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1、龙眼花粉母细胞减数分裂观察_染色体-论文：以龙眼“石硖品种为材料，采用改进涂片法对花粉母细胞的减数分裂过程进行了系统观察，结果说明:.龙眼减数分裂进程与花蕾的大小，花药的颜色有密切关系，且在同一植株、同一花序，同一花蕾, 甚至同一花药中表现不同步性。.龙眼减数分裂染色体行为存在染色体片段、落后染色体、染色体桥、分裂不同步、微核及多分体等一系列异常现象，统计异常现象出现的频率，从细胞遗传学水平上分析了龙眼花粉母细胞减数分裂异常的原因。论文关键词：龙眼,花粉母细胞,减数分裂,染色体龙眼DimocarpuslonganLour.属于无患子科Sapindaceae龙眼属DimocarpusLour.植
2、物，原产我国南部，素有“东北人参，南方桂圆之称，是我国南方重要的经济树种之一。国内外对龙眼的研究主要集中在栽培学、生理学、分子生物学及储运技术等方面，对于龙眼的细胞学研究较少，林国阳等曾报道龙眼体细胞染色体数目为2n=30，而关于其花粉母细胞减数分裂方面的研究鲜有报道。本研究以石硖龙眼为试材，对其花粉母细胞减数分裂全过程进行观察，旨在为龙眼遗传育种和改进提供有价值的资料。1材料和方法1.1材料材料取自中国热带农业科学院南亚热带作物研究所龙眼种质资源圃。1.2方法 x通讯作者Authorforcorrespondence.Tel:0759-2859112,E-mail:ssy7299163 20
3、22年2月上旬到3月下旬，选取植株生长健壮、无病虫害的龙眼花序，于上午8:00起每隔半小时取材一次，至中午12:00结束。采集花序后立即放入卡诺氏固定液I(冰乙酸：无水乙醇=3：1)中固定424h，经95%、80%的乙醇各30min，最后转入70乙醇中置冰箱冷藏室保存备用。制片时取出花序，择取同样大小的小花解剖后取出花药，水洗后混合酶液5%纤维素酶：5%果胶酶=1：1于28酶解5h，水洗3次，卡诺氏固定液I固定30min，改进涂片法制片，Giemsa染色，Sony-80i生物显微镜镜检，将各时期典型图像拍照保存。2结果与分析2.1花蕾大小与龙眼减数分裂的关系龙眼花为聚伞花序圆锥形排列的混合花序
4、，未开放的花蕾为圆球形或近圆球形，单花小，浅黄色，花萼和花瓣各5枚，花药兴旺7-10枚，多为8枚，每个花药有4个花粉囊和一个药隔。减数分裂过程与花蕾直径存在一定相关性：花蕾直径约1.3mm时，花药为黄绿色，花粉母细胞进入减数分裂时期；当直径超过约1.83mm，花药黄色时，减数分裂已根本结束。同时观察发现减数分裂各时期进程具有不同步性，表现在不同植株间、同一植株的不同花序、同一花序的不同花蕾、同一花蕾的不同花药，甚至同一花药内不同的花粉母细胞间。2.2花粉母细胞减数分裂共观察前期四分体时期920个细胞(见表1)，减数分裂各个主要时期特征如下：表1减数分裂各时期染色体行为的花粉母细胞数目及频率Ta
5、ble1NumberandfrequencyofPMCsineachstageofmeiosis 减数分裂时期 Meiosis stage 统计细胞总数 Number of cells examined 正常细胞Normal cells 异常细胞Abnormal cells 数目 Numbers 频率 frequency 数目 Numbers 频率 Frequency 前期prophase 288 284 98.61% 4 1.39% 中期metaphase 20 11 55% 9 45% 后期anaphase 69 56 81.16% 13 18.84% 末期telophase 111 99
6、 89.19% 12 10.81% 前期prophase 55 55 100% 0 0% 中期metaphase 24 23 95.83% 1 4.17% 后期anaphase 47 40 85.11% 7 14.89% 末期telophase 11 7 63.63% 4 36.36% 四分体时期tetrad 295 231 78% 64 22% 合计 920 806 88% 114 12% 观察前期细胞288个，减数分裂正常细胞有284个。前期细胞染色体减数分裂行为如下：细线期，染色体细长，呈花束状，相互紧密缠绕位于细胞一侧图版1；偶线期，染色体为较长的细线，较细线期缩短增粗，同源染色体开始联会，位于细胞中央图版2；粗线期染色体进一步短缩图版3，1.39%的粗线期细胞出现两个核仁图版4，5；双线期染色体螺旋化，缩短变粗，染色体呈现出“V型、“X型、“O型等各种形状图版6；终变期染色体更加粗短，形成15对较规那么的二价体，多以棒状、点状等形式存在，并以1个或2个二价体与核仁相连,此期二价体在核内
