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1、DB 32/T XXXXXXXX18附录E（规范性）野外质量控制与保证E.1 样品的采集E.1.1 制定合理的采样操作程序，在确定的采样时间、采样点、采样层次，用符合质量要求的统一设备采样，采水量或采泥量尽量保持一致，以保证采集的样品具有代表性和可比性。E.1.2 保证所有野外设备处于良好的运行状态，须制定一项常规检查、维护及/或校准的计划，以确保野外数据的异质性和质量。E.1.3 合理安排各类生物样品采集顺序，尽量避免生物类群在采集前受到较大扰动。E.1.4 正确填写样品标签，包括样品编号、日期、水体名称、采样位置以及采集人姓名。E.1.5 及时清洗所有接触过样品的采样设备，并仔细检查，防止
2、采样污染。E.1.6 及时在现场处理样品。受生物活动影响，随时间变化明显的项目应在规定时间内测定。a)应全程佩戴无菌实验手套，采集下一个样品应及时更换手套。建议佩戴口罩；b)采样和前处理过程宜采用一次性无菌装置或耗材。对于重复使用装置和耗材，应选用 1.5%的漂白剂（主要成分为次氯酸钠）消毒不少于 1 分钟。c)重复使用的采样瓶，应浸泡在 50%的漂白剂中不少于 5 分钟，用蒸馏水重复冲洗 3 次，并晾干。在采样点，再次用水样冲洗三次，在采集样品前应除去任何残留的漂白剂。确保清洗后丢弃的水样未与待取的水样混合。d)如果有必要进入水中采样，应使用胶靴，并在采样点之间进行消毒。清除鞋底和靴子两侧的
3、所有污垢、鹅卵石和其他环境碎屑。e)水样过滤前，不应让手套接触被污染的表面，如任何未消毒的设备。若接触，应及时更换手套。f)过滤每个位点的水样前，应用 1.5%的漂白剂消毒过滤装置。E.2 采样记录除了样品相关信息，采样时间、地点、水温、气温、水文、植被等也应有详细记录，确保采样现场数据的完整性。E.3 样品的运输E.3.1 必须根据采样记录或登记表核对清点样品，以免有误或丢失。E.3.2 样品运输中贮存温度不超过采样时的温度，必要时需准备冷藏设备。E.3.3 运输中应仔细保管样品，以确保样品无破损、无污染。应避免强光照射及强烈震动。E.3.4 样品的运输尽量迅速。E.4 样品的保存DB 32
4、/T XXXXXXXXE.4.1 按照要求分别保存各类样品，保存时，每隔几周检查固定液，必要时进行添加。E.4.2 不同介质来源的环境 DNA 样品应单独运输保存，并置于不同冰箱中保存，若条件有限，应置于冰箱的不同储存室。E.4.3 环境样品一律不得与 DNA 样品共同运输保存，应置于不同冰箱中保存，若条件有限，应置于冰箱的不同储存室。DB 32/T XXXXXXXX20附录F（规范性）实验室防止样品污染注意事项F.1 运输与储存环境介质样品需与环境 DNA 样品分开保存、运输，实验室内应置于不同冰箱中保存，若条件有限，可置于冰箱的不同储存室。F.2 实验操作F.2.1 实验操作前，应用 75
5、%乙醇擦拭消毒桌面和双手。F.2.2 实验过程中应全程佩戴实验手套。F.2.3 同一耗材（例如 1.5 mL 离心管、移液枪头等）不得重复接触来自不同样品的实验材料。F.2.4 实验中应小心开关容器盖，样品不宜长时间敞口放置。F.2.5 怀疑或确定产生交叉污染的样品、试剂或耗材，不得继续使用。DB 32/T XXXXXXXX附录G（资料性）DNA 条形码数据表格DNA 条形码信息表格如表 G.1 所示。表 G.1 DNA 条形码信息表样本编号样本照片采样位点采样人/单位采样时间经纬度海拔温度鉴定人/单位鉴定时间分类特征中文名拉丁名分类信息（门纲目科属种）DNA 条形码引物信息16S 18S COI 线粒体 12S 其他:GC 含量序列长度测序平台序列序列原始峰图
