DNA分子可以与RNA聚合酶特异结合的部位，也就是使转录开始的部位。在基因体现的调控中，转录的起始是个核心。常常某个基因与否应当体现决定于在特定的启动子起始过程。DNA分子克隆技术：（也称基因克隆技术） 在体外将DNA分子片段与载体DNA片段连接，转入细胞获得大量拷贝的过程中DNA
11、分子克隆(或基因克隆)。其基本环节涉及：制备目的基因将目的基因与载体用限制性内切酶切割和连接，制成DNA重组导入宿主细胞筛选、鉴定扩增和体现。载体（vecors）在细胞内自我复制，并带动重组的分子片段共同增殖，从而产生大量的DNA分子片段。重要目的是获得某一基因或NDA片段的大量拷贝，有了这些与亲本分子完全相似的分子克隆，就可以进一步分析基因的构造与功能，随着引入的DNA片段不同，有两种DNA库，一种是基因组文库（genomic library）,另一种是cDNA库。G蛋白：受体与配体结合后即与膜上的偶联蛋白结合，使其释放活性因子，再与效应器发生反映。位于受体与效应器之间的则是偶联蛋白。目前所
12、知的偶联蛋白种类较多，都属于构造和功能极为类似的一种家族，由于它们都能结合并水解GTP，因此一般称G蛋白，即鸟苷酸调节蛋白（guanine nucleotide regulatory protein）。受体型酪氨酸激酶：蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase，PTK)是一组催化酪氨酸残基磷酸化的酶，她们通过从三磷酸腺苷上转移一种磷原子到酪氨酸残基上，而使底物蛋白活化. 目前，已发现PTK有100多种家族成员，她们通过活化底物蛋白，参与细胞的信号转导，最后，这些信号转导入细胞核内，引起某些基因体现水平的变化，使诸如细胞生长之类的复杂的细胞功能得以调节. 因此在调节细胞的分
13、化、生长和激活中起到重要作用.根据PTK的构造，可分为受体型和非受体型PTK两大类，前者又称跨膜PTK，后者又称细胞内PTK. 生长因子受体PTK(受体型酪氨酸激酶或RTK): 这一类蛋白酪氨酸激酶为跨膜蛋白，其胞外部分为配体结合区，中间有跨膜区，胞内部分具有蛋白酪氨酸激酶的催化构造域. 根据她们的构造不同可分为，表皮生长因子受体(EGFR)家族、胰岛素受体家族、血小板衍生生长因子(PDGF)受体家族和成纤维细胞生长因子受体(FGFR)家族.cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。CAP：环腺苷酸（cAM
14、P）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ）回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可克制mRNA的翻译。核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。信号肽：在蛋白质合成过程中N端有1536个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。弱化子：在操纵区与构造基因之间的一段可以终结转录作用的核苷酸序列。上游启动子元件：是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA
15、序列，-10区的TATA、-35区的TGACA及增强子，弱化子等。DNA探针：是带有标记的一段已知序列DNA，用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。SD序列：是核糖体与mRNA结合序列，对翻译起到调控作用。单克隆抗体：只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。顺式作用元件：在DNA中一段特殊的碱基序列，对基因的体现起到调控作用的基因元件。Klenow酶：DNA聚合酶I大片段，只是从DNA聚合酶I全酶中清除了5 3外切酶活性RNA编辑（RNA editing）:是某些RNA，特别是mRMA的一种加工方式，它导致了DNA 所编码的遗传信息的变化，是由于通过编辑的mRNA序列发生了不同于模板DNA的
16、变化。反密码子:tRNA上能与密码子以碱基互补方式配对的相应碱基，一般具有“摆动性”。转座子 （transposon）:是存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。基因（gene）:产生一条多肽链或功能RNA所必须的所有核苷酸序列。基因族( gene cluster)：真核生物中许多有关的基因常按功能成套组合，被称为基因家族，同一家族的成员有时紧密的排列在一起，成为基因簇。C-值（C-value）：一般是指一种生物单倍体基因组DNA的总量。内含子(intron)：指基因组中的非编码序列。锌指（zinc finger）：属于反式作用因子，其特有的半胱氨酸和组氨酸之间氨基酸残基数基本恒定，有锌参与才具有转录调控活性。转
