(通用版)高考生物一轮复习课件1.2微生物的培养与应用(含解析)

第2课微生物的培养与应用考点一微生物的实验室培养考点一微生物的实验室培养 【核心知识核心知识突破突破】1.1.培养基：培养基：(1)(1)概念：人们按照微生物对概念：人们按照微生物对_的不同需求，的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。配制出供其生长繁殖的营养基质。营养物质营养物质(2)(2)种类：液体培养基和种类：液体培养基和_培养基，二者的区别是培养基，二者的区别是是否添加是否添加_。(3)(3)营养成分。营养成分。主要营养物质：主要营养物质：_、_、水和无机盐。、水和无机盐。其他条件：其他条件：pHpH、_和氧气。和氧气。固体固体凝固剂凝固剂碳源碳源氮源氮源特殊营养特殊营养2.2.无菌技术：无菌技术：(1)(1)目的：获得目的：获得_。(2)(2)关键：防止关键：防止_的入侵。的入侵。(3)(3)常用方法：常用方法：_和和_。纯净的培养物纯净的培养物外来杂菌外来杂菌灭菌灭菌消毒消毒(4)(4)无菌技术的主要方法及适用对象无菌技术的主要方法及适用对象(连一连连一连)：3.3.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：(1)(1)计算：依据配方比例，计算配制计算：依据配方比例，计算配制100mL100mL的培养基的培养基时，时，_的用量。的用量。(2)(2)称量：准确地称取称量：准确地称取_。各种成分各种成分各种成分各种成分(5)(5)倒平板：待培养基冷却至倒平板：待培养基冷却至_左右时，在左右时，在_倒平板。倒平板。5050酒精灯酒精灯火焰附近火焰附近4.4.纯化大肠杆菌：纯化大肠杆菌：(1)(1)菌落：由菌落：由_繁殖而来的肉眼可见的繁殖而来的肉眼可见的_群体。群体。一个细胞一个细胞子细胞子细胞(2)(2)主要方法及纯化原理：主要方法及纯化原理：主要方法主要方法平板划平板划线法法稀稀释涂布平板法涂布平板法纯化原理化原理通通过接种接种环在在琼脂脂固体培养基的表面固体培养基的表面_操作，将操作，将聚集的菌种逐步稀聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表分散到培养基表面面将菌液将菌液进行一系列行一系列的的_，稀，稀释度足度足够高高时，聚，聚集在一起的微生物集在一起的微生物将被分散成将被分散成单个个细胞胞连续划线连续划线梯度稀释梯度稀释主要方法主要方法平板划平板划线法法稀稀释涂布平板法涂布平板法主要步主要步骤 _操作操作系列稀系列稀释操作和涂操作和涂布平板操作布平板操作接种工具接种工具接种接种环_平板示平板示意意图 平板划线平板划线涂布器涂布器(3)(3)平板划线操作中灼烧接种环的目的：平板划线操作中灼烧接种环的目的：灼灼烧时间灼灼烧目的目的第一次划第一次划线前前杀死接种死接种环上原有的微生物，防止上原有的微生物，防止 _污染培养基染培养基第二次及以后第二次及以后每次划每次划线前前杀死上次划死上次划线后接种后接种环上残留的菌上残留的菌种，使下次划种，使下次划线的菌种直接来源于的菌种直接来源于_最后一次划最后一次划线后后杀死接种死接种环上残存的菌种，避免上残存的菌种，避免细菌菌_和和_外来杂菌外来杂菌上次划线的末端上次划线的末端污染环境污染环境感染操作者感染操作者(4)(4)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请培养的效果图，请分析：分析：获得图获得图A A效果和图效果和图B B效果的接种方法分别是什么？效果的接种方法分别是什么？提示：提示：获得图获得图A A效果的接种方法为稀释涂布平板法，获效果的接种方法为稀释涂布平板法，获得图得图B B效果的接种方法为平板划线法。效果的接种方法为平板划线法。某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成了一片，最可能的原因是什么？应当怎样操作落连成了一片，最可能的原因是什么？应当怎样操作才可避免此种现象？才可避免此种现象？提示：提示：最可能的原因是菌液浓度过高或划线时在划下最可能的原因是菌液浓度过高或划线时在划下一区域前未将接种环灼烧灭菌；采取的措施是增大稀一区域前未将接种环灼烧灭菌；采取的措施是增大稀释倍数或每次划新区域前先将接种环灼烧灭菌。释倍数或每次划新区域前先将接种环灼烧灭菌。接种操作为什么一定要在火焰附近进行？接种操作为什么一定要在火焰附近进行？提示：提示：火焰附近存在无菌区域。火焰附近存在无菌区域。5.5.菌种的保藏方法：菌种的保藏方法：主要方法主要方法临时保藏法保藏法甘油管藏法甘油管藏法保藏保藏对象象 频繁使用的菌种繁使用的菌种_的菌种的菌种方法步方法步骤先接种到先接种到试管的管的_培养基培养基上培养，然后放入上培养，然后放入4 4 的冰箱中的冰箱中转入入灭菌后的菌后的 _中，混匀中，混匀后放在后放在-20-20 冷冷冻箱中保存箱中保存长期保藏长期保藏固体斜面固体斜面甘油甘油6.6.【教材易漏知识教材易漏知识】选修选修1 1P18“P18“旁栏小资料旁栏小资料”：微生物的接种方法只有平板划线法和稀释涂布平板法微生物的接种方法只有平板划线法和稀释涂布平板法吗？微生物接种的核心是什么？吗？微生物接种的核心是什么？提示：提示：不是。微生物的接种方法还包括斜面接种、穿不是。微生物的接种方法还包括斜面接种、穿刺接种等，其核心是防止杂菌污染，保证培养物的纯刺接种等，其核心是防止杂菌污染，保证培养物的纯度。度。【微点警示微点警示】微生物培养的微生物培养的“三点提醒三点提醒”(1)(1)培养基中营养物质的确定方法。培养基中营养物质的确定方法。自养型微生物所需的主要营养物质是无机物，碳源自养型微生物所需的主要营养物质是无机物，碳源可来自大气中的可来自大气中的COCO2 2，氮源可由含氮无机盐提供。，氮源可由含氮无机盐提供。异养型微生物所需的营养物质主要是有机物，即碳异养型微生物所需的营养物质主要是有机物，即碳源必须由含碳有机物提供，氮源也主要由有机物提供，源必须由含碳有机物提供，氮源也主要由有机物提供，部分异养型微生物也可以利用无机氮源。部分异养型微生物也可以利用无机氮源。(2)(2)选择无菌技术的原则。选择无菌技术的原则。考虑无菌技术的效果：灭菌的效果比消毒要好。考虑无菌技术的效果：灭菌的效果比消毒要好。考虑操作对象的承受能力：活体生物材料、操作者考虑操作对象的承受能力：活体生物材料、操作者的手等只能采用消毒，而不能灭菌。的手等只能采用消毒，而不能灭菌。(3)(3)纯化大肠杆菌的两种方法的异同。纯化大肠杆菌的两种方法的异同。相同点：平板划线法和稀释涂布平板法都能获得单相同点：平板划线法和稀释涂布平板法都能获得单细胞菌落。细胞菌落。不同点：平板划线法不能对微生物计数，而稀释涂不同点：平板划线法不能对微生物计数，而稀释涂布平板法能对微生物计数。布平板法能对微生物计数。【秒判正误秒判正误】1.1.高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖。到零后，开启锅盖。()()分析：分析：高压灭菌加热结束后，让其自然冷却，当压力高压灭菌加热结束后，让其自然冷却，当压力表的压力降到零时打开排气阀。表的压力降到零时打开排气阀。2.2.在配制培养基时，一般微生物除满足营养需求外，在配制培养基时，一般微生物除满足营养需求外，还应该考虑还应该考虑pHpH、氧气及特殊营养物质的要求。、氧气及特殊营养物质的要求。()()分析：分析：一般微生物需要一定的营养、氧气、一般微生物需要一定的营养、氧气、pHpH及特殊及特殊物质物质(如添加维生素如添加维生素)，但培养厌氧微生物时，培养基，但培养厌氧微生物时，培养基不能与氧气接触。不能与氧气接触。3.3.倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上。溅到皿盖上。()()分析：分析：倒平板时左手拿培养皿，右手拿锥形瓶，左手倒平板时左手拿培养皿，右手拿锥形瓶，左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，倒入培养基后将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，倒入培养基后立即盖上培养皿皿盖。立即盖上培养皿皿盖。4.4.为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落。取菌落。()()分析：分析：灼烧接种环之后，要冷却后才能挑取菌落，以灼烧接种环之后，要冷却后才能挑取菌落，以免温度太高杀死菌种。免温度太高杀死菌种。5.5.从有机废水中分离分解有机物的微生物时，接种后从有机废水中分离分解有机物的微生物时，接种后的培养皿要放在光照培养箱中培养。的培养皿要放在光照培养箱中培养。()()分析：分析：接种后的培养皿应放在恒温培养箱中进行培接种后的培养皿应放在恒温培养箱中进行培养，光照会影响温度等条件。养，光照会影响温度等条件。6.6.筛选产乳糖酶的微生物时，宜用乳糖作为培养基中筛选产乳糖酶的微生物时，宜用乳糖作为培养基中的唯一碳源。的唯一碳源。()()分析：分析：在以乳糖为唯一碳源的培养基上，只有能产生在以乳糖为唯一碳源的培养基上，只有能产生乳糖酶而利用乳糖的微生物才能生存。乳糖酶而利用乳糖的微生物才能生存。【命题案例命题案例研析研析】【典例典例】(2018(2018全国卷全国卷)将马铃薯去皮切块，加水将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液，在马铃薯浸煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液，在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到到M M培养基。培养基。回答下列问题：回答下列问题：(1)M(1)M培养基若用于真菌的筛选，则培养基中应加入链培养基若用于真菌的筛选，则培养基中应加入链霉素以抑制霉素以抑制_的生长，加入了链霉素的培养基的生长，加入了链霉素的培养基属于属于_培养基。培养基。(2)M(2)M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除氮源外还有种营养物质，营养物质类型除氮源外还有_(_(答出两点即可答出两点即可)，氮源进入细胞，氮源进入细胞后，可参与合成的生物大分子有后，可参与合成的生物大分子有_(_(答出两点即可答出两点即可)。(3)(3)若在若在M M培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养。平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能培养。平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是_。该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是_。(4)(4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：品中微生物的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：甲同学涂布了甲同学涂布了3 3个平板，统计的菌落数分别是个平板，统计的菌落数分别是110110、140140和和149149，取平均值，取平均值133133。乙同学涂布了乙同学涂布了3 3个平板，统计的菌落数分别是个平板，统计的菌落数分别是2727、169169和和176176，取平均值，取平均值124124。有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其原因是低，其原因是_。【审答技巧审答技巧】(1)(1)审题关键：审题关键：理解形成理解形成“透明圈透明圈”的原因：淀粉遇碘变蓝，在培的原因：淀粉遇碘变蓝，在培养基中加入碘液后呈现蓝色，能产生淀粉酶的微生物养基中加入碘液后呈现蓝色，能产生淀粉酶的微生物可将淀粉分解成麦芽糖后蓝色消失，菌落周围会出现可将淀粉分解成麦芽糖后蓝色消失，菌落周围会出现透明圈。透明圈。题干中关键信息不要忽略：乙同学统计的菌落数分题干中关键信息不要忽略：乙同学统计的菌落数分别是别是“2727、169169和和176”176”，“27”27”不在不在“3030300”300”中，中，且与且与“169169和和176”176”重复组差距太大，意味着很可能操重复组