中科院生化分子

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1、中科院生化分子 大肠杆菌转录起始过程需要RNA 聚合酶全酶,其中_因子辨认起始点,而 亚基和_亚基组成了催化中心。转录的终止反映在_终止子_。 所有信号肽的位置都在新生肽的N 端。()错 信号肽是指存在于蛋白多肽链上的在起始密码子之后能启动蛋白质运转的一段多肽序列,该序列常位于蛋白质的氨基末端,但也可以位于中部或其他地方。 遗传密码的特性和在基因传递中的意义,以及遗传密码是如何被破译的。 (1)遗传密码的特性及其在基因传递中的意义 遗传密码是三联子密码 1 个密码子由3 个连续的核苷酸组成,特异性地编码1 个氨基酸。 密码子的连续性 遗传密码以53方向、非重复、无标点的方式编码在核酸分子上。阅

2、读mRNA 时以密码子为单位,连续阅读,密码间无间断也没有重叠,AUG 为甲硫氨酸兼起始密码子。UAA、UAG 和UGA 为终止密码子。因此要正确阅读密码,必须从起始密码子开始,按一定的读码框架连续读下去,直至遇到终止密码子为止。若插入或删除一个核苷酸,就会使以后的读码框发生错位,称为移码突变。 密码子的简并性 一种氨基酸有两种或两种以上的密码子,对应于同一氨基酸的密码子称为同义密码子。除甲硫氨酸(AUG)和色氨酸(UGG)只有一个密码子外,其他氨基酸都有一个以上的密码子。密码的简并性可以减少有害突变,在物种的稳定性上起一定作用,还可以保证翻译的速率。 密码子与反密码子的相互作用在密码子与反密

3、码子的配对中,前两对碱基严格遵守碱基配对原则,但第三对碱基有一定的自由度,可以“摆动”,因而使某些tRNA 可以识别 1 个以上的密码子。tRNA 识别密码子的个数由反密码子的第一个碱基的性质决定。 a反密码子第一位碱基为A 或C 时,只能识别1 种密码,分别为U、G; b反密码子第一位碱基为G 或U 者可以识别2 种密码,分别为U 和C,A 和G; c反密码子第一位碱基为I(黄嘌呤)时可识别3 种密码(U、C、A)。 如果有几个密码子同时编码一个氨基酸,凡是第一、二位碱基不同的密码子都对应于各自独立的tRNA。 密码的通用性与特殊性 a通用性:所有生物几乎都使用同一套密码子。密码子的通用性说

4、明生物有共同的起源,有助于生物的进化的研究。 b特殊性:线粒体及少数生物基因组的密码子有变异,人线粒体中UGA 编码Trp,而不是终止密码子;AUA编码Met,而不是Ile;AGA 和AGC 是终止密码子,而不编码Arg。 密码的防错系统 密码的编排方式使得密码子中一个碱基被置换,其结果常常或是编码相同氨基酸或是以理化性质最接近的氨基酸取代。从而使基因突变造成的危害降至最低程度。即密码的编排具有防错功能,密码表是一个故障-安全系统,是在进化过程中获得的最佳选择 质粒的复制类型有两种:受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为_严紧型质粒_,不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为_松弛型质粒_。 感受

5、态细胞(competent cell) 感受态细胞是指受体细胞经过一些特殊方法(如CaCl2 等化学试剂)的处理后,细胞膜的通透性发生变化,成为能容许外源DNA 的载体分子通过的细胞。将构建好的载体转入感受态细胞进行表达,可以检验重组载体是否构建成功。感受态细胞作为重组载体的宿主可以进行后续实验,如蛋白质表达纯化等工作。 凝胶阻滞试验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA) 凝胶阻滞试验是一种体外分析DNA 与蛋白质相互作用的技术,基本原理是蛋白质与DNA 结合后增加相对分子质量,没有结合蛋白的DNA 片段跑得快,结合蛋白的DNA 跑得慢。凝胶阻滞试验可以用于检测DNA结合蛋白、RNA 结合蛋白,并可通过加入特异性的抗体来检测特定的蛋白质。 本文来源:网络收集与整理,如有侵权,请联系作者删除,谢谢!第3页 共3页第 3 页 共 3 页第 3 页 共 3 页第 3 页 共 3 页第 3 页 共 3 页第 3 页 共 3 页第 3 页 共 3 页第 3 页 共 3 页第 3 页 共 3 页第 3 页 共 3 页第 3 页 共 3 页

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