一、检测目的基因;二|;二|;二|G6PD基因定位于X染色体长臂2区8带vii因子及 红-绿色盲基因之间（Xq28 ），长18Kb，中国人G6PD基 目前依法显得突变种类很多，但能引起题目中所诉临床症状 的突变点可能是G1376T和G1388A点突变（G6PD基因含 13个外显子和12个内含子，编码515个氨基酸G6PD CDNA1388、CDNA1376同属第12外显子，相距仅12个核 苷酸，突变结果使459和463位的精氨酸分别被亮氨酸和组 氨酸替代） 二、检测方法（一）・ARMS检测法，具体步骤如下：IIIIII1•临床实验室检查：（1 ）确定贫血程度[3] ；（ 2 ） 根据急性溶血的临床体征和既往史进行有关溶血的实验室 检查，以排除其他因素所致的溶血3 ） G6PD活性测定， 酶活性单位以每克Hb含多少国际单位来表示（IU/g ），正 常值为4~7 IU/g2•基因检测:DNA制备：按常规法，蛋白酶K消化，酚: 氯仿:异戊醇（25:24:1）抽提，无水乙醇沉淀DNA，TE溶解PCR引物设计：ARMS法试剂盒,引物序列为：上游引物1388L2 : 5GACCTGACCTACGGCAACAGATAC3'下游引物1388M2 : 5GGTGCAGCAGTGGGGTGAAATTAT3'1376M : 5'TGAAAATACGCCAGGCCTCAA 3'1388L2和1388M2特异性扩增G6PD基因第12外显 子cDNA1388（ GfA ）突变，扩增出361bp片段，而1388L2 和1376M扩增CDNA1376 （ G-T ）突变，扩增出345bp片 段。
基因扩增：30 pl聚合酶链反应含基因组DNA 1.0 pg , 10x反应缓冲液 3.0 pl , dNTPs （ 2 mmol/L ） 3.0 pl , 5上游 引物和3下游引物各20 ng，内对照引物40 ng反应条件 为97°C变性7分钟，在85°C下加1.5U GD Taq酶后，进入 热循环循环条件为：94C30秒，59C45秒，72C50秒， 共25个循环，72C继续保温7分钟PCR在自动PCR仪 （英国HYADI公司Omn-E ）中进行结果观察：6%聚丙烯酰胺凝胶电泳，选用1 kb入DNA 作为DNA分子量标准银染，固定，干燥保存二）此外，还可以用通过扩增葡萄糖-6 -磷酸脱氢酶（G 6PD）基因第 10 , 11 , 12 , 13 外湿子 639bpDNA 片段结合寡核苷酸探针斑点杂交技术、PCR/SSCP分析法、 DNA序列分析、探针技术等方法检测上诉基因的点突变（具体过程略）。