生物化学检验实验室基本知识ppt课件

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1、1n本章内容概要:本章内容概要:第一节第一节 实验用纯水实验用纯水第二节第二节 实验用玻璃仪器实验用玻璃仪器第三节第三节 实验方法的选择实验方法的选择第四节第四节 实验方法的评价实验方法的评价第五节第五节 实验的诊断性能评价实验的诊断性能评价2n教学目的和要求:教学目的和要求:1 1、掌握掌握实验用纯水的三级标准;实验方法的分级、标准品分级实验用纯水的三级标准;实验方法的分级、标准品分级及相互之间的联系;实验误差的定义、分类和表示方法;方法及相互之间的联系;实验误差的定义、分类和表示方法;方法评价实验尤其是回收实验和干扰实验的原理和操作;诊断性能评价实验尤其是回收实验和干扰实验的原理和操作;诊

2、断性能评价的指标。评价的指标。2 2、熟悉熟悉纯水的制备方法;实验方法选择的的原则和步骤;方纯水的制备方法;实验方法选择的的原则和步骤;方法评价的基本内容和步骤;方法评价的指标;参考值和医学决法评价的基本内容和步骤;方法评价的指标;参考值和医学决定水平的概念。定水平的概念。3 3、了解了解水的纯度检查;方法性能判断的指标;受试者工作曲水的纯度检查;方法性能判断的指标;受试者工作曲线的应用和用途。线的应用和用途。3第一节第一节实验用纯水实验用纯水天然水天然水自来水自来水实验用纯水实验用纯水经简单的物理、化学经简单的物理、化学方法处理,除去悬浮方法处理,除去悬浮物质和部分无机盐物质和部分无机盐经蒸

3、馏、电渗析等处理,经蒸馏、电渗析等处理,除去杂质除去杂质( (悬浮物悬浮物, ,胶体胶体物质物质, ,溶解物质溶解物质) )4一、纯水的制备方法一、纯水的制备方法 n蒸馏法蒸馏法:优点优点: :设备简单设备简单缺点缺点:1:1、挥发性物质难以去除;、挥发性物质难以去除;2 2、耗能大,耗能水多;、耗能大,耗能水多; 3 3、需注意管道清洁、需注意管道清洁 纯度:纯度: 25时时1101105 5cmcm如何如何安装:安装:5n离子交换法:离子交换法:氢型强酸性氢型强酸性阳离子交换树脂阳离子交换树脂(R(RSO3HSO3H,R R为为母体母体) ),其中的,其中的H+H+与与CaCa2+2+、N

4、aNa+ +等金属离子等金属离子发生交换反应,而将钙、镁离子除去发生交换反应,而将钙、镁离子除去 氢氧型强碱性氢氧型强碱性阴离子交换树脂阴离子交换树脂(R(RNOHNOH,RR为母体为母体) ),其中的,其中的OH-OH-与水中的与水中的CLCL- -、碳酸根等阴离子发生交换反应,而将它们碳酸根等阴离子发生交换反应,而将它们除去:除去:6优点优点: : 除了可去除除了可去除杂质离子杂质离子以外兼具吸附以外兼具吸附电中性杂质电中性杂质和过滤和过滤颗颗粒杂质粒杂质的作用。的作用。缺点缺点: : 纯度:纯度: 25时时5105106 6cmcm2 2、由于离于交换为、由于离于交换为可逆反应,可逆反应

5、,故去离子水并非绝对不含离子故去离子水并非绝对不含离子 1 1、设备较复杂,成本较高;、设备较复杂,成本较高;7n电渗透法电渗透法 在电场作用下水中在电场作用下水中各种阳离子趋向阴极各种阳离子趋向阴极,各种阴离子趋向阳极各种阴离子趋向阳极但但阳离子只能透过阳膜阳离子只能透过阳膜而被相邻的阴膜所阻,而被相邻的阴膜所阻,阴离子与此相反阴离子与此相反这样,在这样,在一些隔间内集中了阳离子和阴离子,即形成一些隔间内集中了阳离子和阴离子,即形成含盐多的浓水含盐多的浓水,在另一些隔,在另一些隔间内由于阴、阳离子的迁出降低了含盐量形成间内由于阴、阳离子的迁出降低了含盐量形成淡水淡水 81 1、不需要消耗化学

6、药品,设备简单,操作方便。、不需要消耗化学药品,设备简单,操作方便。消耗电能,当原水中盐浓度过低时,溶液电阻大,用电渗消耗电能,当原水中盐浓度过低时,溶液电阻大,用电渗析也不经济析也不经济 纯度纯度:25:25时时10104 4105cmcm2 2、对于含盐量高的海水等用此法比用离子交换法更为经济、对于含盐量高的海水等用此法比用离子交换法更为经济优点优点:缺点缺点:9n炭吸附法炭吸附法:活性炭是一种非常优活性炭是一种非常优良的吸附剂,它是利用良的吸附剂,它是利用木木炭、各种果壳和优质煤炭、各种果壳和优质煤等等作为原料,通过物理和化作为原料,通过物理和化学方法对原料进行破碎、学方法对原料进行破碎

7、、过筛、催化剂活化、漂洗、过筛、催化剂活化、漂洗、烘干和筛选等一系列工序烘干和筛选等一系列工序加工制造而成。加工制造而成。101 1、设备简单,操作方便。、设备简单,操作方便。纯水制备效率低纯水制备效率低.,.,仅作为各种制备纯水配套的一种措施仅作为各种制备纯水配套的一种措施. . 2 2、它具有、它具有物理吸附和化学吸附物理吸附和化学吸附的双重特性的双重特性, ,可以有选择的可以有选择的吸附气相、液相中的各种有机物质吸附气相、液相中的各种有机物质. .优点优点:缺点缺点:11n超滤膜法超滤膜法特点特点: :仅能除去仅能除去胶体细菌等大分子物质和悬浮物胶体细菌等大分子物质和悬浮物, ,所得水还

8、需进一步纯化所得水还需进一步纯化. .也是作为各种制备纯水配套的一种措施也是作为各种制备纯水配套的一种措施. .12n混合纯化系统混合纯化系统医用超纯水设备医用超纯水设备 实验室纯水系统实验室纯水系统 橱下式全自动逆渗透纯水机橱下式全自动逆渗透纯水机特点特点: :多种方法混合纯化多种方法混合纯化, ,可获得纯度很高的二级甚至一级纯水可获得纯度很高的二级甚至一级纯水. .13二、水的纯度检查二、水的纯度检查 用电导仪或兆欧表测定其用电导仪或兆欧表测定其电导率电导率或或电阻率电阻率用特定试剂检测水中残留的用特定试剂检测水中残留的CaCa2+2+、MgMg2+2+、CICI- -、SOSO4 42-

9、2- 、硅酸盐硅酸盐等成分的含量等成分的含量微生物含量检测微生物含量检测单位:电导:西门子(电导:西门子(s)电导率:电导率:scm-1电阻:电阻:电阻率:电阻率:cm14CAP:美国病理学家学会美国病理学家学会n实验用纯水标准实验用纯水标准15NCCLS:美国临床实验室美国临床实验室标准化委员会标准化委员会16级水级水: :临床实验室用水临床实验室用水, ,一般实验检验一般实验检验; ;级水级水: :特殊实验如酶活性测定、电解质分析等特殊实验如酶活性测定、电解质分析等; ;级水级水: :用做仪器、器皿的自来水清洁后冲洗用做仪器、器皿的自来水清洁后冲洗. . n实验用纯水的用途实验用纯水的用途

10、17n实验用纯水的贮存、运输和使用实验用纯水的贮存、运输和使用: 一般选用一般选用聚乙烯或聚丙烯聚乙烯或聚丙烯桶(瓶)贮存,贮存时间不桶(瓶)贮存,贮存时间不宜太长,使用时应避免一切可能的污染,切勿用手接触纯宜太长,使用时应避免一切可能的污染,切勿用手接触纯水或容器内壁水或容器内壁. . 盛装药品盛装药品, ,试剂试剂18第二节第二节实验用玻璃仪器实验用玻璃仪器(了解了解) 19第三节第三节实验方法的选择实验方法的选择 选择选择准确可靠准确可靠的实验方法的实验方法为为临床临床提供提供准确可靠准确可靠的信息的信息临床生化检验分析临床生化检验分析u实验方法选择的目的实验方法选择的目的u实验方法的分

11、级实验方法的分级u标准试剂的分级标准试剂的分级保保证证20一、实验方法选择的目的一、实验方法选择的目的根本目的:根本目的:各实验室按照方法选择的原则结合自身条件,确各实验室按照方法选择的原则结合自身条件,确定定合适合适的某项目的检测方法。的某项目的检测方法。保证拟使用的检测方法在正式应用于临床分析病保证拟使用的检测方法在正式应用于临床分析病人标本之前,对方法性能及可能引入的误差进行人标本之前,对方法性能及可能引入的误差进行了了解解,作出初步评估。,作出初步评估。21二、实验方法的分级二、实验方法的分级分级依据分级依据:IFCCIFCC根据分析方法的根据分析方法的准确性与精密度准确性与精密度的不

12、同。的不同。v决定性方法决定性方法 v参考方法参考方法 v常规方法常规方法 分为三级:分为三级:22(一)决定性方法(一)决定性方法definitive methoddefinitive methodp定义定义: 是指是指准确度最高,系统误差最小准确度最高,系统误差最小,经过详细的研究,经过详细的研究,没有没有发现产生误差的原因或在某些方面不够明确的方法发现产生误差的原因或在某些方面不够明确的方法,其测定结,其测定结果与真值最为接近。果与真值最为接近。p主要方法:主要方法:重量分析法重量分析法、中子活化法、同位素稀释、中子活化法、同位素稀释- -质谱分析法(质谱分析法(ID-MSID-MS)2

13、3p应用:应用: 由于由于技术要求太高,费用昂贵技术要求太高,费用昂贵,这类方法不直接用于鉴定,这类方法不直接用于鉴定常规方法的准确性,只用于常规方法的准确性,只用于评价参考方法与一级标准品评价参考方法与一级标准品。储氢重量分析仪储氢重量分析仪 ( (北京英格海德分析技术有限公司北京英格海德分析技术有限公司) )24(二)参考方法(二)参考方法reference methodp定义:定义: 是指是指准确度与精密度已经被充分证实准确度与精密度已经被充分证实,且经公认的权,且经公认的权威机构(国家主管部门、相关学术团体和国际性组织等)颁威机构(国家主管部门、相关学术团体和国际性组织等)颁布的方法。

14、这类方法布的方法。这类方法干扰因素少干扰因素少,系统误差很小,有适当的系统误差很小,有适当的灵敏度、特异度、较宽的分析范围并且线性良好灵敏度、特异度、较宽的分析范围并且线性良好,重复测定,重复测定中的中的随机误差可以忽略不计随机误差可以忽略不计。p主要方法:主要方法: 原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法、火焰光度法、免疫化学法,离子交换层析法等、火焰光度法、免疫化学法,离子交换层析法等25p应用:应用:能在能在条件优越条件优越的实验室作的实验室作常规分析常规分析,主要用于鉴定主要用于鉴定常规方法,评价其误差大小、干扰因素并决定是否可以常规方法,评价其误差大小、干扰因素并决定是否可以被接受;用

15、于鉴定二级标准品和为质控血清定值;用于被接受;用于鉴定二级标准品和为质控血清定值;用于商品试剂盒的质量评价。商品试剂盒的质量评价。26(三)常规方法(三)常规方法(routine method )p定义:定义: 应具有应具有足够足够的精密度、准确度和特异度,有的精密度、准确度和特异度,有适当适当的分析范围,的分析范围,经济实用经济实用,其性能指标符合临床或其它目的的需要。其性能指标符合临床或其它目的的需要。p主要方法:主要方法: 溴甲酚绿法、双缩脲法、溴甲酚绿法、双缩脲法、J-GJ-G法等。法等。p应用:应用: 临床临床常规检验常规检验使用,使用,常规方法在常规方法在作出评定以后,经有关学术组

16、织认可,作出评定以后,经有关学术组织认可,可以作为可以作为推荐方法(推荐方法(recommended recommended methodmethod ) 。偏差已知方法偏差已知方法偏离未知方法偏离未知方法27项目项目决定性方法决定性方法参考方法参考方法钙钙ID-MS原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法氯氯电量滴定法、中子活化法电量滴定法、中子活化法电流滴定法电流滴定法镁镁ID-MS原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法磷磷ID-MS钾钾ID-MS、中子活化法中子活化法火焰光度法火焰光度法钠钠重量分析法、中子活化法重量分析法、中子活化法火焰光度法火焰光度法白蛋白白蛋白免疫化学法免疫化学法总蛋白总蛋白双缩脲法双缩脲法肌酐肌酐ID-MS、离子交换层析法离子交换层析法离子交换层析法离子交换层析法尿素尿素ID-MS尿素酶法尿素酶法尿酸尿酸ID-MS尿酸酶法(紫外法尿酸酶法(紫外法)胆红素胆红素重氮反应法重氮反应法葡萄糖葡萄糖ID-MS己糖激酶法己糖激酶法胆固醇胆固醇ID-MSAbell-Kendall法,胆固醇氧化酶法法,胆固醇氧化酶法甘油三酯甘油三酯ID-MS酶法酶法AST(GOT ) MDH

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