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1、资料仅供参考,不当之处，请联系改正。本标准规定了微生物和生物医学实验室生物安全防护的基本原则、实验室的分级、各级实验室的基本要求。本标准为最低要求。本标准适用于疾病预防控制机构、医疗保健、科研机构。总则资料仅供参考,不当之处，请联系改正。定 义实验室生物安全防护：实验室工作人员所处理的实验对象含有致病的微生物及其毒素时，通过在实验室设计建造、使用个体防护装置、严格遵从标准化的工作及操作程序和规程等方面采取综合措施，确保实验室工作人员不受实验对象侵染，确保周围环境不受其污染。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。当建设使用传染性或有潜在传染性材料的实验室前，必须进行微生物危害评估。应依据传染性微生
2、物致病能力的程度、传播途径、稳定性、感染剂量、操作时的浓度和规模、实验对象的来源、是否有动物实验数据、是否有有效的预防和治疗方法等诸因素进行微生物危害评估。通过微生物危害评估确定对象微生物应在哪一级的生物安全防护实验室中进行操作根据危害评估结果，制定相应的操作规程、实验室管理制度和紧急事故处理办法，必须形成书面文件并严格遵守执行必须形成书面文件并严格遵守执行。微生物危害评估资料仅供参考,不当之处，请联系改正。第一类，不引起健康成年人疾病第二类，可通过破损皮肤、消化道及粘膜暴露等方式引起人类疾病第三类，本土或外来的微生物，通过吸入途径暴露时可以造成严重或潜在致死性疾病第四类，可以引起严重且威胁生
3、命的人类疾病，可通过气溶胶传播，或相关的传播危险性不明的微生物生物安全防护实验室根据不同的微生物和防护要求分为四个生物安全防护级别。美国CDC/NIH对微生物指导性分类Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories 4th Edition, May 1999 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。实验室生物安全防护的基本原则实验室生物安全防护的内容包括安全设备、个体防护装置和措施（一级屏障），实验室的特殊设计和建设要求（二级屏障），严格的管理制度和标准化的操作程序及规程。应将每一特定实验室从立项、建设到使用维护的全过程中有关生物安
4、全防护综合措施的内容编入各实验室的生物安全手册中。必须设有专职的生物安全负责人。生物安全防护实验室根据不同的微生物和防护要求分为四个生物安全防护级别。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。安全设备和个体防护是确保实验室工作人员不与致病微生物及其毒素直接接触的一级屏障。生物安全柜是最重要的安全设备，形成最主要的防护屏障。实验室应按要求分别配备、级生物安全柜。所有可能使致病微生物及其毒素溅出或产生气溶胶的操作，除实际上不可实施外，都必须在生物安全柜内进行。不得用超净工作台代替生物安全柜。安全设备和个体防护（一级屏障）资料仅供参考,不当之处，请联系改正。必要时实验室应配备其它安全设备，如设置配有排风净
5、化装置的排气罩等，或采用其它不使致病微生物逸出确保安全的设备。实验室所配备的离心机应在生物安全柜或其它安全设备中使用，否则必须使用安全密封的专用离心杯。必须给实验室工作人员配备必要的个体防护用品，如个人防护服、防毒面具、安全眼镜或眼罩。安全设备和个体防护（一级屏障）资料仅供参考,不当之处，请联系改正。生物安全柜（biosafety cabinet） 处理危险性微生物时所用的箱型空气净化安全装置。 I I类生物安全柜类生物安全柜（class I biosafety cabinet） 至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作时柜正面玻璃推拉窗打开一半，上部为观察窗，下部为操作窗口。外部空气由
6、操作窗吸进，而不可能由操作窗口逸出。工作状态时保证工作人员不受侵害，但不保证实验对象不受污染。生物安全柜生物安全柜资料仅供参考,不当之处，请联系改正。类生物安全柜类生物安全柜（class biosafety cabinet） 至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气。工作时柜正面玻璃推拉窗打开一半，上部为观察窗，下部为操作窗口。外部空气由操作窗吸进，而不可能由操作窗口逸出。工作状态下遵守操作规程时既保证工作人员不受侵害，又保证实验对象不受污染。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。三、CLASS II 二级生物安全柜 CLASS II 级生物安全柜
7、根据结构以及气流 分配不同主要是外排气流不同分为： A型:（30%排在室内 ） B型: B1 （70%接管道外排） B2 （100%接管道外排） B3 （30% 接管道外排）资料仅供参考,不当之处，请联系改正。 CLASS II A 生物安全柜 由向下的气流和从开口处向内进入的气流混合后部分经HEPA高效过滤形成向下的气流进入工作区，部部分分（30%气气流流）经经HEPA过滤后外排在室内过滤后外排在室内； 允允许许经经HEPA过过滤滤的的外外排排气气流在实验室内排放；流在实验室内排放；资料仅供参考,不当之处，请联系改正。CLASS II B1生物安全柜 经过HEPA高效过滤的向下气流大部分由未
8、经污染的向内进入的气流和循环气流组成 大部分被污染的向下的气流气流（70%）通过专用的管道经）通过专用的管道经HEPA过滤后接管道外排至室过滤后接管道外排至室外外；资料仅供参考,不当之处，请联系改正。CLASS II B2生物安全柜 来自实验室内或室外的经过HEPA过滤的向下气流 （即：向下的气流中没有在安全柜内循环的气流）； 所有向内进入的气流和向下的气流均通过HEPA过滤后排到室外而不在柜内循环，也不能排入实验室；100%接接管道外排管道外排。 所有的被污染的管道和气流通道都在负压状态下或被直接外排的负 压管道或气流管道所包围。 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。3.3CLASS II
9、B3生物安全柜 经过HEPA过滤后的向下气流是由共用外排风道中的向下的气流和内向气流组成； 全部外排到室外的气流全部外排到室外的气流（30%）均经过）均经过HEPA高效过滤高效过滤 它与CLASS II A型气流方向相同，但与CLASS A型不同的是，它30%外外排排气气是是接接管管道道排排到到室室外外的的。 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。类生物安全柜（class biosafety cabinet） 至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气。正面上部为观察窗，下部手套箱式操作口。箱内对外界保持负压可确保人体与柜内物品完全隔绝。资料仅供参考
10、,不当之处，请联系改正。CLASS III生物安全柜 全封闭的、气密结构的通风柜 通过与柜体联结的橡胶手套进行操作；柜内保持至少120Pa的负压(0.50wg)；供气通过HEPA抽入内；外排的气流经过双双层层HEPA过滤或经HEPA后再经燃烧处理。 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。管理制度实验室内设置和准入在主实验室内应合理设置清洁区、半污染区和污染区非实验有关人员和物品不得进入实验室实验室工作人员、外来合作者、进修和学习人员在进入实验室及其岗位之前必须经过实验室主任的批准资料仅供参考,不当之处，请联系改正。实验室工作人员资格和培训实验室工作人员资格和培训实验室的工作人员必须是受过专业教育
11、的技术人员。在独立工作前须在中高级实验技术人员指导下进行上岗培训，达到合格标准，方可开始工作实验室的工作人员必须被告知实验室工作的潜在危险并接受实验室安全教育，自愿从事实验室工作实验室的工作人员必须遵守实验室的所有制度、规定和操作规程资料仅供参考,不当之处，请联系改正。实验室特殊管理对可能的危险因素，制定保证安全的工作程序事前进行有效的培训和模拟训练对于意外事故要能够提供包括紧急救助或专业性保健治疗的措施，足以应付紧急情况实验室事故处理及上报资料仅供参考,不当之处，请联系改正。实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物，如用于教学的普通微生物实验室等。包含
12、微生物举例 大肠杆菌 格鲁伯耐格里原虫 感染性犬肝炎病毒 枯草杆菌一级生物安全防护实验室资料仅供参考,不当之处，请联系改正。实验室应设洗手池（靠近出口处）实验室围护结构内表面应易于清洁。地面应防滑、无缝隙，不得铺设地毯实验室中的家具应牢固。应有专门放置生物废弃物容器的台（架）实验台表面应不透水，耐腐蚀、耐热实验室如有可开启的窗户，应设置纱窗一级生物安全防护实验室实验室设计及建造实验室设计及建造资料仅供参考,不当之处，请联系改正。 工作过程中禁止非工作人员进入实验室。接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及存储食物一级生物安全防护
13、实验室标准微生物操作规程标准微生物操作规程资料仅供参考,不当之处，请联系改正。使用机械移液器吸取液体，禁止口吸制定尖锐器具的安全操作规程按照实验室安全规程操作，降低溅出和气溶胶的产生每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时消毒所有培养物、废弃物在运出实验室前须进行灭活（如高压）。需运出实验室灭活的物品必须放在专用密闭容器内。一级生物安全防护实验室标准微生物操作规程资料仅供参考,不当之处，请联系改正。一级生物安全防护实验室 安全设施和个体防护安全设施和个体防护一般无须使用生物安全柜等专用安全设备工作人员在实验室应穿工作服，带防护眼镜工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套资料仅供参考,不当之
14、处，请联系改正。实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。包含微生物举例 麻疹病毒 沙门氏菌 乙型肝炎病毒 HIV 血清学检测 衣原体 志贺氏菌二级生物安全防护实验室资料仅供参考,不当之处，请联系改正。设计和建造的特殊要求设计和建造的特殊要求 消毒设施（高压灭菌锅、化学消毒装置等）消毒设施（高压灭菌锅、化学消毒装置等） 洗眼装置洗眼装置 可自动关闭的门锁可自动关闭的门锁 门口有发光指示装置门口有发光指示装置 换气装置（换气装置（3-4次次/小时）小时）资料仅供参考,不当之处，请联系改正。满足一级实验室 (标准微生物操作规程) 各款要求，在此基础上特别注意
15、制定出入制度实验室人口贴上生物危险标志制定实验室特定的生物安全操作规则每年一次最新培训制度二级生物安全防护实验室特殊微生物操作规程特殊微生物操作规程生物危险级资料仅供参考,不当之处，请联系改正。 禁止禁止用手处理破碎的玻璃器具。二级生物安全防护实验室特殊微生物操作规程特殊微生物操作规程使用塑料器材代替玻璃器材。 培养基、组织、体液及其它具有 潜在危险性的废弃物须放在防漏的容器中储存、运输及消毒、灭菌资料仅供参考,不当之处，请联系改正。v用过的针头禁止禁止折弯、剪断、折断、重新盖帽，禁止禁止用手直接从注射器取下。v用过的针头必须必须直接放入防穿透的容器中。v非一次性利器必须必须放入厚壁容器中并运
16、送到特定区域消毒，最好进行高压消毒资料仅供参考,不当之处，请联系改正。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。工作人员应接受必要的免疫接种和检测 (如乙型肝炎疫苗，卡介苗等)必要时收集从事危险性工作人员的本底血清严格执行实验室工作人员年度采血检测 HIV 抗体和备案制度。每半年进行一次 HIV 抗体检测，并保留样品对从事艾滋病实验室工作的人员，因工作中意外事故造成HIV 职业暴露者，所在单位应负责解决抗病毒及其它相应治疗的医疗费用二级生物安全防护实验室特殊微生物操作规程特殊微生物操作规程资料仅供参考,不当之处，请联系改正。实验设备在运出修理或维护前必须进行消毒人员暴露于感染性物质时，及时向实验室负责人汇报，并记录事故经过和处理方案禁止将无关动物带入实验室资料仅供参考,不当之处，请联系改正。处理以下致病微生物时应在生物安全柜 (级) 中进行 ，包括: 高浓度高浓度 大容量大容量 有喷溅可能性有喷溅可能性上述材料的离心操作如使用密封的离心机转子或安全离心杯，且只在生物安全柜中开闭，可在实验室中进行。级生物安全柜必须每年进行一次年度现场检测。二级生物安全防护实验室安全设施和个体防护资料仅供参考,
