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1、狗肝菜多糖对D-半乳糖胺所致大鼠急性肝损伤的保护作用 张小玲，肖胜军，高雅，容明智，张可锋，沈洁，陈力锋，朱华【摘要】目的观察狗肝菜多糖对D-半乳糖胺所致大鼠急性肝损伤的影响。方法建立D-半乳糖胺D-GalN诱发的大鼠急性肝损伤模型，不同浓度狗肝菜多糖干预后，测定动物血清ALT、AST。肝组织常规制片及HE染色观察组织病理学改变。结果狗肝菜多糖能使肝损伤动物血清ALT、AST程度显著降低。组织病理学检测发现狗肝菜多糖处理后肝组织损害程度降低。结论狗肝菜多糖对D-半乳糖胺所致大鼠急性肝损伤具有保护作用。【关键词】狗肝菜多糖急性肝损伤保肝Keyrds：Dilipterahinensisplysah
2、aride；Auteliverinjury；Liverprtetin狗肝菜Dilipterahinensis(L.)Nees.是爵床科(Aanthaeae)华九头狮子草属(Diliptera)，全草味甘、微苦、性寒，归心、肝、肺经，具有清热、凉血、利湿、解毒、生津、利尿等成效，临床常用于治疗感冒发热、热病发斑、暑热烦渴、吐衄血、便血、尿血、崩漏、肺热咳嗽、咽喉肿痛、肝热目赤、眼结膜炎、小儿惊风、小便淋沥、带下、带状疱疹、痈肿疔疖、蛇犬咬伤等证1，2。?中国药典?(2022版)部曾收录，拟定其来源为爵床科植物狗肝菜的枯燥全草1。狗肝菜为广西民间药食两用的中草药，也是壮族地区常用壮药，主要含有多糖
3、、有机酸、氨基酸等物质2。多糖类中药作为具有抗氧化及免疫调节作用，有抗肝炎及肝损伤作用3。本文利用D-半乳糖胺所致大鼠急性肝损伤模型来评价狗肝菜多糖抗肝损伤的作用。1材料1.1动物SD大鼠，体质量(20020)g，雌雄各半，由桂林医学院实验动物中心提供，合格证号：SXK桂2022-0001。1.2药物与试剂狗肝菜多糖提取方法见参考文献4，AST谷草转氨酶试剂盒批号：20220818、ALT丙氨酸氨基转移酶试剂盒批号：20220808均购自南京建成生物工程研究所。D-半乳糖胺D-GalN:江苏启冬化学，批号：20221108。联苯双酯滴丸：广州星群药业股份，批号：EF40049。1.3仪器及设备
4、电子天平TP-4101，Denver，超声波清洗仪B2200S-T，必能信超声产品，旋转蒸发仪BHIB-490，移液器Eppendrf、真空泵SHB-，郑州长城科工贸，电热恒温水浴锅DK-S26，上海精细实验设备)，旋涡混合器H-861，上海环球物化仪器厂)，离心机(TDL-4，上海安亭科学仪器厂)，分光光度计(722型，上海第三分析仪器厂)。转贴于论文联盟.ll.2方法2.1D-半乳糖胺致大鼠急性肝损伤模型的建立及药物处理取安康大鼠36只，雌雄各半，180220g，适应性饲养2d，每组6只，随机分为空白组，模型组，联苯双酯组阳性药物对照组，狗肝菜多糖高、中、低剂量组。联苯双酯组剂量为50gk
5、g-1；狗肝菜多糖高、中、低剂量组狗肝菜多糖剂量分别为300，200，100gkg-1。除空白对照组和模型组给予等体积生理盐水外，各组均灌胃给药，1次/d，连续7d。第6天给药1h后，除空白对照组腹腔注射等体积生理盐水外，其余各组分别腹腔注射D-半乳糖胺400gkg-1，禁食不禁水，末次给药1h后，摘除眼球取血，放置1h，3000r/in离心，取上清液，20冰箱中保存，检测生化指标ALT、AST；快速取出肝脏，取肝左叶一样部位组织于4%中性缓冲福尔马林溶液中固定16h，常规石蜡包埋及切片，HE染色。2.2统计学方法各项指标均s，统计软件SPSS11.5对组间比较进展独立样本t检验。3结果3.1
6、血清学指标结果见表1。其中模型组血清ALT和AST两种转氨酶活性均明显高于空白组说明模型建立成功。狗肝菜多糖高、中、低剂量组血清ALT、AST程度均较模型组明显降低，其中高、中剂量组有统计学意义(P0.01)。表1D-半乳糖胺肝损伤模型的血清学改变略3.2组织病理学改变D-半乳糖胺模型组肝损伤严重，肝小叶中央大部分区域肝细胞水肿，出现肝细胞的碎片状坏死，小叶周边肝细胞中至重度脂肪变性；阳性对照组和高剂量组病理改变一样，中央静脉周围肝细胞轻度水肿，出现少量点状坏死；多糖中剂量组肝小叶中央肝细胞水肿及周边少量肝细胞轻度脂肪变性，出现散在点状坏死；多糖低剂量组中央静脉严重水肿，有散在点状坏死及碎片状
7、坏死，小叶周边肝细胞轻至中度脂肪变性。见图1。4讨论D-半乳糖胺是肝细胞磷酸尿嘧啶核苷的干扰剂，当D-GalN进入体内后与磷酸尿苷UDP结合形成UDP-半乳糖胺致使UDP耗竭，从而使依赖其生物合成的核酸、糖蛋白、脂肪、糖等物质合成受到抑制，限制了细胞器及酶的生成和补充，导致肝细胞受损。因此，D-GalN肝损伤模型可用于抗病毒性肝炎药物的研究5。肝细胞损伤时，ALT、AST从胞浆内释放并进入血液，血清中ALT、AST升高。血清学检测发现狗肝菜多糖可使D-GalN所致大鼠肝损伤模型ALT、AST程度下降；大鼠肝脏病变明显减轻,用高、中、低剂量的狗肝菜多糖处理后，大鼠肝组织细胞水肿及脂肪变性均较模型组明显减少，其中以狗肝菜多糖高剂量组的作用最明显,效果与联苯双酯治疗组相当,说明狗肝菜多糖对D-GalN所致肝损害有一定的保护作用,且其作用效应与应用剂量有关。但有关狗肝菜多糖保护肝细胞确实切机制仍有待进一步研究。
