分散酶II可应用于组织的解离

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本资料为word版2023年整理分散酶II可应用于组织的解离 分散酶II （中性蛋白酶）是一种氨基酸内肽酶，可水解非极性氨基酸残基的 N 端肽键。该序列常见于胶原蛋白。分散酶II 具有温和的蛋白水解作用，可用于原代细胞的分离和常规传代。分散酶II 相对温和，在生理温度和 pH 值下具有良好的解离能力，通常可维持细胞膜完整性。 分散酶II能快速有效且温和的破坏组织细胞外基质释放单细胞培养物(原代细胞培养物)或收集已培养的细胞将其转移到新的培养基质上(传代培养)。 分散酶II可应用于组织的解离，具体步骤如下： 1、用无菌的小刀或者剪刀将组织剪成合适大小的组织块。 2、用无菌PBS清洗组织块。 4、37C孵育，孵育过程缓慢搅拌直至组织块全部解离。（若 一次使用该酶，可通过细胞计数来确定需要的总孵育时间。一般对于较难解离组织，1h即可达到分离目的，但更长时间(如数小时)的孵育也不会明显影响细胞活性。） 6、离心沉淀细胞，倒掉酶溶液; 7、用培养基重悬细胞沉淀，并于常规条件下培养细胞。 搜索 复制 第2页，共2页