PH1085 番红O-固绿软骨染色液使用说明 Phygene PH1085|改良番红O-固绿软骨染色液 Safranin O-Fast Green Staining Kit(modified) Catalog No:PH1085Size:?5×50mL|?5×101mL Store at RT 试剂简介 软骨组织由软骨细胞和软骨基质组成,软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨软骨染色方法有很多种,例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等 改良番红O-固绿软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色,嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而呈绿色或蓝色,与呈现红色的软骨对比鲜明,从而将软骨组织与骨组织区分开番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料,其显示软骨是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团(硫酸软骨素或硫酸角质素)结合番红O着色与阴离子的浓度近似成正比关系,间接反映基质中蛋白多糖的含量和分布。
当软骨受到损伤时,软骨中的糖蛋白会释放出来,使基质成分分布不均匀,从而导致番红O淡染或不着色通过图像分析软件可对番红O染色的软骨基质进行定量分析,固绿与胶原纤维结合,不宜褪色,番红O-固绿染色的分化很关键,分化过度易导致切片不着色,分化不足易导致切片着色过深 试剂组分 Components5×50mL5×101mL Storage A1:Weigert A液25ml50ml RT避光 A2:Weigert B液25ml50ml RT 取A1、A2等量混合即为Weigert染液,24h后失去染色力,不宜预先配制 试剂(B):酸性乙醇分化液50ml101ml RT 试剂(C):固绿染色液50ml101ml RT避光 试剂(D):Safranin O stain50ml101ml RT避光 试剂(E):乙酸溶液50ml101ml RT 有效期:12个月有效 操作步骤(仅供参考): 1、标本的处理:10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片 2、常规脱蜡至水 3、入新鲜配制的Weigert染液染色3~5min。
4、酸性乙醇分化液分化15s 5、蒸馏水洗1min 6、入固绿染色液内浸染1.5~3min,蒸馏水洗1min 7、入Safranin O stain内浸染2~5min,蒸馏水洗1min 8、用乙酸溶液洗涤切片1~2min,以便去除残留的固绿,蒸馏水洗1min 9、分别用95%乙醇、无水乙醇脱水 PH1085|改良番红O-固绿软骨染色液 Safranin O-Fast Green Staining Kit(modified) Catalog No:PH1085Size:?5×50mL|?5×101mL Store at RT 试剂简介 软骨组织由软骨细胞和软骨基质组成,软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨软骨染色方法有很多种,例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等 改良番红O-固绿软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色,嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而呈绿色或蓝色,与呈现红色的软骨对比鲜明,从而将软骨组织与骨组织区分开。
番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料,其显示软骨是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团(硫酸软骨素或硫酸角质素)结合番红O着色与阴离子的浓度近似成正比关系,间接反映基质中蛋白多糖的含量和分布当软骨受到损伤时,软骨中的糖蛋白会释放出来,使基质成分分布不均匀,从而导致番红O淡染或不着色通过图像分析软件可对番红O染色的软骨基质进行定量分析,固绿与胶原纤维结合,不宜褪色,番红O-固绿染色的分化很关键,分化过度易导致切片不着色,分化不足易导致切片着色过深 试剂组分 Components5×50mL5×101mL Storage A1:Weigert A液25ml50ml RT避光 A2:Weigert B液25ml50ml RT 取A1、A2等量混合即为Weigert染液,24h后失去染色力,不宜预先配制 试剂(B):酸性乙醇分化液50ml101ml RT 试剂(C):固绿染色液50ml101ml RT避光 试剂(D):Safranin O stain50ml101ml RT避光 试剂(E):乙酸溶液50ml101ml RT 有效期:12个月有效。
操作步骤(仅供参考): 1、标本的处理:10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片 2、常规脱蜡至水 3、入新鲜配制的Weigert染液染色3~5min 4、酸性乙醇分化液分化15s 5、蒸馏水洗1min 6、入固绿染色液内浸染1.5~3min,蒸馏水洗1min 7、入Safranin O stain内浸染2~5min,蒸馏水洗1min 8、用乙酸溶液洗涤切片1~2min,以便去除残留的固绿,蒸馏水洗1min 9、分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。