氨基氮、总氮测定

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1、氨基氮测定(酸度计法)一、原理 利用氨基酸的两性作用,加入甲醛以固定氨基的碱性,使羧基显示出酸性,以氢氧化钠 标准溶液滴定后定量(以酸度计测定终点)。二、实验步骤精密吸取ImL样品,加水79mL,开动磁力搅拌器(用前校准),用C(NaOH)=0.05mol/L 氢氧化钠标准溶液滴定到pH8.2,精密加入甲醛10mL,混匀,再用C (NaOH) =0.05mol/L 氢氧化钠标准溶液继续滴定至pH9.2,记下加入甲醛后消耗氢氧化钠标准溶液的体积。同时取纯水80mL,精密加入甲醛10mL,用C (NaOH) =0.05mol/L氢氧化钠标准溶液 滴定至pH9.2,记录消耗氢氧化钠标准溶液的体积,做

2、实际空白实验。计算:氨基氮(以氮计,克/100毫克) =(V1-V2)x Cx0.014 x 100WV1测定用样品稀释液加入甲醛后消耗氢氧化钠标准溶液的体积,毫升V2实际空白加入甲醛后消耗氢氧化钠标准溶液的体积,毫升W称取样品的量C氢氧化钠标准溶液的浓度(m ol/L)0.014与1ml氢氧化钠标准溶液相当的以克表示氨基氮的质量总氮的测定一、原理样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白分解,其中碳和氢被氧化成二氧化碳 和水逸出,而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。然后加碱蒸馏,使氨蒸出, 用硼酸吸收后再宜标准盐酸溶液滴定,根据盐酸消耗体积计算出蛋白质的含量。 二、实验步骤准确称样品0

3、.22g,小心移入干净洁净的消化瓶中,然后加入硫酸铜0.5g,硫酸 钾9.5g和浓硫酸20ml,轻轻摇匀后置于电炉上小火加热,待内容物全部碳化,泡沫停 止产生后,加大火力,保持瓶内液体微沸,至液体变蓝绿色透明后,再继续加热微沸 1 2h。冷却后加入200ml纯水,移入蒸馏瓶中,加入40%的氢氧化钠溶液150ml,瓶口塞 紧,冷凝管下端插入吸收瓶液面下,吸收瓶内盛有4%硼酸溶液50ml及混合指示剂2 3滴。加热蒸馏,至氨全部蒸出(蒸馏液约250ml即可),蒸馏结束用少量水冲洗冷凝管 下端的外部,取下接收瓶,以0.1 mol/L盐酸标准溶液滴定至灰色为终点,同时做空白 实验。计算:蛋白质(V1 - V2)x C x 0.014Wx F x 100V1样品消耗盐酸标准溶液的体积,毫升V2实际空白盐酸标准溶液的体积,毫升W称取样品的量C盐酸标准溶液的浓度(mol/L)0.014-与1ml盐酸标准溶液相当的以克表示氨基氮的质量F氮换算为蛋白质的因数,氮乘以6.25即为蛋白质

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