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1、 鸿鹰祥生物工程有限公司实习报告实习目的：1、 我们学生不仅要学习好课本上的理论知识，更要将我们的理论应用于实践。实习就是培养我们的实践能力，用实践来检验我们的学习情况，发现我们的不足，完善我们的学习理论。同时实践是发现问题、研究问题、解决问题的重要手段。2、 让我们更好地了解生物工程产品工业化生产的全过程以和生产单位的组织管理、销售等方面的知识。3、 了解目前生物产业的发展状况、了解目前社会就业情况。确定自己的位子，为将来走向就业岗位做好思想准备和业务准备。实习要求：学生在实习中要做好各类报告、车间实习等各个环节的记录，学生应将每天的工作、观察研究的结果、收集的资料、所听报告内容等记入实习日
2、记。实习日记是学生编写实习报告的主要资料依据，也是检查学生实习情况的一个重要方面和评定实习成绩的重要依据，学生每天必须认真填写，教师应随时检查实习日记。实习时间： 2011年4月12日至2011年4月22日实习安排： 分小组进行，本来要分四组的，由于中心化验室出了点小状况，改成三个组，我们成员：熊佳福（组长）、谢婧、陈畅、黄海波、瞿俊岚、王经纬。三个组分三个地方实习，三天一轮换，确保每个小组能到每个车间实习，同时每个都有人在实习，除了中心化验室除了点小状况，其他三个车间为：发酵车间、提取车间、车检化验室。轮换前天晚上每大组要开一次会，完成小组的交接工作，避免问一些重复简单问题，讲清楚每组要注意
3、的问题，方便下一组的实习。 本组具体实习小河间安排： 4.134.15：提取车间 4.164.18：发酵车间 4.194.21：车间化验室 实习单位基本情况： 湖南鸿鹰祥生物工程股份有限公司是在原湖南津市酶制剂厂的基础上经改制建立的股份制企业。1978年开始从事酶制剂生产，为中国最早的一批酶制剂行业重点生产企业，2005年被评为湖南高新技术企业。公司占地面积4万平方米，配备现代化发酵设备800立方米和国际先进的超滤设备，年产酶制剂10万标吨。公司建有酶制剂研究所和顾客应用技术服务中心。主导产品有“梅花”牌糖化酶、中温淀粉酶、耐高温-淀粉酶、-淀粉酶等，产品畅销全国各地并远销欧美、日本、印度、东
4、盟等世界多个国家和港、澳、台地区，除广泛应用与酿造、制药、制糖等传统工业外，现已大量用于燃料乙醇等可再生能源的工业生产领域，并以高纯度、高转化率的优秀品质享誉海内外。“酶花”牌糖化酶历届荣获省优产品称号。2001年，2004年连续两届被授予“湖南名牌”。 公司于2001年通过ISO9001：2000质量管理体系认证，ISO14001环境管理体系认证，KOSHER（犹太认证），严格按照质量管理体系组织生产、经营、并在此基础上逐步实施GMP管理。公司以“诚信经营、科技兴业”为企业宗旨，坚持“以规范的管理，保证质量标准；以最新的技术，促进品质提升；以周到的服务，赢得顾客满意”的质量方针，竭诚为广大客
5、户提供高品质和高满意度的服务。公司产品介绍：（1）糖化酶（固、液两种） 作用：淀粉转化为葡萄糖 用途:酒精、淀 粉（2）耐高温淀粉酶（100110） 用途：应用于酒精、白酒、啤酒、味精、饴糖、葡萄糖等工业中液化淀粉和纺织业高温退浆。高温-淀粉酶具有极好的耐热性（3）中温淀粉酶（6080 ） 用途：纺织、印染（4）淀粉酶 生产工艺流程：蒸汽无菌蒸汽电力压滤盐析压滤加37-38的元明粉调配干燥灌装混粉入库包装入库加防腐剂：山梨酸钾和苯甲酸钠 非加碘食盐：调节比重，稳定pH中心化验室测酶活浓缩超滤絮凝绞条发 酵 车 间菌种原材料车间化验室硅藻土 钠基膨润土珍珠岩CaCl2 Na2HPO4 聚丙烯酰胺
6、无水硫酸钠等绞条后固体颗粒粗，需干燥、粉碎如此重复2到3次下面我们再按车间的生产顺序来具体讲叙工厂生产的工艺流程以和要注意的一些事项：菌种的选育和培养：由于中心化验室除了点小状况，而菌种由位于中心化验室，对于他们的菌种不是很了解，仅知道是从国外进口的经基因工程改造后的高产酶，经过菌种经过菌种的复苏，菌种的筛选，获得生长旺盛，产酶量高的优良菌种进行扩大培养，主要为黑曲霉（糖化酶）和枯草芽孢杆菌（耐高温淀粉酶、中温淀粉酶）种子的扩大培养和发酵工艺和控制（发酵车间和车间化验室）该公司采用补料分批发酵方式发酵。所谓补料分批发酵是指半连续发酵或流加分批发酵，是指在分批发酵过程中，间歇或连续地补加新鲜培养
7、基的发酵方式。其优点有：使发酵系统中维持很低的基质浓度；和连续发酵比、不需要严格的无菌条件；会产生菌种老化和变异等问题。不过其也有一些缺点：存在一定的非生产时间；和分批发酵比，中途要流加新鲜培养基，增加了染菌的危险。发酵车间有四种发酵罐，分为四级发酵。一、二、三级发酵为种子罐，菌种扩大培养在此进行，四级罐为发酵生产罐。由于有有氧发酵，因此还附有空气采集、净化和输送系统。另外还有锅炉蒸汽系统。 （一）发酵车间工艺流程清洗发酵罐灭菌冷却接种一级发酵罐二级发酵罐三级发酵罐四级发酵罐放罐（二）发酵原料 发酵原料有主要是玉米浆 玉米淀粉 豆粕和无机盐等。发酵原料先需在配料池按培养基配方配好再加中温淀粉酶
8、液化一定时间，再经高温淀粉酶。液化的目的使淀粉转化为可发酵性糖，还可以节约成本提高原料的利用率，减少机器的损伤。（三）发酵设备发酵设备主要有：发酵罐和补料罐等。发酵罐的主要部件有：罐体：主要用来培养发酵各种菌体，密封性要好（防止菌体被污染）；罐体当中有搅拌浆，用于发酵过程当中不停的搅拌；底部通气的Sparger，用来通入菌体生长所需要的空气或氧；罐体的顶盘上有控制传感器，最常用的有pH电极和DO电极，用来监测发酵过程中发酵液pH和DO的变化控制器，用来显示和控制发酵条件等等；发酵罐外部有两个钢化玻璃制作的视镜，一个上有照明灯，另一个是用来观察搅拌发酵中的情况；人梯：有工人师傅下罐查看发酵死角（
9、藏污纳垢之所）的梯子；发动机：发酵罐的顶部有带动搅拌桨转动的动力装置（四）发酵灭菌空消：压强0.12Mpa 灭菌时间60min实效：压强：0.11-0.12Mpa；温度：121-123，灭菌时间：35-40min。（如果是空气比较潮湿的季节，由于物料容易霉变，因此灭菌时间要适当延长，一般为45min左右）（五）发酵接种种母摇瓶培养48h后，菌种生长处于对数生长期，开始接种。接种步骤如下：1、用纱布裹住酒精圈，倒上酒精；2、将酒精圈套在发酵罐的通料口上，再点燃酒精圈，在高处撑伞；3、将菌种瓶瓶口在火上预热1分钟左右，倒入含有菌种的培养液；4、关上通料口，取下酒精圈，熄火。（六）发酵参数和过程控制
10、发酵条件控制主要指对温度、pH、罐压、通气量、泡沫和补料等的控制。一般的，一、二、三级种子罐每三十分钟检查温度一次，每六十分钟检查罐压、风量一次；发酵罐每三十分钟检查温度一次；每六十分钟检查罐压、风量一次；每六十分钟检查PH值一次。以糖化酶为例，说明参数如下：项目酶罐温（）罐压（Mp）通气量（m/h）pHDE糖化酶340.3-0.9一级罐不通气二级罐80三级罐300四级罐400-9004.2-4.920-90以高淀生产为例说明种子罐控制：1、一级罐温度控制正常为37-39 任何时间主任检查，温度高于39或低于36是为违规操作；2、一级种子罐取样口必须跑蒸汽，取样后准确保样阀关紧；3、压力：每小
11、时记录，罐压力控制在0.08-0.10Pa；4、PH的测定：测消后PH记录，在后46小时，测定PH值，但PH高于消后PH值，和时通知值班主任来处理。发酵过程参数的控制：1、温度控制温度对微生物的影响，不仅表现在对菌体表面的作用，而且因热平衡关系，热量传递到菌体内，对菌体内部的所有物质与结构都有作用。该公司采用的最适发酵罐的温度为34左右。发酵罐内的温度一般用蛇形管冷却系统来维持，温度过高则增大冷却水流量，温度过低则将热蒸汽通入蛇形管来升温。如果温度过高难以降下来，可以以自来水喷淋发酵罐来辅助降温。2、pH值控制pH对发酵的影响有：（1）发酵液的pH值的改变，使微生物细胞原生质膜的电荷发生改变。
12、（2）发酵液的pH值直接影响酶的活性。（3）发酵液的pH值影响培养基某些重要营养物质和中间代谢产物的解离，从而影响微生物对这些物质的利用。（4）发酵液的pH值影响菌体的代谢过程。对于第一级种子罐的pH只进行监测，而不调控，因为其pH的变化是其发酵成熟的判断标准，当pH由4.8降到3.0时，一级发酵罐成熟。而其余的几级发酵罐的pH控制在4.8左右。由于黑曲霉的发酵过程是一个产酸的过程，因此随着发酵时间的延长，pH不断降低，这时需要用补充氨气来提高pH值。氨气的补充量即氨气的通人时间是由实践经验来确定的。氨气补充不能过量，过量后pH升高，容易杀死微生物。导致发酵失败。3、通气控制溶氧是需氧发酵控制
13、最重要的参数之一。由于氧在水、发酵液的溶解度都很小，因此，需要不断的通气和搅拌，才能满足不同发酵过程对氧的需求。溶氧的大小对菌体生长和产物的形成都会产生不同的影响。4、泡沫控制泡沫是气体在液体中的粗分散体。属于气液非均相体系，在这个体系中，分散相是（气体），连续相（液体）。产生的原因有：（1）由外界引进的气流被机械地分散形成；（2）发酵过程中产生的气体聚结生成；气液接触：搅拌液体时混入气体；气体从液体内部产生；含助泡；起泡速度高于破泡速。泡沫对发酵的不利影响有：（1）降低发酵设备的利用率；（2）增加了菌群的非均一性；（3）增加了染菌的机会；（4）导致产物的损失。一般采用化学消泡法即在发酵液中加
14、如食用油使泡沫破碎。 发酵罐内部构造 发酵记录数据 正在清洗发酵罐 （七）发酵期间产品检测车间化验室是检测发酵期间各级罐的酶活力和DE值的地方，根据DE值和酶活力值判断什么时候需要给级罐补料，什么时候放罐，是否染菌。但在车间化验室，对酶活力的测定没有中心化验室精确，但在方法上大致与中心化验室一致（高温淀粉酶和中温淀粉酶除外）。一级种子罐：8h 后测DE值，32h每4h测定DE值。二级种子罐：8 h后测DE值，32h每8h测DE值和酶活力。三级种子罐：8h后测值，每后测值与酶活力。大罐（四级罐）：每测值与酶活力，补料后每测一次值。1、DE值的测定（1）DE值的定义：还原糖与糖浆干物质的百分比。国
15、家标准中DE值越高，葡萄糖的级别越高，工业上用DE值（也称葡萄糖值）表示淀粉的水解程度或糖化程度 糖化液中还原性糖全部当作葡萄糖计算，占干物质的百分比称为DE值。（2）测定原理：用菲林试剂法测定发酵液中的每ml发酵液中葡萄糖的含量（3）取样：（4）试剂的配置： 菲林试剂（A液：称取69.3g纯硫酸铜并溶解于900 ml的蒸馏水中，并用蒸馏水定容至1000 ml；B液：称取346g酒石酸钾纳和100g氢氧化钠，用蒸馏水溶解并定容至1000 ml）；30%的KI溶液；26%硫酸溶液；1%淀粉指示剂；0.1N 硫代硫酸钠溶液；1%的标准葡萄糖溶液 （5）测定步骤： 在三角瓶中加入适量的样品，吸取的体积要求控制消耗0.1N 硫代硫酸钠溶液在10ml
