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1、湖南省大学生创新创业训练项目结题报告书项目名称:不同产地的侗药黄腊果中三种成分的含量测定项目编号：S项目负责人：李岚清专业班级：18级本临24班所在学院：医起止年月：2020年Ol月2021年12月电话：E-mail：填表日期：2023年SJ湖南医药学院一、基本情况项目名称不同产地的侗药黄腊果中三种成分的含量测定项目类型创新训练/创业训练口创业实践口成果形式撰写论文一篇立项时间2020年8月7日完成时间2021年12月31日验收时间年月日项目主要研究人员序号姓名学号专业班级所在学院项目分工1李岚清20医学院本临24班实验设计2易俊理20医学院本临18班样品处理3张振敏20药学院本药3班数据分析
2、4刘索20药学院本药4班数据汇总5二、项目执行情况简介内容提示：项目的目的和意义，项目成果的主要内容、重要观点或对策建议，创新特色、实践意义和社会影响，发表论文及获得专利情况，研究过程中财务执行情况，团队成员分工和合作情况，研究报告和过程记录的完整情况。（限定在1500字左右，附件另附）研究目的：（I）对湖南省怀化市的不同地区：洪江市、中方县、通道县的不同产地的黄腊果分别用高效液相色谱法（HPLC）测定黄腊果中惹草甘、木通苯乙醇昔B、山蔡酚-3-0-芸香糖甘三种成分的含量测定，探索黄腊果是否能够作木通入药，有利于加大中国药典中药木通的植物来源以及木通药材的市场需求。（2）定量角度实现客观评价怀
3、化市不同地区黄腊果的质量，所建立的黄腊果的含量测定方法为质量标准的研究和其进一步的开发研究提供了基础和科学依据。研究意义,黄腊果有多种药理作用，目前对黄腊果叶、藤茎、果皮、根等部位的化学成分有研究与报道，但未见对黄腊果化学成分进行定量分析的研究报道。黄腊果作为侗医常用药，近年来对其现代化研究越来越多，但缺乏对其质量标准的研究。本研究拟通过高效液相色谱法建立一种能够快速准确的对黄腊果质量进行控制的方法，为黄腊果藤茎的质量控制和分析提供一定的科学依据，同时也对不同产地的黄腊果的质量进行对比分析，为黄腊果的道地产区的选育奠定基础。项目成果的主要内容：（1）采用高效液相色谱法（HPLC）对洪江市、中方
4、县、通道县三个产地黄腊果中的茨草昔、木通苯乙醇昔B、山茶酚-3-0芸香糖昔三种成分进行了含量测定，建立了合适的含量测定方法，客观地评价了不同产地黄腊果的质量。（2）撰写论文一篇。成果重要观点及建议：不同产的黄腊果中有效成分的含量差异较大，综合来看以洪江市产黄腊果中有效成分的含量最高，这也为黄腊果道地产区的选育提供了参考。创新特色：侗药黄腊果为侗医常用药材，在武陵山片区资源丰富，取材非常容易，但前人对黄腊果的研究较少，通过本次研究首次对黄腊果中主要化学成分进行了定量分析和报道。实践意义和社会影响：侗药黄腊果为侗医常用药材，在武陵山片区资源丰富，取材非常容易，且关于黄腊果的报道目前只有提取分离及部
5、分有效成分的药理活性研究，未见对黄腊果化学成分定量分析进行报道。本课题组通过HPLC法对芭草甘、木通苯乙醇昔B、山蔡酚-3-O-芸香糖昔三种成分进行定量分析，一方面为探索黄腊果代替木通入药，扩充木通药材的基源。另一方面通过HPLC法初步建立侗药黄腊果质量评价方法，有利于少数民族医药的开发和民族经济的发展，促进侗族医药学的发展进程，进一步实现侗医药现代化。发表论文及获得专利情况：已发表EI收录论文一篇，题为HighPerformanceLiquidChromatography-DiodeArrayDetection（HPLC-DAD）MethodfortheDeterminationofThre
6、eComponentsintheLeavesofStauntoniaBrachyantherafromDifferentRegions.研究过程中财务执行情况；科研经费共计1.0万元，已全部用完，严格按照科研经费管理办法的要求，用于标准品、实验耗材和试剂采购、论文版面费。团队成员分工和合作情况：在指导老师的带领下，成员之间进行合理分工，克服困难，加强自身知识和素质的提高，使项目能够良好完成预期。在项目实施过程中，成员们在完成自己部分的同时都积极参与各部分，团结一心，相互鼓励。研究报告和过程记录的完整情况：研究过程记录完整可查，实验过程均已记录在实验记录本上。三、研究总结报告内容提示：预定计划执
7、行情况，项目研究和实践情况，项目取得的主要成绩和收获，项目工作有哪些不足，有哪些问题尚需深入研究，项目工作中的困难、问题和建议。（限定在I（X）O字左右，附件另附）预定计划执行情况：2020.01-2020.03对湖南省怀化市的不同地区：洪江市、中方县、通道县的侗药黄腊果进行采集，并且干燥，粉碎。2020.04-2020.12：对侗药黄腊果进行HPLC分析，方法学考察，含量测定。2021.01-2021.12：数据分析，标准曲线法计算黄腊果中荔草昔、木通苯乙醉甘B、山茶酚30-芸香糖昔三种成分的含量，撰写论文，完成结题报告。项目研究和实践情况：通过对黄腊果叶部分的提取条件优化，得到其最佳提取条
8、件为：70%甲醇，料液比1：15,超声60min,温度50C,此条件下提取率最高。建立了黄腊果中及草昔、木通苯乙醇甘B、山蔡酚-3-0芸香糖甘的含量测定方法-HPLC法，方法简便、快读，流动相配制简单，色谱峰分离良好。（方法DiamOnSi1C18色谱柱（4.6mmX250mm,5m）,乙腾0.2%甲酸水为流动相梯度洗脱，检测波长340nmo）方法学考察的结果均符合要求。由测得结果得到：不同产地的侗药黄腊果中药草昔、木通苯乙醇昔B、山蔡酚-3-0芸香糖甘含量有较大差别，其中以洪江市的含量最高。项目取得的主要成绩和收获：这次大学生创新性实验计划项目给我们带来了很多，有能力上的提高，有思维上的创新
9、，有情谊上的收获。在忙碌中充实了自己，学到了很多东西，并坚持认真细致地完成了项目的研究内容。收获主要有以下几点：（1）对侗药黄腊果有了更深的认识，熟悉了其处理方法。（2）对液相技术更熟练，已能解决大部分问题。（3）能及时调整方案，从不同角度分析问题。（4）增强了成员们自主性、创新性、协作性。项目工作中的不足：（1）由于经费有限，侗药黄腊果的采集只集中在了洪江市、中方县以及通道县等地区。（2）由于经验不够，前期处理出现了部分小问题，包括方案设计、仪器限制等，但最后还是顺利解决了绝大部分的问题。需进一步深入研究的问题：（1）收集侗药黄腊果除洪江市、中方县以及通道县以外的采集区域。（2）进一步优化侗
10、药黄腊果的提取方法，包括提取溶剂的选用，料液比的考察，提取时间，提取温度。优化HPLC分析方法，包括流动相的考察，流动相配比，不同的色谱柱和系统适应性考察等。项目工作中的困难、问题和建议：（1）由于经验不够，前期处理经常出现各种问题，包括方案设计、仪器限制等，但最后还是顺利解决了大部分问题。（2）天气暖的时候甲酸水每天都需要新配。（3）样品初提完毕不能放置超过12ho放置过久会导致保留时间的变化以及峰型、分离度的改变。（4）流动相加了酸，冲柱时要先用纯水和乙糖以一定比例冲洗。（5）液相方法应先确定流动相，从药典中找到对应物质，综合三种物质在药典记载中使用的流动相确定有机相及水相。（6）乙箱久置
11、容易发生聚合，损坏色谱柱，因此在长时间未使用时或者有肉眼可见的絮状物时应对其进行抽滤。四、经费使用情况经费合计1。万元，其中，学校配套资助。元，学院（所）配套资助O元，其他经费。元。经费支出情况：科研经费共计1.0万元，己使用1.0万元，剩余。元，严格按照科研经费管理办法的要求，经费主要用于斐草昔、木通苯乙醇昔B、山蔡酚-3-0-芸香糖昔三种标准品的采购、实验耗材和试剂（色谱乙般、色谱甲醇、磷酸、乙酸乙酯、微孔滤膜、液相瓶）的采购、论文发表版面费。五、学院评审意见内容提示：院系专家组对结题的意见，包括对项目研究工作和研究成果的评价等。专家组组长（签章）：年月日六、学校创新创业训练计划领导小组审核意见负责人（签章）：年月日
