矿泉水卫生微生物检验记录样品编号： 检验开始时间： 年 月 日样品名称： 检验完成时间： 年 月 日检测项目： 检测依据：GB 8538-2016 一、大肠菌群测定（多管发酵法）：1.吸取10ml水样接种到盛有10ml双料乳糖胆盐发酵培养液的试管中，共接种5管；2.吸取1ml水样接种到盛有10ml单料乳糖胆盐发酵培养液的试管中，共接种5管；3.吸取1ml水样接种到9ml灭菌生理盐水的试管中，混匀，用5ml灭菌吸管吸取5ml稀释液分别加到5支盛有10ml单料乳糖胆盐发酵培养液的试管中，每管1ml（即0.1ml水样）；轻摇试管，使液体充分混合，置36±1℃培养箱内培养25h，观察每管是否产气，若产气该管则为阳性，如不产气则为大肠菌群阴性自检测阳性管中取一环培养液，接种到亮绿乳糖胆盐培养液（BGLB）管中，置36±1℃培养箱内培养48h；观察BGLB管中的产气情况，如有产气，则可确定为“大肠菌群阳性”，如不产气则为“大肠菌群阴性”。
记下BGLB管里产气的阳性试管数接种量mL1010101010111110.10.10.10.10.1培养时间（h）培养温度（℃）乳糖胆盐初发酵12536±122536±132536±142536±152536±1亮绿乳糖胆盐证实试验14836±124836±134836±144836±154836±1注：产酸产气；+产酸不产气或有可疑菌落；-不产酸不产气或无可疑菌落；G-b革兰氏阴性杆菌；G+b革兰氏阳性杆菌； G+c革兰氏阳性球菌结果： 根据证实为大肠菌群阳性的管数，查MPN检索表，得：12345 MPN/100ml MPN/100ml MPN/100ml MPN/100ml MPN/100ml电子天平编号: 使用状况 试验前： 试验后：培养箱编号： 使用状况 试验前： 试验后：检测人： 校核人： 审核人：样品编号：二、 粪链球菌测定（滤膜法）：根据水质污染情况确定稀释倍数，用无菌镊子夹取滤膜边缘部分，将粗糙面向上，贴在滤床上，固定好滤器，过滤。
每张滤膜过滤250mL水样或稀释液将过滤后的滤膜直接转移至KF链球菌琼脂培养基上，同时避免在滤膜和培养基之间夹留着气泡将平皿倒扣，放置在（ ）℃的恒温培养箱，培养（ ）h后，取出挑去可疑菌落进行镜检，并且计数从滤膜上挑取典型菌落，接种到脑-心浸淬琼脂培养基斜面上，在（ ）℃培养（ ）h，做证实性试验，如有菌落生长，则作过氧化氢酶实验、脑—心浸淬琼脂复培养和胆汁肉汤食盐证实是否存在粪链球菌编号试验12345空 白培养条件推测性试验过滤器加样量（ml）//KF链球菌琼脂培养48h/36±1℃红色菌落数//粉红色菌落数//染色镜检//确证性试验脑-心浸淬琼脂培养48h/36±1℃过氧化氢酶(阳性/阴性)//脑-心浸淬琼脂复培养/24~48h/36±1℃胆汁肉汤实验/3d/36±1℃结果报告典型菌落数//确认性阳性数//结果（CFU/250ml）//注： +生长或有可疑菌落；-不生长或无可疑菌落；G+c革兰氏阳性球菌；G-c革兰氏阴性球菌；电子天平编号: 使用状况 试验前： 试验后：培养箱编号： 使用状况 试验前： 试验后：检测人： 校核人： 审核人：样品编号： 三、铜绿假单胞菌（滤膜法）用无菌镊子夹取滤膜边缘部分，将粗糙面向上，贴在滤床上，固定好滤器，过滤。
每张滤膜过滤250mL水样或稀释液将过滤后的滤膜直接转移至CN琼脂平板上，同时避免在滤膜和培养基之间夹留着气泡将平皿倒扣，放置在（ ）℃的恒温培养箱，培养（ ）h后，观察菌落并且计数所有显蓝色或绿色（绿脓色素）的菌落，并进行绿脓菌素确证性试验从滤膜上挑取典型菌落，做证实性试验，证实是否存在铜绿假单胞菌最终的铜绿假单胞菌菌落计数按式计算：N=P+F(CF/nF)+R(CR/nR)式中：P—呈蓝/绿色的菌落数； F—显荧光的菌落数； R—呈红褐色的菌落数； nF—进行产氨测试的显荧光菌落数； CF—产氨阳性的显荧光菌落数； nR—进行产氨、氧化酶、金氏B培养基上显荧光测试的红褐色菌落数； CR—产氨、氧化酶、金氏B培养基上显荧光测试均呈阳性的红褐色菌落数； 编号试验\12345空白培养条件菌落培养过滤器加样量（ml）\/CN琼脂平板\40~48h/ 36±1℃结果观察呈蓝/绿色菌落数P0/绿脓菌素确证性试验阳性菌落数P/显荧光(非蓝/绿色)菌落数F/ 进行产氨测试的 显荧光菌落数 nF20~24h/ 36±1℃W乙酰胺肉汤试验产氨阳性显荧光 菌落数CF/呈红褐色不发荧光的菌落数 R/确证性试验进行产氨、氧化酶、金氏B培养基上显荧光测试的红褐色菌落数nR/产氨、氧化酶、金氏B培养基上显荧光测试均呈阳性的红褐色菌落数 CR/结果（CFU/250ml）///注： +生长或有可疑菌落；-不生长或无可疑菌落；电子天平编号： 使用状况 试验前： 试验后：培养箱编号： 使用状况 试验前： 试验后：检测人： 校核人： 审核人：样品编号：四、 产气夹膜梭菌在100级洁净工作台进行过滤操作，用无菌镊子夹取滤膜边缘部分，将粗糙面向上，贴在已灭菌的滤床上，固定好滤器，过滤。
每张滤膜过滤50mL水样或稀释液（如水样含菌较多，可用0.1%的蛋白胨水将水样按比例系时候进行检测）水样滤完后，关上阀门取下滤器，用灭菌镊子夹取滤膜边缘部分，移放在SPS培养基上，滤膜截留细菌面向上倒置于厌氧培养装置内于36±1℃厌氧培养24h，计数平板上的黑色菌落数1. 挑取平板上生长的可以黑色菌落3~5个，分别接种FT培养基，于36±1℃培养18~24h2. 用上述培养液涂片，镜检产气荚膜梭菌为革兰氏阳性粗大杆菌，其耐热菌株可能形成卵形芽孢，位于菌体中央或近端，其宽度一般不大于菌体3. 用接种针穿刺接种动力-硝酸盐培养基，于36±1℃厌氧培养24h，观察接种线的生长情况，判断有无动力然后滴加甲萘胺液和对氨基苯磺酸液各0.5ml，观察硝酸盐是否被还原产气荚膜梭菌无动力，能将硝酸盐还原为亚硝酸盐4. 取生长旺盛的FT培养液1ml接种于含铁牛乳培养基，在46℃水浴中培养2h后观察有无“暴烈发酵”现象，在5h内不发酵者为阴性产气荚膜梭菌能发酵乳糖，凝固酪蛋白并大量产气，呈“暴烈发酵”现象，但培养基不变黑5. 用接种环取FT培养液点种于卵黄琼脂平板（每张平板至少接种10个点），于36±1℃厌氧培养24h，观察接种点的变化。
产气荚膜梭菌会产生卵磷脂酶，分解卵黄中的卵磷脂，接种点的底部及周围形成乳白色的浑浊带 编号试验12345空白培养条件菌落培养过滤器加样（ml）/SPS培养基24h/ 36±1℃确证性试验FT培养基36±1℃18~24h革兰氏染色镜检//动力—硝酸盐培养基（动力试验）含铁牛乳培养基卵黄琼脂平板结果（CFU/50mL）/注： +生长或有可疑菌落；-不生长或无可疑菌落电子天平编号: 使用状况 试验前： 试验后：培养箱编号： 使用状况 试验前： 试验后：检测人： 校核人： 审核人：第 页 共 页。