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放线菌的形态观察

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放线菌的形态观察_第1页
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本文格式为Word版,下载可任意编辑放线菌的形态观察 测验3 放线菌的形态查看 一、测验目的 1、掌管插片法、压印法的操作技术,学会如何查看放线菌个体的特征 2、了解放线菌的菌落特征 二、测验原理 放线菌属原核微生物,其菌落一般为圆形,大小介于细菌和霉菌之间,外形随菌种而异可分为两型:一型产生大量分枝的基内菌丝和气生菌丝,基内菌丝伸入培养基内,菌落紧贴培养基外观,并由于它们的菌丝体对比精细,交织成网,因而使菌落极其坚硬,用针能将整个菌落自培养基挑起而不破碎,菌落起初是光滑或如发状缠结,当在其上产生孢子后,外观呈粉状、颗粒状或絮状,其典型的代表属是链霉菌属(Streptomyces)另一种类型是不产生大量菌丝的菌种,其菌落粘着力不如前一型坚固,布局呈粉质,用针挑时易粉碎,典型代表为诺卡氏菌属(Nocardia),其接种方式和菌体查看同细菌 放线菌的菌丝和孢子会产生各种色素,所以使菌落呈各种颜色,而且平皿培养的外观和后面的颜色往往不同,色素产生和菌种的种类、培养基的成分有关放线菌的气生菌丝(孢子丝)及形成孢子的方式,孢子的形态及颜色是分类的重要依据之一 链霉菌由于呈菌丝生长,而且菌丝很细,若用接种针直接挑取,易将菌丝挑断,所以,查看放线菌形态时,多用插片法和压印法。

但有时也可以采取水浸片法直接查看放线菌的个体形态 三、测验器材 灰色链霉菌(Streptomyces griseus),天蓝色链霉菌(Streptomyces coelicolor) 高氏1号培养基、培养皿、载玻片、盖玻片、无菌滴管、显微镜、镊子、接种针、小刀 四、方法与步骤 1、插片法 (1) 倒平板 将高氏1号培养基熔化后,倒10~12ml左右于灭菌培养皿中,待凝固 (2) 插片 将灭菌盖玻片以45度角度插入培养皿内的培养基中,然后用接种针将菌种接种在盖玻片与琼脂相接的沿线,放置28℃培养6~15天 (3) 查看 培养后的菌丝体生长在培养基及盖玻片上,提防地用镊子将盖玻片取出,擦去较差一面的菌丝体,放在载玻片上(菌丝体笼罩在载玻片上),直接置于显微镜下查看,也可在玻片间滴一滴水,制成假的水封片 2、平板划线法 按照细菌平板划线方式将菌种划线接种于高氏1号培养基的平板上,倒置于28℃培养6~15天查看分开培养得到单一的放线菌落的大小、外观外形(险峻、皱褶或平滑)、气生菌丝的外形(粉状、绒状或茸毛状等)、有无同心环、菌落的颜色等特征 3、压印法 (1) 挑取菌落 从上述划线分开的平板中,用小刀切取培养基及其上面的单个菌落一块,放于清白的载片上。

(3) 盖片压印 用镊子取一盖玻片在火焰上稍微加热,然后把玻片盖在有菌落的培养基小块上,用镊子轻轻压几下,使小块培养基上的片面菌丝体印压在盖片上 (4) 查看 将上述经压印有菌丝体的盖玻片放于清白的载片上(盖玻片印有菌体的一面向载玻片),然后放于显微镜下用高倍镜查看 — 3 —。

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