重医细菌学检验复习题

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1、本文格式为Word版，下载可任意编辑重医细菌学检验复习题 1、测验室生物安好(Laboratory biosafety): 测验室的生物安好条件和状态不低于容许水平，可制止测验室人员、来访人员、社区及环境受到不成采纳的损害，符合相差法规、标准等对测验室生物安好责任的要求。 2、生物安好防护根本要求 测验室生物安好防护（biosafety protection for laboratories） 测验对象：致病的微生物及其毒素 综合措施：测验室设计建立、个体防护设施、工作及操作程序和规程等 确保：测验室工作人员不受测验对象侵染，周边环境的生物安好。 测验室生物安好通用原那么 积极防止操在污染的环

2、境中接触生物危害物； 主动封闭生物危害材料产生之源，防止从操作部位向周边环境释放； 尽量裁减生物危害材料向周边环境意外释放所造成的后果。 3、测验室务必设有专职的生物安好负责人 测验室负责人为测验室生物安好的第一责任人。 生物安好等级 生物安好防护测验室根据所处理的微生物及其毒素的危害程度分为四级。 测验室生物安好防护要求：一级最低，四级最高。 4、在主测验室合理设置清洁区、半污染区和污染区 5、各级生物防护测验室特点 一级生物安好防护测验室 （BSL-1/P1）：适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物，如用于教学的普遍微生物测验室等。 二级生物安好防护测验室（ BSL-2/P2 ） 测验室

3、布局和设施、安好操作规程、安好设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。 在处理危害度2 级或更高危害度级别的微生物时，在测验室门上应标有国际通用的生物危害警告标志。 三级生物安好防护测验室（BSL-3/P3）：适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有预防传染的疫苗。 四级生物安好防护测验室（ BSL-4/P4 ）：适用于对人体具有高度的危害性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。 6、操纵措施 安好设备和个体防护是测验室工作人员与致病微生物及其毒素直接接触的一级屏障。 全体可能使致病微生物及其毒素溅

4、出或产生气溶胶的操作，都务必在生物安好柜内举行。 7、生物安好柜（BSC）biosafety cabinet(概念、分级及特点) 具备气流操纵及高效空气过滤装置的操作柜，可有效降低测验过程中产生的有害气溶胶对操和环境的危害。(净化排气) 根据生物安好防护水平的差异，生物安好柜可分为I、级3种类型。 测验室应按要求分别配备I、级生物安好柜。 级生物安好柜：外部空气 保证工作人员不受侵害，但不保表明验对象不受污染。 级生物安好柜：经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气 既保证工作人员不受侵害，也保表明验对象不受污染； 级生物安好柜：经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气 8、生物安好柜和超净工作台的识

5、别 超净工作台：养护样品，不养护操和环境 生物安好柜：养护操、环境以及测验材料 正压、简朴 负压、繁杂 不能以净化工作台代替生物安好柜，反之那么可以。 9.标准的细菌等微生物操作要求 测验室负责人.工作人员洗手、工作区域不允许吃/喝/抽 .戴护目镜或面罩、食物储存 遏止口吸吸管、裁减飞溅物/气溶胶、工作台外观的去污/灭活、废物去污后处理 10、注：高压蒸汽灭菌：负责消毒者不准离开消毒室。 制备培养基. 无菌操作.、使用酒精灯、灭菌吸管.10倍递增稀释.无菌操作； 三三制：稀释三级，每一稀释度用三个平行平板；取供试液加注于平皿时，供试液须充分混匀。 培养基倾注于平皿：451、整个操作过程应在lh

6、内完成、无菌检验. 其次章、细菌学检验根本技术 临床样本的采集与送检 样本 血骨髓 发病早期、急 成人10ml，儿童3 性期或 5ml；骨髓12ml。 病症典型时 晨起 中段尿 脓血、黏液的粪便；絮状物； 直肠拭子 自然咳痰、支气管镜、 胃内采痰法等； 鼻咽拭子 样本切勿冰箱存放；无菌操作； 废弃物高压灭菌。 采样时间 采样方法 留神事项 尿液 粪便 痰 上呼吸道样本 防杂菌污染，无菌操作。尽快送检，不得加防腐剂或消毒剂。 急性期 无菌采样；崭新；立刻送检 。 晨间 无限制 漱口； 立刻送检或4保存。 1、食品样本采集原那么 根据检验目的、食品特点、批量、检验方法、微生物的危害程度等确定采样方

7、案。 随机采样代表性 无菌操作，防污染。（外源性污染、样本变质和细菌生长） 食物中毒时，采集可疑食物样本。 2、食品样本采集种类 大样、中样、小样。 大样：一整批样本。 中样：从样本各片面所取得的混合样本，一般为200g。 小样：分析用，检样，25g。 注：检验结果报告后，剩余样品或同批样品不举行微生物工程的复检 3、细菌的形态布局检查法 借助显微镜，对细菌形态、大小、排列、布局举行直接查看。 在细菌检验中极其重要，是细菌分类和鉴定不成缺少的组成片面。 样本中有无细菌及其大致的数量。 细菌的形态、大小、排列、布局和染色回响性。 培养物是否为纯种。 普遍光学显微镜 （0.2m 10000.2mm

8、）细菌染色样本；弱光下用于不染色样本活菌的运动处境 暗视野显微镜 （0.04m：50倍 ）不染色样本活菌的形态 相差显微镜 ：活体细胞的形状和运动方式；细胞内部某些轻微布局及这些布局的数量 4、不染色检查：主要用于查看细菌的动力 有鞭毛的细菌为真正运动 无鞭毛的细菌那么为布朗运动(即分子运动) 染色检查 细菌染色显微镜查看。 常用的细菌染料：人工合成带苯环的染料，色基+助色基 单纯染料：苏丹染料 酸性染料：伊红、酸性品红、刚果红等 碱性染料：美蓝、孔雀绿、甲紫和碱性复红等 复合染料：姬姆萨染料、瑞氏染料等 5、单染色法：用一种染料染色，使各种细菌均染成同一颜色。操作简朴，易于使用。只能显示细菌

9、的形态及大小。如用美蓝或稀释石炭酸复红等 6、复染色法：用两种以上染料染色细菌，显示细菌形态大小，鉴别细菌种类 鉴别染色法:革兰染色法 、抗酸染色法 Grams染色操作步骤 ：初染、媒染、脱色、复染 抗酸染色法：抗酸菌：分枝杆菌/分枝菌酸 。一般不易着色，一旦染上色后又不易被盐酸酒精脱色。 经过加热和延长染色时间来促使抗酸菌着色。 步骤：初染、脱色、复染 7、负染色法：背景着色而细菌本身不着色。 细菌荚膜常用墨汁负染色法合作单染色法(如美蓝)，背景呈黑色，菌体染成蓝色，荚膜不着色，包绕在菌体周边成为一层通明的空圈。 该法具有快速、经济、简便易行、高度反差、辨识率高的特点。 8、培养基的种类按物

10、理性状分 液体培养基：增菌、作生化试验等 半固体培养基：查看细菌的动力、分类鉴定、保存菌种及噬菌体效价滴定等。琼脂用量为0.5%1% 固体培养基：主要用于分开培养；平板、斜面、高层及高层斜面；琼脂用量为1.5%2% 9、培养基的种类按用途分 根基培养基(basic medium)养分培养基(nutrient medium) 增菌培养基(enrichment medium) 选择性培养基(selective medium) 鉴别培养基(differential medium)专用培养基(dedicated medium) 10、增菌培养基：多为液体。 目的菌，杂菌。养分成分抑制物质 选择性增菌培

11、养基；非选择性增菌培养基 7.5%NaCl肉汤：金葡増菌 11、鉴别培养基：几种细菌由于对培养基中某一成分的分解才能不同，其菌落的生长特征(颜色、外形等)不同而被区分开。某些特定的化学物质 鉴别和区分不同细菌 12、制备培养基的一般程序 1调配溶化； 2矫正pH；3过滤澄清；4分装；5灭菌；6检定 13、平板划线接种法 平板划线接种法是常用的细菌分开培养方法。 使样本或培养物中混杂的多种细菌分开成长为单个菌落，并根据菌落的形态和特征，挑拣所需的单个菌落，经移种获得纯种细菌。 不同的细菌在平板上所形成的菌落有其固有的形态特征，可以作为细菌鉴定的依据之一。 14、平板划线方法 分区划线接种法；曲线

12、/连续划线接种法；棋盘格划线接种法；放射法；四格法；平板涂布接种法 15、分区划线接种法 ：多用于含菌数量较多样本的细菌分开 16、半固体培养基：可用于查看细菌动力和保存菌种。 17、菌落：细菌经确定时间培养后，在固体培养基外观所形成的，肉眼可见的物体(群落) 。 18、菌落特征 菌落外形；大小：mm；外观性状；边缘处境；颜色；通明度；质地；粘度；乳化性.等 19、细菌在鉴定培养基上的特征 溶血特征；卵黄；蛋白；色素；气味 在血平板上的溶血特征 溶血：狭窄的草绿色的半通明区域 溶血：完全通明领会的宽带 溶血：看不到溶血带的溶血 卵黄琼脂中的回响：检查细菌是否产生卵磷脂酶和脂酶 卵磷脂酶：降解卵

13、黄，菌落周边展现沉淀环 脂酶：展现“珍宝包膜” 蛋白水解作用：在菌落周边展现明显的环。 色素 水溶性色素溶在培养基中，使培养基着色。 绿脓色素、荧光色素等； 脂溶性色素那么使细菌菌落着色。 金黄色葡萄球菌的金黄色菌落。 气味 假单胞菌属细菌葡萄汁气味；变形杆菌巧克力烧焦的臭味；链球菌地窖里的霉臭； 梭菌粪臭、腐败味；产黑色素类杆菌属细菌辛辣味 20、细菌的生化回响试验 不同的细菌不同的酶系统不同的新陈代谢产物产物不同的生化特性鉴别细菌的类别 21、糖发酵试验结果判断 回响现象 酸性变色、有气泡 酸性变色、无气泡 培养基不变色 结果描述 分解糖产酸、产气 分解糖产酸、不产气 不分解糖 22、甲基

14、红(MR)试验 ：检查细菌发酵葡萄糖产生并保持稳定的酸性终末产物和抑制体系缓冲作用的才能。 分解葡萄糖丙酮酸乳酸、乙酸、甲酸等培养基的pH4.5甲基红指示剂红色：阳性； 分解葡萄糖产酸少培养基pH较高甲基红指示剂黄色：阴性。 23、-半乳糖苷酶试验 ：预料细菌发酵乳糖的才能。 -半乳糖苷酶：一种能把乳糖水解成葡萄糖和半乳糖的酶。 发酵乳糖的大肠菌类能产生-半乳糖苷酶-渗透酶(P)和-半乳糖苷酶(G) 24、靛基质(吲哚)试验 分解：蛋白胨中的色氨酸吲哚 吲哚二甲氨基苯甲醛玫瑰吲哚(红色) 25、硫化氢试验 分解：含硫氨基酸H2S H2S铅或铁离子黑色硫化物。 26、触酶试验 过氧化氢酶又称触酶，可使细菌代谢过程中的过氧化氢分解