(江苏专版)2020版高考生物一轮复习 第4讲 DNA的粗提取与鉴定讲义(含解析)(选修1 ).doc

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1、 思维导图成一统基础速练固根基1判断下列叙述的正误(1)用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除蛋白质()(2)提取DNA时,如果没有鸡血材料,可用猪血代替()(3)在DNA的粗提取与鉴定实验中,用菜花替代鸡血作为实验材料,其实验操作步骤相同()(4)洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度()(5)将制备的含有DNA的滤液加入6075 的恒温水浴箱中保温1015 min,可以将DNA析出()(6)实验中两次使用蒸馏水的目的不同()(7)在DNA的粗提取与鉴定实验中,将丝状物溶解在2 mol/L NaCl溶液中,加入二苯胺试剂即呈蓝色()2填空识记实验原理(1)粗提取原

2、理:DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同,且不溶于冷酒精。DNA与蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同。溶解规律2 mol/L NaCl溶液0.14 mol/L NaCl溶液DNA 溶解析出蛋白质NaCl溶液物质的量浓度从2 mol/L逐渐降低的过程中,溶解度逐渐增大部分发生盐析沉淀溶解DNA与杂质对酶、高温和洗涤剂的耐受性不同。DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精,利用这一原理可将DNA与蛋白质进一步分离。(2)鉴定原理: DNA二苯胺试剂蓝色。3填空掌握操作流程4据图回答操作的目的分别是什么 _,_,_,_。提示:是使鸡血细胞吸水涨破释放出核物质;是析出DNA,

3、去除溶于酒精的杂质;是使DNA溶解在2 mol/L NaCl溶液中;是稀释NaCl溶液使其浓度接近0.14 mol/L,去除溶于低浓度NaCl溶液的杂质。题组练透过考点1(2014江苏高考)下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验叙述,错误的是()A酵母和菜花均可作为提取DNA的材料BDNA既溶于2 mol/L NaCl溶液也溶于蒸馏水C向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌,可见玻棒上有白色絮状物DDNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝解析:选C原则上含DNA的生物材料都可用来提取DNA,只是选用DNA含量高的生物组织,成功的可能性更大;DNA在2 mol/L NaCl溶液和蒸馏水中溶解度都较大;向

4、鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌,鸡血细胞会吸水破裂,但在蒸馏水中不会析出DNA;DNA溶液加入二苯胺试剂后需沸水浴加热,待冷却后溶液变蓝。2(2015江苏高考,多选)下图1、2分别为“DNA的粗提取与鉴定”实验中部分操作步骤示意图,下列叙述正确的是()A图1、2中加入蒸馏水稀释的目的相同B图1中完成过滤之后保留滤液C图2中完成过滤之后弃去滤液D在图1鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质解析:选BCD图1中加入蒸馏水的目的是使鸡血细胞吸水涨破,图2中加入蒸馏水的目的是调节盐溶液的浓度,使DNA析出。图1中含有DNA的核物质位于滤液中,因此完成过滤后应保留滤液。图2中析出的DNA在纱布上,因此完成过

5、滤后应弃去滤液。嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶,能催化杂质蛋白的分解。归纳拓展1DNA粗提取实验中的三个注意点(1)本实验不能用哺乳动物成熟红细胞作实验材料,原因是哺乳动物成熟红细胞无细胞核。(2)因DNA容易被玻璃容器吸附,实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管,减少提取过程中DNA的损失。(3)每次用玻璃棒搅拌时都要沿同一方向,防止打碎DNA分子。2DNA的粗提取与鉴定实验中的“2、3、4”(1)加蒸馏水2次:加到鸡血细胞液中,使血细胞吸水涨破;加到含DNA的2 mol/L的NaCl溶液中,使NaCl溶液的浓度下降到0.14 mol/L,使DNA析出。(2)用纱布过滤3次:过滤血细胞破裂液,得到含细胞

6、核物质的滤液;滤取0.14 mol/L的NaCl溶液中析出的DNA(黏稠物);过滤溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液。(3)用NaCl溶液4次:加2 mol/L的NaCl溶液,溶解提取的细胞核物质;用0.14 mol/L的NaCl溶液使DNA析出;用2 mol/L的NaCl溶液,溶解滤取的DNA黏稠物;用2 mol/L的NaCl溶液,溶解丝状物用于鉴定DNA。课堂巩固练小试身手1(2013江苏高考)某同学用洋葱进行DNA粗提取和鉴定实验,操作错误的是 ()A加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨 B用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的DNA C加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌 D加二苯胺试剂摇匀后沸水

7、浴加热 解析:选A加入洗涤剂后研磨动作要轻缓、柔和,否则会产生许多泡沫,不利于后续步骤的操作;蛋白酶能够分解蛋白质,因此能起到纯化DNA的目的;加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以免引起DNA分子的断裂,导致DNA分子不能形成絮状沉淀;DNA可与二苯胺试剂在沸水浴条件下作用显蓝色。2下列关于“DNA粗提取和鉴定”实验的叙述,正确的是()A酵母菌、菜花和猪的成熟红细胞都可作为提取DNA的材料B在酒精溶液中,某些蛋白质的溶解度比DNA大C在研磨植物细胞时加入洗涤剂是为了溶解DNAD在5060 的水浴中,DNA遇二苯胺试剂后即呈蓝色解析:选B猪的成熟红细胞没有细胞核和众多细胞器,不含DNA,不能

8、作为提取DNA的材料;某些蛋白质溶于酒精溶液,而DNA不溶;研磨植物细胞时加入洗涤剂是为了瓦解细胞膜;沸水浴中,DNA遇二苯胺试剂呈蓝色。3下面为“DNA的粗提取与鉴定”实验的一些重要操作示意图,据图回答下列有关该实验的问题:(1)正确的操作顺序是_。(2)上图C、E步骤都加入蒸馏水,但其目的不同,分别是_和_。(3)上图A步骤中所用酒精必须经过_才能使用,该步骤的目的是_。(4)为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA,可滴加_试剂,沸水浴,如果出现_,则该丝状物的主要成分为DNA。解析:两次加入蒸馏水的作用:第一次是使鸡血细胞吸水涨破,DNA从细胞中释放出来进入滤液;第二次是使溶解于物质

9、的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中的DNA析出,与杂质分离。本题还涉及DNA的鉴定,DNA可在沸水浴条件下与二苯胺试剂作用,被染成蓝色。答案:(1)CBEDA(2)加速血细胞的破裂降低NaCl溶液的浓度,使DNA析出(3)充分冷却提取含杂质少的DNA(4)二苯胺蓝色课下模拟练自我检测一、选择题1鉴定DNA的试剂是()A斐林试剂B苏丹染液C双缩脲试剂 D二苯胺试剂解析:选D鉴定DNA用的试剂是二苯胺,苏丹染液用于鉴定脂肪,斐林试剂用于鉴定可溶性还原糖,双缩脲试剂用于鉴定蛋白质。2在提取DNA的过程中,最好使用塑料试管和烧杯,目的是()A不易破碎 B减少提取过程中DNA的损失C增加DNA的含

10、量 D容易刷洗解析:选BDNA易被玻璃器皿吸附,使用塑料试管和烧杯,可以减少DNA的损失。3(2018江苏高考)关于还原糖、蛋白质和DNA的鉴定实验,下列叙述正确的是()A在甘蔗茎的组织样液中加入双缩脲试剂,温水浴后液体由蓝色变成砖红色B在大豆种子匀浆液中加入斐林试剂,液体由蓝色变成紫色C提取DNA时,在切碎的洋葱中加入适量洗涤剂和食盐,充分研磨,过滤并弃去滤液D将DNA粗提物溶解在2 mol/L NaCl溶液中,加入二苯胺试剂,沸水浴后液体由无色变成蓝色解析:选D甘蔗茎的组织样液中含有大量的蔗糖,蔗糖属于非还原性糖,与斐林试剂在5065 的水浴加热条件下不会产生砖红色沉淀;大豆种子的匀浆液中

11、含有大量的蛋白质,鉴定蛋白质时应使用双缩脲试剂,双缩脲试剂在常温下能与蛋白质发生反应,生成紫色的络合物;提取DNA时,植物细胞需要先用洗涤剂瓦解细胞膜,在切碎的洋葱中加入适量的洗涤剂和食盐,进行充分的研磨,过滤后收集滤液;在沸水浴条件下,DNA与二苯胺试剂反应呈现蓝色。4下列有关DNA的粗提取与鉴定实验的叙述,正确的是()A取材:鸡血细胞。原因:有细胞核,其他动物的血细胞都没有细胞核B粗提取:不同浓度的NaCl溶液。原因:DNA在其中的溶解度不同C提纯:95%的冷酒精。原因:DNA溶于酒精,蛋白质等杂质不溶于酒精D鉴定:二苯胺试剂。原因:DNA溶液加入二苯胺试剂即呈蓝色解析:选B除了哺乳动物成

12、熟的红细胞,其他动物的血细胞都有细胞核。DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,从而粗提取DNA。DNA不溶于酒精,蛋白质等杂质溶于酒精,进而提纯DNA。DNA溶液加入二苯胺试剂后需沸水浴加热才会呈蓝色。5在DNA粗提取与鉴定实验中,将获得的含有DNA的黏稠物分别按下表处理3次,则DNA主要集中在标号()操作黏稠物滤液2 molL1的NaCl溶液搅拌过滤0.14 molL1的NaCl溶液搅拌过滤95%的冷酒精搅拌过滤A. BC D解析:选BDNA在2 molL1的NaCl溶液中溶解度大,过滤后DNA存在于滤液中;DNA在0.14 molL1的NaCl溶液中溶解度低,搅拌过滤后存在于黏稠物

13、中;DNA不溶于95%的冷酒精,搅拌过滤后存在于黏稠物中。6如图是“DNA粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤示意图,下列相关叙述正确的是()A图1中溶液a是0.14 molL1的NaCl溶液B图1所示操作的原理是DNA能溶于酒精,而蛋白质等杂质不溶C图2所示实验操作中有一处明显错误,可能导致试管2中蓝色变化不明显D图2试管1的作用是证明2 molL1 NaCl溶液遇二苯胺出现蓝色解析:选C图1中是将丝状物溶解,溶液a是2 molL1的NaCl溶液;加入冷却的酒精的目的是除杂,原理是DNA不溶于冷酒精,而杂质蛋白能溶于酒精;图2操作中的错误是试管2中未将DNA溶于2 molL1的NaCl溶液中,可能导致试管2蓝色变化不明显;图2试管1的作用是证明2 molL1NaCl溶液遇二苯胺不会出现蓝色。7(2019南通二模)下列是“肝脏细胞DNA粗提取”实验的两个关键操作步骤,相关叙述错误的是()A步骤1中,加入柠檬酸钠缓冲液的目的是维持pH的稳定B步骤1中,冰浴处理的主要原理是低温下DNA水解酶容易变性C步骤2中,异戊醇的作用可能是使与DNA结合的蛋白质因变性而沉淀D步骤2中,离心后应取上清液,因为DNA在2molL

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