M5 HiPer农杆菌EHA105感受态细胞使用说明书产品名称单位货号M5 HiPer 农杆菌 EHA105 感受态细胞 100plx10 支 MF860-10M5 HiPer农杆菌EHA105感受态细胞 100心20支 MF860-20【储存条件】-709恒温保存，防止反复冻融，有效期六个月；干冰运输产品简介】农杆菌EHA105(pSoup)菌株由EHA105菌株改造而来，为C58型背景，核基因中含有利福平抗性筛选基因rif此菌株携带一无自身 转运功能的琥珀碱型Ti质粒PEHA105 (pTiBo542DT-DNA),此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件， pEHA105(pTiBo542DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)一些缺失农杆菌复 制相关元件(如pVS1的复制起点REP区或pVS1质粒的STA区)的表达质粒如pGreenx pGreenll-62SK和pGs2等不能在EHA105 菌株中繁殖pSoup辅助质粒可以帮助这些不完整双元表达质粒在农杆菌中的复制EHA105(pSoup)菌株具有四环素(Tet)抗性。
EHA105(pSoup)适用于水稻、烟草等植物的转基因操作经植物表达质粒pGs2检测，转化效率可达103 cfu/pg,-70(保存12个月 转化效率不发生改变基因型】C58 (rifR) Ti p EH A105 (pTiBo542DT-DNA) (strepR) Succinamopine pSoup (tetR)【使用方法】按照无菌操作规程进行以下操作步骤：1 .取-70℃保存的EHA105 (pSoup)农杆菌感受态细胞于冰水浴中融化；.无菌条件下，向感受态细胞中加入100ng-1|jg质粒DNA (第一次使用，最好做一下预实验，确定所加质粒的最正确量)，轻轻混匀， 冰水浴中静置5分钟；2 .将离心管置于液氮中速冻5分钟；(注：可用干冰和无水乙醇混合物代替液氮).然后快速将离心管置于37℃水浴中保持5分钟，不要晃动水面；3 .将离心管放回冰水浴中，冰浴5分钟；.无菌条件下加入8003无抗生素的2xYT、SOB、SOC或LB液体培养基，于28℃振荡培养2-3小时，菌体复苏；4 . 6000rpm离心1分钟收菌，留1003左右上清，轻轻吹打重悬菌体，取适量菌液，涂布于相应抗生素的LB平板上，于28℃培养箱 中倒置培养48-72小时。
实验说明当平板只含有50pg/ml的Kan时，28℃培养48 h即可看到菌落；平板中含有50 pg/ml Kan和 20pg/ml Rif时，需28℃培养60 h可看到菌落；如果平板中含有50 pg/ml Kan和50 pg/ml Rif时那么需要28℃培养72-90 h可看到菌 落)备注】本产品仅供科研使用在确认产品质量出现问题时，本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。
