枸杞子多糖含量的测定实验报告 竭诚为您提供优质文档/双击可除枸杞子多糖含量的测定实验报告篇一:实验三多糖含量的测定实验三多糖含量的测定一、实验目的1、分光光度法测多糖的原理和方法2、用officeexcel作标准曲线二、仪器与试剂1、仪器:7200分光光度计、水浴锅、电子天平2、试剂:1水葡萄糖、5%苯酚溶液、浓h2so4、dh2o3、器皿:50ml容量瓶、10ml量筒、玻棒、洗耳球、烧杯、试管三、步骤1、标准曲线的绘制①取1水葡萄糖0.551g于50ml容量瓶,加入蒸馏水溶解并小心稀释至刻度,再取5ml于50ml容量瓶,加蒸馏水稀释,即1.0mg/ml②分别量取0.25ml,0.5ml,1.0ml,1.5ml,2.0ml,2.5ml分别置于已编号的50ml容量瓶,加蒸馏水定容③分别吸取上述溶液各2.0ml,再加入5%苯酚1ml,摇匀后迅速加入5ml浓h2so4,摇匀后,室温5min,90oc水浴15min,冷却至室温空白对照:2ml蒸馏水+1ml5%苯酚+5ml浓硫酸吸光度A得浓度c与吸光度的线性方程y=ax+b④准确量取多糖溶液(待测)2.0ml于50ml容量瓶中,加蒸馏水定容,方法同上述。
四结果①计算浓度(待测液)本组所测得多糖溶液(待测)的吸光度为的0.385,代入根据吸光度A得浓度c与吸光度的线性方程y=14.255x+0.0309,可得待测液的浓度为0.025*25=0.625mg/ml.②实验主要步骤(记录)步骤记录:Ⅰ首先配制浓度分别为0.005mg/ml、0.01mg/ml、0.02mg/ml、0.03mg/ml、0.04mg/ml、0.05mg/ml的葡萄糖溶液;然后取配好的溶液各2.0ml,再加入5%苯酚1ml,摇匀后迅速加入5ml浓h2so4,;不断震荡,溶液逐渐变为褐色,放出热量,且随着葡萄糖浓度的增加,溶液的颜色也不断变深;室温5min,90oc水浴15min,反应更为充分,溶液颜色有稍微加深,冷却至室温;最后用7200分光光度计一一测量其吸光度,得到的的数据是0.098、0.19、0.337、0.412、0.584、0.774Ⅱ根据上述的方法再测量待测液的吸光度,为0.385Ⅲ利用excel软件作出浓度与吸光度的特性曲线图③用excel作图,并选择性粘帖至word到pDF五注意1、高毒——苯酚(强腐蚀)2、高腐蚀——浓硫酸篇二:枸杞多糖检测作业指导书枸杞中枸杞多糖检测作业指导书1.目的:规定了枸杞中枸杞多糖的测定方法。
2.适用范围:适用于枸杞中枸杞多糖的测定3.编写依据:gb/T18672-20XX《枸杞(枸杞子)附录A 枸杞多糖测定》4.原理:用80%乙醇溶液提取以除去单糖、低聚糖、甙糖及生物碱等干扰性成份,然后用水提取其中所含的多糖类成份,多糖类成份在硫酸作用下,先水解成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物,然后和苯酚缩合成有色化合物,用分光光度法于适当波长处测定其多糖含量5.仪器和设备5.1实验用样品粉碎机5.2电子分析天平(±0.0001g)5.3紫外-可见分光光度计(752型):带1cm比色皿5.4电热恒温水浴锅5.5圆底烧瓶:250mL(24#标准磨口)5.6球形冷凝管5.7容量瓶:250ml5.8具塞试管:25mL5.9刻度移液管:1mL、2mL、10mL5.10单标移液管:10mL6.试剂及材料6.180%乙醇溶液:于800mL95%分析纯乙醇中加入150mL 纯水,摇匀6.2硫酸:分析纯6.3盐酸:分析纯6.4苯酚液:取苯酚100g,加铝片0.1g与碳酸钠0.5g,蒸馏收集中间部分馏分,初时少量馏分和蒸馏结束时的馏分舍弃6.55%苯酚溶液:称取蒸馏后苯酚5g,加水95mL水,摇匀,贮存于0℃~4℃冰箱中(有效期为7天)7.操作步骤:7.1试样的制备取具有代表性试样200g,用四分法将试样缩减至100g,取适量样品严密封口,置冰箱冷冻室中冷冻约15min~20min,取出迅速粉碎并混匀,及时称取制备的试样。
7.2试样的测定7.2.1样品溶液的制备精密称取制备样品0.4g~0.45g (精确到0.0001g)置于250mL圆底烧瓶中,加入80%乙醇溶液200mL,80℃回流提取1h,趁热过滤,残渣用80%热乙醇溶液洗涤10次,每次用量约10mL残渣连同滤纸置于烧瓶中,加入烧开的水100mL,沸水提取1h,趁热过滤,滤液收集于250mL容量瓶中,残渣用热水充分洗涤,洗液并入滤液,冷却后定容至刻度,摇匀,待测7.2.2标准曲线的绘制精密称取105℃干燥恒重的分析纯无水葡萄糖1g(精确到0.0001g),加水溶解,加入5mL分析纯盐酸,定容至1000mL,此溶液为葡萄糖标准溶液储备液,浓度为1.0000mg/mL,用10mL单标移液管移取标准葡萄糖储备液10mL于100mL容量瓶中,加水稀释并定容至刻度,摇匀,此溶液为葡萄糖标准溶液使用液,浓度为0.10000mg/mL,精密吸取标准使用液0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL,分别置于具塞试管中,加水使体积为2.0mL,加入5%苯酚溶液1mL,摇匀,迅速加入硫酸5mL,摇匀后放置5min,置沸水浴中加热15min,取出后立即用凉水冷却到室温,于490nm 波长处测定吸光度,绘制标准曲线。
7.2.3样品测定准确吸取待测液1~2mL,加5%苯酚溶液1mL,摇匀,以下操作同标准曲线绘制下的方法相同,测定吸光度,根据标准曲线查出显色液中葡萄糖含量相当于标准溶液的体积7.3结果计算c?V2?250?3.19?100x?m?V1?1000式中:x——多糖含量(以葡萄糖计),单位为克每一百克(%);c——葡萄糖标准使用液浓度,单位为毫克每毫升(mg/mL);V1——比色时所移取待测液体积,单位为毫升(mL);V2——显色液中葡萄糖含量相当于葡萄糖标准溶液的体积,单位为毫升(mL);m——称样量,单位为克(g);250——定容体积,单位为毫升(mL);3.19——葡萄糖换算多糖的换算因素8.检验结果的判断:8.1每个试样取两个平行样进行测定,以其算术平均值为测定结果,允许相对偏差为5%8.2所做标准曲线的相关系数需大于0.9998.3按标准值进行判断,符合要求的在原始记录中填写“符合”,检验结果不在标准值范围时,填写“不符合”篇三:多糖含量测定多糖含量的测定参照国标nY/1676-20XX一、实验原理多糖在硫酸作用下,先水解成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物,与苯酚反应生成橙黄色溶液,在490nm处有特征吸收,与标准曲线比较定量。
二、试剂1、硫酸(h2so4,国药集团),ρ=1.84g/mL;2、无水乙醇(国药集团);3、苯酚(国药集团),重蒸馏;4、80%乙醇溶液(国药集团);5、葡萄糖(国药集团),使用前于105℃恒温烘干至恒重;6、80%苯酚溶液:称取80g苯酚于100mL烧杯中,加水溶解,定容至100ml后转至棕色瓶中,置4℃冰箱中避光贮存7、5%苯酚:吸取5mL,80%的苯酚溶液,溶于75mL水中,混匀,现配现用8、100mg/L标准葡萄糖溶液:称取0.1000g葡萄糖于100mL烧杯中,加水溶解,定容至1000mL,4℃冰箱中避光贮存三、仪器双光束紫外可见分光光度计(Tu-1901;北京普析通用仪器有限责任公司) -全文完-。