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1、n一.考试题型介绍n二.内容串讲n三.每章重点n四.习题讲解总复习一.考试题型介绍(一). 名词解释题（310=30）(二). 简答题（6 65=30）(三)计算题（2-3题,20）(四). 阐述题(102=20) 二.内容串讲n第一章 绪论（一）生化产品检测与分析的目的和意义（二）生化产品检测与分析的内容（三）生化产品检测与分析的方法第二章 生物工程分析的基础知识（一）样品的采集、制备和保存（二）生物样品预处理的方法（三）误差及分析方法的选择重点：进行样品分析的流程，样品的制备与预处理方法，分析方法的选择原则。从哪些方法来保证测定结果的准确度。第4章 化学分析法n（一）概述n（二）酸碱测定法
2、n（三）氧化还原滴定法n（四）重量法n重点：蛋白质及氨基酸的测定中的凯氏定氮法、还原糖的直接滴定法以及脂类测定的经典方法（索氏提取法）的原理、方法及注意事项。第5章 紫外-可见吸收光谱法n（一）紫外-可见吸收光谱定义 检测范围n（二）朗伯-比耳定律n（三）紫外-可见分光光度计n（四）分析条件的选择n（五）测定方法n（六）紫外-可见吸收光谱的应用n重点：光的吸收定律；分析条件的选择。生色团、助色团，红移、蓝移的定义。第6章 荧光分光光度法n（一）荧光的产生n（二）激发光谱与荧光光谱n（三）荧光分析仪器n（四）荧光分析方法特点及应用n重点：激发光谱与荧光光谱；具有荧光性质的分子的结构特征，荧光分析
3、方法与紫外可见分光光度法的区别与联系。第7章 薄层色谱法n（一）概述n（二）薄层色谱的基本原理n（三）薄层色谱的操作技术n（四）薄层色谱法定量分析n（五）薄层色谱法在生物工程分析中的应用n重点：薄层色谱的基本原理和薄层色谱的操作技术；比移值，分配系数，分离度的含义及应用。第8章 气相色谱分析法n（一）概述和基本理论n（二）定性分析方法n（三）定量分析方法n（四）气相色谱检测器n（五）气相色谱的应用n重点：塔板理论，定量方法的分类特点及适应范围、气相色谱仪结构组成和气相色谱检测器的选择和应用。第9章 高效液相色谱法n（一）高效液相色谱法的特点n（二）高效液相色谱的基本理论n（三）高效液相色谱的固
4、定相和流动相n（四）液相色谱仪n（五）高效液相色谱的应用n重点：高效液相色谱仪的组成部分及作用原理；检测器的分类及应用范围；固定相和流动相的选择；气相色谱与液相色谱的区别与联系。第10章 电泳法和高效毛细管电泳法n（一）概述n（二）电泳法和高效毛细管电泳法的基本理论n（三）电泳仪和高效毛细管电泳仪n（四）应用示例n重点：电泳法和高效毛细管电泳法的分离模式第12章 酶法分析n12.1 概述n12.2 酶法分析方法和应用示例n12.3 酶联免疫分析法重点:酶法分析的方法和应用范围第14章 生物传感器n（一）概述n（二）酶传感器n（三）核酸传感器n（四）几种新型生物传感器n重点：生物传感器的定义模型
5、和制作的主要方法以及电化学方法中常用的电极类型。n生物工程分析的定义： 是一门研究和讨论生物工程领域所需要的分析检验技术的方法、原理、仪器装置、操作要点以及应用范围等为主要内容的工具学科。第1章 绪论三.每章重点酸碱滴定配位滴定氧化还原滴定沉淀滴定电化学分析光学分析色谱分析波谱分析重量分析重量分析滴定滴定分析分析电导、电位、电解、库仑极谱、伏安发射、吸收，荧光、光度气相、液相、离子、超临界、薄层、毛细管电泳红外、核磁、质谱5/11/20221.理化检验篇(1)生化产品营养成分的测定(2)水分、矿物元素的测定(3)酶活力的测定生物工程分析的主要内容生物工程分析的主要内容:第第1章章.绪论绪论 2
6、.2.仪器分析篇仪器分析篇 (1)(1)紫外、可见吸收光谱法紫外、可见吸收光谱法 (2)(2)荧光分光光度法荧光分光光度法 (3) (3) 薄层色谱法薄层色谱法 (4)(4)气相色谱法气相色谱法 (5)(5)高效液相色谱法高效液相色谱法 (6)(6)电泳法和高效毛细管电泳法电泳法和高效毛细管电泳法 (7)(7)生物传感器生物传感器第2章 生物工程分析的基础知识一.样品分析流程: 样品的采集、制备和保存，样品的预处理，样品的采集、制备和保存，样品的预处理，成分检验与分析，数据处理，整理报告。成分检验与分析，数据处理，整理报告。二二.正确采样，必须遵守的原则：正确采样，必须遵守的原则：代表性代表性
7、三三.预处理方法分类：预处理方法分类：1.溶解法溶解法2.蒸馏法蒸馏法（1）常常压压蒸蒸馏馏（2）减压蒸馏（3）水蒸气蒸馏（4）分馏（5）扫集共蒸馏法）扫集共蒸馏法3.有机物破坏法有机物破坏法干法灰化干法灰化湿法消化湿法消化:是加入是加入强氧化剂强氧化剂（如浓硝酸、（如浓硝酸、高氯酸、高锰酸钾等），使样品消化，而被测物质呈高氯酸、高锰酸钾等），使样品消化，而被测物质呈离子状态保存在溶液中。离子状态保存在溶液中。4.溶剂提取法溶剂提取法溶剂分层法溶剂分层法浸泡法浸泡法盐析盐析5.色层分离法色层分离法6.其它的生化分离提纯技术其它的生化分离提纯技术四四. .分析方法的评价指标分析方法的评价指标 在
8、研究一个分析方法的好坏时，通常用在研究一个分析方法的好坏时，通常用精密精密度、准确度和灵敏度度、准确度和灵敏度三项指标评定。此外还三项指标评定。此外还考虑线性和线性范围、耐用性等考虑线性和线性范围、耐用性等. .1.精密度精密度 是指对同一样品多次测定，每次测定是指对同一样品多次测定，每次测定结果与均值的符合程度。结果与均值的符合程度。2. 准确度准确度 指测定值与真值之间的符合程度。指测定值与真值之间的符合程度。3. 灵敏度灵敏度 是指化学反应中是指化学反应中能检出的最低量。能检出的最低量。n4. 特异性特异性 指分析测定中对某一成分起反指分析测定中对某一成分起反应，其他物质对反应无影响或基
9、本无影应，其他物质对反应无影响或基本无影响。响。二二. . 提高分析精确度的方法提高分析精确度的方法( (控制和消除误差的方法控制和消除误差的方法) )n1 1 正确选取样品的量正确选取样品的量 n2 2 增加平行测定次数增加平行测定次数 n3 3 对照实验对照实验n4 4 空白实验空白实验n5 5 回收实验回收实验n6 6 校正仪器和标定试剂校正仪器和标定试剂n7 7 严格遵守操作规程严格遵守操作规程n（二）回收试验（二）回收试验 目的是检测误差目的是检测误差，以衡量分，以衡量分析方法的准确度。析方法的准确度。是在样品中加入一定量被测是在样品中加入一定量被测物质，然后用同样方法测定，测得值与
10、理论值物质，然后用同样方法测定，测得值与理论值之比乘以之比乘以100%即为回收率即为回收率，合格的回收率，合格的回收率应为应为100%5 %。第4章 化学分析法4.2 酸碱滴定法蛋白质系数:表示1份含氮量相当于蛋白质含量的份数. 不同的产品蛋白质其氨基酸构成比例及方式不同，故不同产品的蛋白质系数有差异。蛋白质的测定方法蛋白质的测定方法*凯氏定氮法双缩脲比色法紫外吸收法Folin-酚比色法染料染色法中性醋酸铅中性醋酸铅乙酸锌和亚铁氰化钾溶液乙酸锌和亚铁氰化钾溶液硫酸铜和氢氧化钠溶液硫酸铜和氢氧化钠溶液还有碱性醋酸铅、还有碱性醋酸铅、氢氧化铝溶液、活性炭等。氢氧化铝溶液、活性炭等。糖的测定常用澄清
11、剂的种类糖的测定常用澄清剂的种类铁氰化钾法铁氰化钾法4.3.1 还原糖的测定-直接滴定法( (斐林氏容量法斐林氏容量法) )n原理原理 将一定量的将一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合，立即生成天蓝色等量混合，立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀；沉淀很快与酒石酸钾反应，生成深蓝色的可的氢氧化铜沉淀；沉淀很快与酒石酸钾反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。溶性酒石酸钾钠铜络合物。 在加热条件下，以次甲基蓝作为指示剂，用样液滴定，样液中在加热条件下，以次甲基蓝作为指示剂，用样液滴定，样液中的的还原糖与酒石酸钾钠铜还原糖与酒石酸钾钠铜反应，生成红色的反应，生成红色的氧化亚铜氧化亚
12、铜沉淀；沉淀； 这种沉淀与亚铁氰化钾络合成可溶的无色络合物；二价铜全部这种沉淀与亚铁氰化钾络合成可溶的无色络合物；二价铜全部被还原后，稍过量的还原糖把次甲基蓝还原，溶液由兰色变为被还原后，稍过量的还原糖把次甲基蓝还原，溶液由兰色变为无色，即为滴定终点；无色，即为滴定终点； 根据样液消耗量可计算出还原糖含量。根据样液消耗量可计算出还原糖含量。 此法测得的是总还原糖量。此法测得的是总还原糖量。 在样品处理时，在样品处理时，不能用铜盐作为澄清剂，不能用铜盐作为澄清剂，以免样液中以免样液中引入引入CuCu2+2+，得到错误的结果。得到错误的结果。 碱性酒石酸铜碱性酒石酸铜甲液和乙液应分别贮存，用时才混
13、合甲液和乙液应分别贮存，用时才混合，否则酒石酸钾钠铜络合物长期在碱性条件下会慢慢分否则酒石酸钾钠铜络合物长期在碱性条件下会慢慢分解析出氧化亚铜沉淀，使试剂有效浓度降低。解析出氧化亚铜沉淀，使试剂有效浓度降低。说明与讨论说明与讨论 滴定必须在滴定必须在沸腾条件沸腾条件下进行下进行，其原因一是可以加快还其原因一是可以加快还原糖原糖与与CuCu2+2+的反应速度；二是次甲基蓝变色反应是可逆的反应速度；二是次甲基蓝变色反应是可逆的，还原型次甲基蓝遇空气中氧时又会被氧化为氧化的，还原型次甲基蓝遇空气中氧时又会被氧化为氧化型。此外，氧化亚铜也极不稳定，易被空气中氧所氧型。此外，氧化亚铜也极不稳定，易被空气
14、中氧所氧化。保持反应液沸腾可防止空气进入，避免次甲基蓝化。保持反应液沸腾可防止空气进入，避免次甲基蓝和氧化亚铜被氧化而增加耗糖量。和氧化亚铜被氧化而增加耗糖量。 滴定时不能随意摇动锥形瓶，更不能把锥形瓶从热源滴定时不能随意摇动锥形瓶，更不能把锥形瓶从热源上取下来滴定，以防止空气进入反应溶液中。上取下来滴定，以防止空气进入反应溶液中。样品溶液预测的目的；一是本法对样品溶液中还原糖样品溶液预测的目的；一是本法对样品溶液中还原糖浓度有一定要求浓度有一定要求(0.1%(0.1%左右左右) )，测定时样品溶液的消耗体，测定时样品溶液的消耗体积应与标定葡萄糖标准溶液时消耗的体积相近，通过预积应与标定葡萄糖
15、标准溶液时消耗的体积相近，通过预测可了解样品溶液浓度是否合适，浓度过大或过小应加测可了解样品溶液浓度是否合适，浓度过大或过小应加以调整，以调整，使预测时消耗样液量在使预测时消耗样液量在 10 10 mLmL 左右左右；5.加速灰化的方法:n(1) 改变操作方法 样品初步灼烧后取出坩埚冷却 在灰中加少量热水搅拌使水溶性盐溶解，使包住的碳粒游离出来 蒸去水分干燥灼烧n(2) 加HNO3(1:1)或30%H2O2 使未氧化的碳粒充分氧化并且使它们生成NO2和水，这类物质灼烧时完全消失，又不至于增加残留物灰分重量。n(3) 加乙酸镁、硝酸镁等，使碳粒不被包裹,同时得作空白实验。4.5.1 总灰分的测定
16、灰分测定步骤n在坩埚中称取定量样品在电炉中炭化至无烟 在马福炉中灼烧到灰白色(灰化) 降至200 放入干燥室内冷却称重灼烧1小时 冷却到恒重n灰分%=（灰分重量/样品重量 ）100三.脂类物质提取剂的选择经典方法经典方法索氏提取器索氏提取器虹吸管虹吸管联接管联接管溶剂蒸汽上升管溶剂蒸汽上升管4.常用的脂类提取剂有哪些?5.索氏提取法的原理、仪器构造、优点和操作过程分别是什么？索氏提取法的原理：脂肪不溶于水，易溶于乙醚、石油醚、氯仿等溶液中。用乙醚等有机溶液提取样品中脂肪等再经蒸发除去有机溶剂，经称重就可知粗脂肪的含量。优点：即用易挥发溶剂在索氏提取器里不断地蒸发、冷凝、溶解被提取物、纯溶剂再蒸发、冷凝、溶解被提取物，一直到把被提取物提取干净。这一方法简单、提取完全。 仪器：索氏提取器操作过程：球瓶内放有机溶剂，经水浴加热使溶剂不断蒸发。提取筒内装样品，溶剂蒸气经冷凝器冷凝后不断滴入提取筒内。溶剂在此与样品充分接触，溶解其中的脂肪。经过一定时间后，溶剂不断蒸发，冷凝，样品受到一次次新鲜溶剂的浸泡，直到样品中所有的脂肪完全溶出止。第第5章章 紫外紫外-可见分光光度法可见分光光度法n5.1
