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1、第一篇微生物学基础第第3 3章消毒与灭菌章消毒与灭菌 第一节第一节 物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法 第二节第二节 化学消毒灭菌法化学消毒灭菌法 第三节第三节 影响消毒灭菌效果的因素影响消毒灭菌效果的因素4/24/20221无菌操作基本技术n n灭菌灭菌灭菌灭菌n n接种接种接种接种4/24/20222n n灭菌灭菌灭菌灭菌(sterilization)(sterilization)：杀灭或去除物体上所有微生杀灭或去除物体上所有微生杀灭或去除物体上所有微生杀灭或去除物体上所有微生物的方法，包括芽胞。物的方法，包括芽胞。物的方法，包括芽胞。物的方法，包括芽胞。n n消毒消毒消毒消毒(disinfec
2、tion)(disinfection)：指杀死物体上病原微生物的指杀死物体上病原微生物的指杀死物体上病原微生物的指杀死物体上病原微生物的方法，芽胞或非病原微生物可能仍存活。方法，芽胞或非病原微生物可能仍存活。方法，芽胞或非病原微生物可能仍存活。方法，芽胞或非病原微生物可能仍存活。 用于消毒的药品称为用于消毒的药品称为用于消毒的药品称为用于消毒的药品称为消毒剂消毒剂消毒剂消毒剂(disinfectant)(disinfectant)。n n防腐防腐防腐防腐(antisepsis)(antisepsis)：体外防止或抑制细菌生长繁殖体外防止或抑制细菌生长繁殖体外防止或抑制细菌生长繁殖体外防止或抑制
3、细菌生长繁殖的方法。细菌一般不死亡。的方法。细菌一般不死亡。的方法。细菌一般不死亡。的方法。细菌一般不死亡。 用于防腐的药品称为用于防腐的药品称为用于防腐的药品称为用于防腐的药品称为防腐剂防腐剂防腐剂防腐剂(antiseptics)(antiseptics)。第一节第一节 常用术语和概念常用术语和概念4/24/20223n n抑菌抑菌抑菌抑菌(bacteriostasis):(bacteriostasis):抑制细菌和真菌的生长抑制细菌和真菌的生长抑制细菌和真菌的生长抑制细菌和真菌的生长繁殖的方法。繁殖的方法。繁殖的方法。繁殖的方法。常用的抑菌剂（常用的抑菌剂（常用的抑菌剂（常用的抑菌剂（ba
4、cteriostatbacteriostat）是一些抗生素，）是一些抗生素，）是一些抗生素，）是一些抗生素，能可逆性抑制细菌的繁殖，但不直接杀死细菌能可逆性抑制细菌的繁殖，但不直接杀死细菌能可逆性抑制细菌的繁殖，但不直接杀死细菌能可逆性抑制细菌的繁殖，但不直接杀死细菌n n无菌无菌无菌无菌(asepsis):(asepsis):指没有活菌的意思。指没有活菌的意思。指没有活菌的意思。指没有活菌的意思。 无菌操作无菌操作无菌操作无菌操作 (antiseptic technique) (antiseptic technique)：指防止细菌指防止细菌指防止细菌指防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。
5、进入人体或其他物品的操作技术。进入人体或其他物品的操作技术。进入人体或其他物品的操作技术。n n清洁和净化：减少微生物数量或活性的方法。清洁和净化：减少微生物数量或活性的方法。清洁和净化：减少微生物数量或活性的方法。清洁和净化：减少微生物数量或活性的方法。4/24/20224第二节第二节 消毒灭菌方式消毒灭菌方式 一、物理消毒灭菌法一、物理消毒灭菌法n n热力灭菌法热力灭菌法干热灭菌法湿热灭菌法干热灭菌法湿热灭菌法n n光线与射线光线与射线n n过滤除菌过滤除菌n n超声波消毒法超声波消毒法n n干燥与低温抑菌法干燥与低温抑菌法4/24/20225干热灭菌法：使微生物脱水干燥和大分子干热灭菌法
6、：使微生物脱水干燥和大分子变性死亡变性死亡n n焚烧焚烧n n烧灼烧灼n n干烤：通常加温干烤：通常加温160160180180保持保持2h2hn n红外线灭菌红外线灭菌4/24/20226湿热灭菌法湿热灭菌法n n在同一温度下湿热的杀菌效果比干热好，在同一温度下湿热的杀菌效果比干热好，因为：因为：uu温热灭菌时菌体蛋白质易变性；温热灭菌时菌体蛋白质易变性；温热灭菌时菌体蛋白质易变性；温热灭菌时菌体蛋白质易变性；uu湿热穿透力大；湿热穿透力大；湿热穿透力大；湿热穿透力大；uu湿热蒸汽有潜热存在。湿热蒸汽有潜热存在。湿热蒸汽有潜热存在。湿热蒸汽有潜热存在。4/24/20227巴氏消毒法（巴氏消毒
7、法（pasteurization）n n 62.8 30min 71.7 1530秒秒n n杀死液体中的病原菌或某些特定微生物。杀死液体中的病原菌或某些特定微生物。n n消毒牛奶、酒类等食品。消毒牛奶、酒类等食品。4/24/20228煮沸消毒法煮沸消毒法n n煮沸煮沸100经经5min可杀死一切细菌的繁殖可杀死一切细菌的繁殖体，一般消毒以煮沸体，一般消毒以煮沸10min为宜。为宜。n n芽胞需芽胞需12小时才能杀死。小时才能杀死。n n用于一般外科器械、胶管和注射器、饮水用于一般外科器械、胶管和注射器、饮水和食具的消毒。和食具的消毒。4/24/20229流通蒸汽灭菌法流通蒸汽灭菌法n n细菌繁
8、殖体需细菌繁殖体需15-30min才能杀死，但芽胞才能杀死，但芽胞不会被全部杀死。不会被全部杀死。n n间歇灭菌法间歇灭菌法 uu本法是利用反复多次的流通蒸汽灭菌，以达到本法是利用反复多次的流通蒸汽灭菌，以达到本法是利用反复多次的流通蒸汽灭菌，以达到本法是利用反复多次的流通蒸汽灭菌，以达到灭菌的目的。灭菌的目的。灭菌的目的。灭菌的目的。uu只适用于不耐热（只适用于不耐热（只适用于不耐热（只适用于不耐热（100100以内）的营养物质如以内）的营养物质如以内）的营养物质如以内）的营养物质如某些培养基的灭菌。某些培养基的灭菌。某些培养基的灭菌。某些培养基的灭菌。4/24/202210高压蒸汽法高压蒸
9、汽法 Autoclavingn n压力：压力：n n温度：温度：121.3n n时间：时间：1530minn n效果效果uu杀死一切微生物，杀死一切微生物，杀死一切微生物，杀死一切微生物，包括芽胞包括芽胞包括芽胞包括芽胞n n耐高热、不怕潮湿耐高热、不怕潮湿的物品的物品4/24/202211燃料加热压力锅式高压灭菌器4/24/202212光线与射线光线与射线n n日光和紫外线日光和紫外线日光和紫外线日光和紫外线uu杀菌波长：杀菌波长：杀菌波长：杀菌波长：240240280nm280nm，最适：，最适：，最适：，最适：260nm260nmuu杀菌机制：破坏核酸结构杀菌机制：破坏核酸结构杀菌机制：
10、破坏核酸结构杀菌机制：破坏核酸结构uu用于物体表面和空气消毒用于物体表面和空气消毒用于物体表面和空气消毒用于物体表面和空气消毒n n电离射线和微波电离射线和微波电离射线和微波电离射线和微波uu 射线、高能量的电子束（阴极射线）射线、高能量的电子束（阴极射线）射线、高能量的电子束（阴极射线）射线、高能量的电子束（阴极射线）uu不升高温度且穿透力强不升高温度且穿透力强不升高温度且穿透力强不升高温度且穿透力强uu适于忌热物品的灭菌或消毒适于忌热物品的灭菌或消毒适于忌热物品的灭菌或消毒适于忌热物品的灭菌或消毒4/24/202213滤过除菌（滤过除菌（filter）n n常用不能加热灭菌的血清或液体常用
11、不能加热灭菌的血清或液体uu不能除去病毒、支原体和型细菌不能除去病毒、支原体和型细菌不能除去病毒、支原体和型细菌不能除去病毒、支原体和型细菌n n常用的除菌滤器常用的除菌滤器uu蔡氏（蔡氏（蔡氏（蔡氏（SeitzSeitz）滤器）滤器）滤器）滤器uu玻璃滤器玻璃滤器玻璃滤器玻璃滤器uu薄膜滤器薄膜滤器薄膜滤器薄膜滤器4/24/202214n n超声波消毒法：杀菌不彻底，主要用于破超声波消毒法：杀菌不彻底，主要用于破碎细菌，提取菌体组分。碎细菌，提取菌体组分。腌制腌制n n干燥与低温抑菌法：主要用于保存食品、干燥与低温抑菌法：主要用于保存食品、保存菌种。保存菌种。真空干燥法真空干燥法4/24/2
12、02215二、化学消毒灭菌法二、化学消毒灭菌法类别类别作用机制作用机制常用种类常用种类酚类酚类蛋白变性，细胞膜损伤蛋白变性，细胞膜损伤石炭酸石炭酸醇类醇类蛋白变性蛋白变性乙醇乙醇氧化剂氧化剂氧化、蛋白沉淀氧化、蛋白沉淀高锰酸钾、过氧乙酸、碘酒高锰酸钾、过氧乙酸、碘酒重金属盐重金属盐氧化、蛋白酶变性氧化、蛋白酶变性红汞、硫柳汞红汞、硫柳汞表面活性剂表面活性剂蛋白变性，细胞膜损伤蛋白变性，细胞膜损伤新洁而灭新洁而灭染料染料干扰氧化、抑制繁殖干扰氧化、抑制繁殖龙胆紫龙胆紫酸碱类酸碱类破坏膜、壁，蛋白凝固破坏膜、壁，蛋白凝固醋酸、生石灰醋酸、生石灰烷化剂烷化剂蛋白质、核酸烷基化蛋白质、核酸烷基化环氧乙
13、烷环氧乙烷4/24/202216消毒剂的作用机理消毒剂的作用机理n n使细胞膜通透性受损；使细胞膜通透性受损；n n使菌体蛋白变性和凝固，失去生物活性，使菌体蛋白变性和凝固，失去生物活性，导致细菌死亡；导致细菌死亡；n n破坏或改变蛋白质与核酸功能基团，使菌破坏或改变蛋白质与核酸功能基团，使菌体酶蛋白失去酶的活性。体酶蛋白失去酶的活性。4/24/202217二、化学消毒灭菌法二、化学消毒灭菌法（一）（一）高效消毒剂高效消毒剂 （high-leveldisinfectants） 1.1.含氯消毒剂；含氯消毒剂；2.2.过氧化物消毒剂；过氧化物消毒剂；（二）（二）中效消毒剂中效消毒剂 （inter
14、mediate-leveldisinfectants） （三）（三）低效消毒剂低效消毒剂 （low-leveldisinfectants） 1.1.季铵盐类；季铵盐类；2.2.氯已定；氯已定；3.3.高锰酸钾高锰酸钾 4/24/202218固体二氧化氯消毒剂固体二氧化氯消毒剂4/24/202219第三节第三节 消毒灭菌的运用消毒灭菌的运用（一）（一）（一）（一）高危器械物品高危器械物品高危器械物品高危器械物品 用时需进入无菌组织用时需进入无菌组织用时需进入无菌组织用时需进入无菌组织 的物品。所有这些物品都应该灭菌。的物品。所有这些物品都应该灭菌。的物品。所有这些物品都应该灭菌。的物品。所有这些
15、物品都应该灭菌。 （二）（二）（二）（二）中危器械物品中危器械物品中危器械物品中危器械物品 用时不进入无菌组织用时不进入无菌组织用时不进入无菌组织用时不进入无菌组织 但接触黏膜的器械。采用消毒即可。但接触黏膜的器械。采用消毒即可。但接触黏膜的器械。采用消毒即可。但接触黏膜的器械。采用消毒即可。（三）（三）（三）（三）低危器械物品低危器械物品低危器械物品低危器械物品 只接触未损伤皮肤但只接触未损伤皮肤但只接触未损伤皮肤但只接触未损伤皮肤但 不进入无菌组织和不接触黏膜的物品。不进入无菌组织和不接触黏膜的物品。不进入无菌组织和不接触黏膜的物品。不进入无菌组织和不接触黏膜的物品。 一般用后清洗、消毒即
16、可。一般用后清洗、消毒即可。一般用后清洗、消毒即可。一般用后清洗、消毒即可。（四）（四）（四）（四）快速周转的医疗器械快速周转的医疗器械快速周转的医疗器械快速周转的医疗器械 一、医疗器械物品的消毒灭菌一、医疗器械物品的消毒灭菌4/24/202220（二）室内空气消毒灭菌（二）室内空气消毒灭菌 紫紫外外线线照照射射（W/m3，1h）最最常常用用；滤滤过过除除菌菌：空空气气通通过过孔孔径径小小于于0.2m的的高高效效过过滤装置以除去细菌和带菌尘埃。滤装置以除去细菌和带菌尘埃。 2 2化化学学消消毒毒法法 包包括括化化学学消消毒毒剂剂喷喷雾雾和和熏熏蒸蒸：过过氧氧乙乙酸酸喷喷雾雾、熏熏蒸蒸；过过氧氧化化氢氢喷喷雾；雾；二氧化氯溶液喷洒；二氧化氯溶液喷洒；中草药点燃烟熏。中草药点燃烟熏。（三）手和皮肤的消毒（三）手和皮肤的消毒 用肥皂和流动水经常并正确洗手用肥皂和流动水经常并正确洗手 病原微生物污染时应用消毒剂消毒。病原微生物污染时应用消毒剂消毒。 4/24/202221（四）黏膜的消毒（四）黏膜的消毒 （五）病人排泄物与分泌物的消毒灭菌（五）病人排泄物与分泌物的消毒灭菌 （六）病人污染物品的
