本文格式为Word版，下载可任意编辑慢病毒包装 慢病毒（Lentivirus）是逆转录病毒的一种，它需要相对较长的孵育时间，所以称之为“慢”病毒，Lenti在拉丁文中就是慢的意思它包括人免疫缺陷病毒（HIV）、猫免疫缺陷病毒（FIV）、猿免疫缺陷病毒（SIV）、牛免疫缺陷病毒等其中研究最多的是HIV-1慢病毒 慢病毒载体（Lentivirus vector）是以慢病毒基因组为根基，由所需的目的基因取代片面基因构建而成目前使用的慢病毒载体多采用HIV-1基因组改造而来与一般的逆转录病毒载体相比，慢病毒载体对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染才能而具有更广的宿主范围慢病毒载体还可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上，从而实现耐久表达在感染才能方面可以有效感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞，又很少引发机体免疫回响，能达成良好的基因治疗效果，具有广阔的应用前景 随着人们对慢病毒载体的深入研究，为了提高慢病毒在临床上使用的安好性，慢病毒载体的优化也在不断的探讨中慢病毒载体的进展体验了三个阶段，第一代慢病毒载体系统是以三质粒系统为代表，在构建时把HIV-1基因组中举行包装、逆转录和整合所需的顺式作用原件与编码反式作用蛋白的序列分开，分别构建在三个质粒表达系统上，即包装质粒、包膜质粒和载体质粒。
包装质粒在巨细胞病毒（cytomegalovirus, CMV）启动子的作用下，操纵除env以外全体病毒布局基因的表达；包膜质粒编码水泡口炎病毒（vesicular stomatitis virus，VSV）G糖蛋白；载体质粒中含有目的基因用这三种质粒共转染包装细胞如人胚胎肾293T细胞，在细胞上清中即可收获只有一次感染才能、而无复制才能的慢病毒颗粒第一代慢病毒载体系统的特点是在构建三种包装质粒时，为了降低产生有复制才能的病毒的可能性，尽可能裁减三种质粒之间的同源序列，但包装质粒中依旧留存HIV的附属基因其次代慢病毒载体系统是在第一代的根基上举行提升，在包装质粒中删除了HIV的全体附属基因这些附属基因的去除并不影响病毒的滴度和感染才能，同时增加了载体的安好性第三代慢病毒载体系统又增加了两个安好特性：一是构建自身失活的慢病毒载体，即删除了U3区的3′LTR, 使载体失去HIV-1巩固子及启动子序列，即使存在全体的病毒蛋白也不能转录出RNA；二是去除了tat基因，用异源启动子序列代替，这样原始的HIV基因组中的9个慢病毒载体中只留存了3个（gag、pol和rev）因此第三代慢病毒载体系统更加安好。
目前慢病毒已被广泛地应用在RNA干扰研究中由于有些类型的细胞脂质体转染的效果差，转移到细胞内的shRNA半衰期短，体外合成的siRNA对基因表达的抑制作用通常是短暂的，因此其应用也受到了较大的限制采用事先体外构建能表达shRNA的载体，然后包装成能表达shRNA的慢病毒颗粒，就能直接感染一些难对付的细胞，不仅便当易行，且可以达成基因表达的耐久抑制效果 基于慢病毒的慢病毒载体的研究已经进展到确定水平，因此用慢病毒作为基因转移载体的临床研究已经开头，在测验室和临床研究中，慢病毒具有更加的优点，尤其是能感染非分裂期的细胞、免疫回响小现在基于HIV的慢病毒载体的临床研究已经开头应用于人体 吉凯基因向市场供给的慢病毒产品使用的是安好性能更高第三代慢病毒载体系统， 包装质粒供给必要的慢病毒基因，来形成病毒粒子的布局蛋白和包装功能； 包膜质粒供给包膜蛋白；载体质粒不仅表达目的基因，还供给包装信号和顺式作用原件吉凯基因向市场供给的慢病毒滴度可达成1E+8 TU/mL，不必浓缩和纯化，就能感染目的细胞慢病毒感染目的细胞后用嘌呤霉素(puromycin)举行筛选，或通过GFP发出的绿色荧光来筛选。
让您对人、小鼠、大鼠等基因功能研究更加便当、快捷 慢病毒使用操作手册 2022-10-28 00:00 来源：百度百科 点击次数： 1453 — 3 —。