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1、曹双：请综合看看各种方法，比拟一下，有些内容是一致的，有些是每种方法不同于其他方法的，注意比拟。第一篇蓝色局部为说明和附录，去掉这局部剩下的为连续文件大肠杆菌检验方法SN016992出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法GB/T4789.61994食品卫生微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验这两个检验方法另有完全的PDF文件，见文件夹以SN标准方法为例，进展说明。样品制备：以无菌操作取25g样品，放入装有225mL稀释剂的灭菌均质杯内，于8000r/min均质12min,制成1:10样品匀液（也可用灭菌乳钵研磨的方法代替）。稀释样品匀液根据对样品污染情况的估计，用稀释剂将样品匀液制成一系
2、列十倍递增的样品稀释液，如10*-2、10*-3、10*-4。从制备样品匀液至稀释完毕，全过程不得超过15min。附：这是一种9管MPN法测定方法，什么是MPN法最近似法？MPN法简介发布日期：2010-05-13浏览次数：212TheMostProbableNumberMethodInthefollowingexample,asetof3tubesofanallpurposebrothmediumisinocuTheMostProbableNumberMethodInthefollowingexample,asetof3tubesofanallpurposebrothmediumisinoc
3、ulatedfromeachoftheten-folddilutions,witheachtubebeinginoculatedwithoneml.Afterincubation,thenumberoftubesshowinggrowthisrecorded.Asthesucceedingdilutionsweremade,theorganismsweredilutedtosuchanextentthatnonewereintheinoculaofsevenofthetubes(markednegative).Inordertoestimatethenumberoforganismsperml
4、ofthesamplewhichwouldcausethiskindofgrowthresponse,welocatethethreesetsoftubeswhichshowdilutionoftheorganismstoextinction-i.e.,thosetubeswhichwereinoculatedfromthe10-2,10-3and10-4dilutions.附录1g检样中最近似值(MPN)表(补充件)以0.1、0.01、0.001g各用3管。阳性管数II阳性管数I1MPN|1MPN0.10.010.001|0.10.010.001|1111110001v31200I9.100
5、1131201|14002161202|20003191203|2601013121011501116.1I21112001219.2|212127013112|21313402016.2|22012102119.3|2211280221121222|35023116122314203019.4|2301290311131231I360321161232|440331119112331|53101011|3.6|30101231011021031101111121131201211221231301311321337.2|301139111302|64151303|957.3|31014311
6、1311|75151312|120191313|160111320|93151321|150201322|210241323|290161330|240201331|460241332|1100291333|1100LST和EC初步筛选：对每个样品选择适宜的三个连续稀释度的样品稀释液。每个稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白（月示）（LST肉汤，每管接种1mL。将接种管置丁361C培养482h。观察试管的产气情况：检查倒管内是否有气泡产生，用直径为3mm的接种环将所有482h内产气的LST肉汤管培养物移种丁EC肉汤管中。将所有接种的EC肉汤管在30min内放入带盖44.50.5T水浴箱内，培养48
7、2h。附：LST肉汤、EC肉汤有些什么？LST肉汤和EC肉汤中有什么？发酵乳糖产气一EC肉汤月桂基硫酸盐胰蛋白(月示)(LST)肉汤胰蛋白(月示)或胰酪月东(Trypticase)20g氯化钠5.0g孚L糖5.0g磷酸氢二钾(K2HPO4)g磷酸二氢钾(KH2PO4)g月桂基硫酸钠0.1g蒸熠水1000.0mL将各成分溶解于蒸熠水中。分装到有倒立发酵管的试管中，每管10mL。121C高压灭菌20mmx150mm15min。最终pH6.8+0.2。胰蛋白(月示)或胰酪(月示)20.0g3号胆盐或混合胆盐1.5g2.75乳糖5.0g磷酸氢二钾(K2HPO4)4.0g.磷酸二氢钾(KH2PO4)1.
8、5g氯化钠5.0g蒸熠水1000.0mL将以上成分溶解于蒸熠水中，分装16mmx150mm试管(管内有倒立的小发酵管)每管8mL。121C高压灭菌15min,最终H6.9+0.1EMB平板：取其产气管的培养物划线接种丁伊红美蓝（EMB汗板,36土1C培养242ho检查平板上有无具黑色中心有光泽或无光泽的典型菌落。如有典型菌落，那么从每个平板上至少挑取2个典型菌落；如无典型菌落那么从每个平板上至少挑取2个可疑菌落。用接种针接触菌落中心部位，移种到营养琼脂斜面上，361C培养1824h。附：怎样进展平板划线别离？平板划线别离的方法发布日期：2010-09-01浏览次数：2021.斜线法2.曲线法3
9、.方格法4.放射法5.四格法1.斜线法2.曲线法3.方格法4.放射法5.四格法pwrit均岫m平板划线例如平板划线例如发布日期：2010-09-01浏览次数：612平板戈U线例如Thisisanexampleofagoodstre平板划线例如Thisisanexampleofagoodstreakforisolationusingthefourcornersmethod.ThesmallcolonieshereareofStaphylococcusepidermidisThisisnotagreatstreakplatebutitisserviceable,asthereareafewisol
10、atedcolonies.Thisplatewouldhavebeenbetteriftheloophadbeenflamedbetweeneachsector.EMB平板原理及照片ThisisanexampleofhowNOTtostreakforisolation.Scribblingisnotstreaking,andmostlikelywillnotresultinisolatedcoloniesThisplateisolatestwodifferentcolonies:Escherichiacoli(thecream-colored)colonies,andSerratiamarce
11、scens(theredcolonies).(粘质沙$菌ThisisaplatewithMicrococcusluteus滕黄微球菌，theyellowcolonies.Whilethisisagoodstreakforisolation,theplatehasbeencontaminated.Thelargefuzzycoloniesarefungalcolonies.Thelidmayhavebeenliftedtoofarawayfromtheplatewhilestreaking,oradraftmayhavecausedthesporestofallintotheplate.EMB平
12、板照片及原理发布日期：2010-05-13浏览次数:238Thisimageillustratesthegrowthofgram-negativebacteriathatcannotfermentlactoseoneosinmethyleneblue(Thisimageillustratesthegrowthofgram-negativebacteriathatcannotfermentlactoseoneosinmethyleneblue(EMB)agar.EMBagarcontainsbilesaltsanddyeswhichinhibitgrowthofgram-positivebact
13、eria.GrowthonEMBagarisausefuldiagnostictooltodistinguishbetweenlactosefermentersandnonfermenterswhichwillappearcolorless.Thisimagecanbeusedtodescribetheuseofmetabolisminidentificationofbacteria.SalmonellaandShigella,bothnonlactosefermentingpathogens,canbedistinguishedfromthemoremonintestinalflorawhi
14、chfermentlactose.non-rorrnam#rASMorgJotinKhnlnfemb-an.jpgLactoseNonfermenteronEMBPatJohnson,PalmBeachmunityCollege,LakeWorth,Fla.,USA生化试验：将斜面培养物移种到以下培养基中进展生化试验。1色氨酸肉汤：在361C培养242h后，加Kovacs氏试剂0.20.3mL,上层出现红色为靛基质阳性反响。附：靛基质试验原理及照片靛基质试验原理及照片发布日期：2010-05-13浏览次数:290靛基质Indole试验：某些细菌能分解蛋白月东中的色氨酸，生成口引噪。口引噪的存在可用显色反响表现出来。呼噪与对二甲基氨基靛基质Indole试验：某些细园能分解蛋白月东中的色氨酸，生成口引噪。引噪的存在可用显色反响表现出来。口引噪与对二甲基氨基苯醛结合，形成玫瑰呵噪，为红色化合物
