本文格式为Word版，下载可任意编辑定量检验方法学的分析性能验证浅析 王青 女，1972年出世，遗传学硕士，医学测验中心常规检测测验室负责人、技术主管，多年来从事临检、生化、细胞遗传等专业检验工作，纯熟掌管各项检验专业技术及ISO15189质量管理体系，具有较为扎实的医学检验及遗传学专业学识 依据卫生部《医疗机构临床测验室管理手段》第三十条款和CNAS-CL02：2022《医学测验室质量和才能认可准那么》（IOS15189:2022）第5.5条款的相关要求，测验室应对方法学举行评价，以检查其分析性能和对预期用途的适用性近年来，医学测验中心在测验室认可的工作中，举行了大量的性能验证试验，累积了较丰富的实践阅历，本文从“5W+1H”六个方面，对定量检验方法学的性能验证举行汇总，供大家探讨和交流 一、为什么要做性能验证？ 性能验证是为了确保测验室开展的检验工程，所应用的检测系统的分析性能或检验工程的方法学能够得志检测及临床要求，从而保证患者标本检测结果切实稳当 二、举行性能验证的场所？ 按照测验室管理手段和认可准那么的要求，医疗机构临床测验室应承受所开展检验工程的性能验证工作。
三、何时需要做性能验证？ 1、以下处境应完成初次性能验证：新安装的仪器拟开展的工程；新开展工程；同一工程的试剂变更厂家或检验方法发生变更时；仪器校准、发生故障修理后或更换主要的配件后，可能对结果产生较大的影响时，可选择其所开展的片面检验工程举行分析性能证 2、何时需要做性能评估/评价? 初次验证后，对细致度、正确度及可报告范围等性能参数至少每12个月举行一次评估，可通过评估如CV、均值等室内质控数据的变化趋势（批间细致度）、室间质评工程的结果的可采纳性（正确度）、临床医护人员对结果的反应（可报告范围）、小样本的验证等多种方式举行若评估的结果不成采纳，那么需重新举行性能验证 四、哪些人员可以举行性能验证试验? 性能验证试验应由测验室有资质的检验人员完成，必要时可由技术支持人员辅助完成试验；而性能验证报告务必由资深的检验人员完成，并经科室主任审核后归档保存 五、性能验证包括哪些方面？ 定量工程性能验证的内容包括但不限于：细致度（批内、批间）；正确度；检测低限（灵敏度）；携带污染率；线性范围；可报告范围；生物参考区间；检验结果量值溯源；测量不确定度；等。
六、如何实施性能验证？ 1、性能验证试验的打定工作 1.1 范围、材料、方案：应确定定量检测的工程；所需的仪器、配套试剂、校准品、质控品等材料；制定完整的性能验证方案（尤其是各项性能参数的判断标准的制定及其依据） 1.2 试验要求：仪器应举行校准或保养；要尽可能在一致条件下举行各项试验；全体试验均需在室内质控结果在控的处境下方可举行 2、性能验证试验 主要议论细致度、正确度、携带污染率、线性范围、可报告范围的试验方法 2.1 细致度 主要包括批内细致度和批间细致度两项 2.1.1 批内细致度 标本选择：选择低、中、高三个浓度或中、高两个浓度的崭新标本/质控品； 试验方法：连续重复测定20/21次； 结果计算：计算后20次检测结果的SD和CV； 判断标准：以才能验证/室间质评评价界限作为允许总误差（TEa），批内细致度<1/4TEa；或者符合试剂说明书的要求 留神事项：若选择标本，那么其浓度应尽可能接近质控品或试剂说明书中评价该性能所供给的标本浓度。
2.1.2 批间细致度 标本选择：选择低、中、高三个浓度或中、高两个浓度的崭新标本/质控品； 试验方法：每天1次测试，连续测试20天；或每天2次测试，连续测试10天；或每天4次测试，连续测定5天; 结果计算：剔除离群值后，计算20次检测结果的SD和CV； 判断标准：<1/3TEa；或者符合试剂说明书的要求 留神事项：若选择标本，首先应考虑检测物的稳定性，浓度要求同批内细致度；若检测物不稳定，那么务必使用质控品举行该试验 2.2 正确度 可采用以下七种方法举行正确度评价： ①分析已知值的参考物质：因测验室不易得到参考物质，较少使用 ②分析厂商或第三方供给的已经赋值的质控品：因采用质控品举行正确度评价，尚存在争议，较少使用 ③加样回收试验：因大片面用于临床诊断的检验工程为微量或痕量物质，试验难度较大；不宜采用 ④方法学比对试验；适用于引进新方法时，可以与原有的方法举行对比，最少分析20个崭新标本，要求浓度笼罩线性范围，用两种方法同时测定同样的样品（偏倚<1/2Tea），举行相关回归分析。
⑤分割样本室间比对：要求与使用一致检测方法的、质量保证措施较好的、或已获认可或的测验室，或与使用配套分析系统的测验室举行比对，结果合意 ⑥分析室间质评物：最为常用检测卫生部临检中心质评物，检测结果均在允许范围内 ⑦分析厂商供给的参考物质：当以上六种方法均难以实施时，此方法最为实用选择使用A、B两个不同批号校准品，使用A批号校准品举行校准，对B批号的校准品举行检测，连续测定6次，摈弃第1次的分析结果，计算其余5次检测结果的平均值，要求每次检测结果和均值都在校准品定值可采纳范围内；并计算检测均值与厂家赋值的偏倚，以B（厂家供给的校准品B类不确定度）作为评价标准 2.3 携带污染率（加样针） 标本选择：取高浓度室内质控品或高浓度崭新标本，混合平匀后放置于1、2、3杯位置，再取去离子水或生理盐水放置于4、5、6杯位置； 试验方法：对以上6份标本连续举行检测，测定值分别为H1、H2、H3、L1、L2、L3； 结果计算：携带污染率 =（L1－L3）×100% /（H3－L3）； 判断标准：生化检验工程 <2%。
2.4 线性评价 标本选择：选取接近线性范围上限的高值标本与接近下限的低值标本；无法获取适合的标本可使用添加物或校准品；上述条件均无法得志时，可选用得志临床需求的高值标本 试验方法：标本分别按5：0（100%）、4：1（80%）、3：2（60%）、2：3（40%）、1：4（20%）、0：5（0%）的比例举行稀释，每个稀释度重复测定3次计算均值 结果计算：将实测值与理论值作对比（偏离应小于10%），计算Y= bX + a，验证线性范围 判断标准：b在0.97～1.03范围内，a接近于0 2.5 可报告范围 适用于测验室开展的线性范围不能得志临床标本检测结果需求的定量检验工程 标本选择：取一份接近线性范围高限值浓度的病人标本，用去离子水、生理盐水、低值血清或厂商推举的稀释液举行系列稀释，稀释比例参照厂商供给的机内稀释倍数 试验方法：每个浓度重复测定2次计算均值 结果计算：每个浓度实际测定的均值和稀释后的理论估计值，两者举行差值相对百分数计算，假设结果≤20%，此稀释度为技术上的可采纳限。
可报告范围的高限=可采纳最大稀释倍数×线性范围（AMR）上限值； 可报告范围的低限：线性范围的检测低限或功能灵敏度为可报告范围的低限 综上所述，方法学的分析性能验证包涵大量的内容、技术要求较高，在实际工作中，应根据概括处境举行分析，在质量体系允许的范围内，选择适合的试验方法完成此项工作，留存原始数据，结合制定的判断标准，综合分析试验结果，以评价所选的方法学能否得志临床测验的要求，从而保障检验结果的切实性 — 6 —。