第十六章 DNA 的生物合成一、名词解释1•冈崎片段：DNA复制中，滞后链的合成是先合成许多小片段，再连接成一条链，这些小片 段起初是由冈崎发现的，所以称为冈崎片段2. 半保留复制：DNA的复制时，每一子代DNA分子由一条亲代链和一条新合成的链组成， 这种复制方式称为半保留复制3•半不连续复制：)NA复制中，一条链是连续合成的，为前导链，另一条链先合成岗崎片断， 再连接成新链，合成是不连续的，为滞后链，这种复制方式称为半不连续复制4．光复活：受紫外线照射而引起损伤的细胞用可见光照射，大部分损伤细胞可以恢复，这 种修复过程叫做光复活二、填充题1. DNA复制的方向是从__5' _端到_3' _端展开2. DNA聚合酶I.和DNA连接酶 的缺乏可导致大肠杆菌体内冈崎片段的堆积3. 体内DNA复制主要使用RNA 作为引物，而在体外进行PCR扩增时使用 人工合成的 DNA 作为引物4. 使用胰蛋白_酶可将大肠杆菌DNA聚合酶I水解成大小两个片段，其中大片段被称为_Klenow_ 酶，它保留__3'一5'核酸外切酶 和DNA聚合__酶的活性，小片段则保 留了 5' - 3'核酸外切 酶的活性5. 大肠杆菌DNA聚合酶I是一种多功能酶，其具有 DNA聚合 酶、3'-5'核酸外切_酶和 5' - 3' 核酸外切 酶的活性。
6. 维持DNA复制的高度忠实性的机制主要有DNA聚合酶的高度选择性、DNA聚合酶的自我校对_和_错配修复_7. DNA连接酶催化的连接反应需要能量，大肠杆菌由 NAD± _供能，T4噬菌体由—ATP 供能，动物细胞由_ATP _供能以RNA为模板合成DNA称为 反转录，由 反转录—酶催化9. DNA复制时前导链的合成是 连续 的，其合成方向与复制叉移动方向 相同—随后链的合成是 不连续—的，其合成方向与复制叉移动方向 相反 —10. 细菌的环状DNA通常在一个 复制位点 开始复制，而真核生物染色体中的线形DNA可以在 多位点 起始复制11. 大肠杆菌DNA聚合酶III的—3'-5‘核酸外切酶 活性使之具有校对功能，极大地提高了 DNA复制的保真度12. DNA合成时，先由引物酶合成 RNA引物—，再由 DNA聚合酶III —在其3’端 合成DNA链，然后由—DNA聚合酶I 切除引物并填补空隙，最后由—DNA连接 酶 连接成完整的链三、选择题1. 识别大肠杆菌DNA复制起始区的蛋白质是(A )(A) DnaA 蛋白 (B)DnaB 蛋白 (C)DnaC 蛋白 (D)DnaE 蛋白2. DNA复制需要一系列的蛋白质促进复制叉的移动，大肠杆菌 DNA在体外的复制至少需要 那些蛋白质？( D ).(A) DNA聚合酶I、引发酶、SSB和连接酶 (B)SSB、解链酶和拓扑异构酶(C)连接酶、DNA聚合酶I和III3. 有关DNA复制的说明中，错误的是((A) 半保留复制(C)从RNA引物的5 '端添加核苷酸(D)DNA聚合酶III、解链酶、SSB和引发酶 C)(B) 半不连续复制(D)复制沿模板5‘一3’方向进行(A)DNA聚合酶I(B) DNA 聚合酶 II (C)DNA 聚合酶III (D)Klenow 酶5. 在DNA损伤修复中，哪一种修复可能导致高的变异率(D(A) 光修复(B) 切除修复 (C )重组修复 (D )诱导修复6. 在细胞的DNA中，下列哪一种造成的突变称为点突变？ ( A)(A) 用一个碱基对替换另一个碱基对(B)插入一个碱基对(C) 改变一个密码子7. 逆转录酶是一类 ( C )(A) DNA指导的DNA聚合酶(C) RNA指导的DNA聚合酶(D) 改变一个基因(B) DNA指导的RNA聚合酶(D) RNA指导的RNA聚合酶8.1958年Meselson和Stahl利用15N标记大肠杆菌DNA的实验首先证明了下列哪一种机制？ ( C )A) DNA能被复制(B)DNA的基因可以被转录为mRNA(C) DNA的半保留复制机制 (D)DNA全保留复制机制9. 需要以 RNA 为引物的过程是( A )(A)复制 (B)转录 (C)反转录 (D)翻译10. DNA按半保留方式复制。
如果一个完全放射标记的双链DNA分子，放在不含有放射标记 物的溶液中，进行两轮复制，所产生的四个DNA分子的放射活性将会怎样：(A )(A)半数分子没有放射性 (B)所有分子均有放射性(C) 半数分子的两条链均有放射性 (D) —个分子的两条链均有放射性11. DNA复制时，5Z—TpApGpAp-3z序列产生的互补结构是下列哪一种：(B )(A)5'一TpCpTpAp —3' (B)3‘一ApTpCpTp—5'(C)5 ‘一UpCpUpAp —3' (D)5‘一GpCpGpAp—3'12. 从正在进行DNA复制的细胞分离出的短链核酸——冈崎片段,具有下列哪项特性:(B(A)它们是双链的 (B)它们是一组短的单链DNA片段(C)它们是DNA—RNA杂化双链 (D)它们被核酸酶活性切除13•切除修复可以纠正下列哪一项引起的DNA损伤：(D )(A)碱基缺失 (B)碱基插入(C)碱基甲基化 (D)胸腺嘧啶二聚体形成14.大肠杆菌DNA连接酶需要下列哪一种辅助因子？ ( C(A)FAD作为电子受体 (B)NADP+作为磷酸供体(C)NAD+形成活性腺苷酰酶 (D)NAD+作为电子受体15•下列关于RNA和DNA聚合酶的叙述哪一项是正确的：(D )(A) RNA 聚合酶用二磷酸核苷合成多核苷酸链(B) RNA聚合酶需要引物，并在延长链的5位端加接碱基(C) DNA 聚合酶可在链的两端加接核苷酸(D) 所有RNA聚合酶和DNA聚合酶只能在生长中的多核苷酸链的'端加接核苷酸16. 下列哪种突变最可能是致死的：( D )(A)腺嘌吟取代胞嘧啶 (B)胞嘧啶取代鸟嘌吟(C)缺失三个核苷酸 (D)插入一个核苷酸17. 镰刀形红细胞贫血病是异常血红蛋白纯合子基因的临床表现。
0-链变异是由下列哪种 突变造成的：( D )(A)交换 (B)插入 (C)缺失 (D)点突变18. 下列关于真核细胞DNA复制的叙述哪一项是错误的：(C(A)是半保留式复制 (B)有多个复制叉(C)复制前组蛋白从双链DNA脱出 (D)真核DNA聚合酶不表现核酸酶活性 四、简述题1. 简述原核生物DNA复制叉上进行的基本活动1) 双链的解开；(2) RNA 引物的合成；(3) DNA 链的延长；(4) 切除RNA引物，填补缺口，连接相邻的DNA片段；(5) 切除修复掺入DNA链的脱氧尿苷酸和错配碱基2. 试述DNA如何保证复制的准确性1) DNA聚合酶具有模板依赖性，复制时按碱基互补配对规律对号入座，使子代DNA与 亲代DNA核苷酸顺序相同，但有约10-4的错配2) DNA聚合酶I、III均有3'-5'外切酶活性，有纠正错配的校正作用，使错配减至 10-63) 由错配修复机制，使错配减至10-9以下3. 简述DNA损伤的修复有哪几种机制1) 光复活-直接修复：专门修复由紫外线引起的TT (CC CT)二聚体2) 切除修复：在一系列酶的作用下，将DNA分子中受损伤部分切除掉，并以完整的那 一条链为模板，合成出切去的部分，然后使DNA恢复正常结构。
为复制前修复3) 重组修复：即DNA复制时能跳过无法通过碱基配对合成子代的模板链的损伤部位， 而使子代链在损伤部位相对处留下缺口，这种有缺损子代DNA分子可以通过DNA分子的遗传 重组，使受损伤的部位在子链得到弥补、修复为复制后修复4) 错配修复：DNA复制时发生错误配对，GATC序列中A的N未能甲基化的链的错配碱6 基将被切除，并以甲基化的链为模板进行修复合成5) SOS反应：细胞DNA受到严重损伤或DNA复制系统受到抑制的紧急状态下，为求生 存而出现的应急反应。