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1、猪繁殖与呼吸综合征猪繁殖与呼吸综合征 (porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)一、概述一、概述二、病原学二、病原学三、流行病学三、流行病学四、临床症状与病理变化四、临床症状与病理变化五、诊断五、诊断六、防制六、防制一、概述一、概述v猪猪繁繁殖殖与与呼呼吸吸综综合合征征(porcine (porcine reproductive reproductive and and respiratory respiratory syndromesyndrome，PRRS)PRRS)，又称兰耳病又称兰耳病v19871987年年首次首次暴发于美国
2、北卡罗纳州暴发于美国北卡罗纳州“神秘病神秘病”v1 1991991年荷兰年荷兰WensvoortWensvoort首次分离病毒（首次分离病毒（LVLV株）株）v19921992年年OIEOIE：猪繁殖与呼吸综合征猪繁殖与呼吸综合征v19961996年国内郭宝清首次分离年国内郭宝清首次分离CH-1aCH-1a株株v到目前为止，到目前为止，PRRSPRRS几乎遍及全球主要养猪国家和地区。几乎遍及全球主要养猪国家和地区。PRRSPRRS的危害的危害PRRSVPRRSV感染主要导致：母猪感染主要导致：母猪早产、流产、死胎、弱仔早产、流产、死胎、弱仔 公猪公猪精液品质下降精液品质下降 初生仔猪初生仔猪高
3、死亡率高死亡率 其它年龄猪其它年龄猪呼吸系统疾病呼吸系统疾病19911991年，欧洲大面积暴发年，欧洲大面积暴发PRRSPRRS，导致至少导致至少100100万头猪死亡万头猪死亡19961996年年，丹丹麦麦再再次次暴暴发发PRRSPRRS，全全国国40-50%40-50%的的母母猪猪出出现现流流产产、死死胎胎和断奶前仔猪的大量死亡和断奶前仔猪的大量死亡20002000年，美国农业部将年，美国农业部将PRRSPRRS列为最严重的猪病毒性传染病。列为最严重的猪病毒性传染病。在我国，在我国，20062006年以来的年以来的“高热病高热病”，呈流行态势。，呈流行态势。二、病原学二、病原学pPRRSV
4、属属于于尼尼多多病病毒毒目目（Nidovirales）动动脉脉炎炎病毒科病毒科pPRRSV RNA 基因组具有基因组具有很高的突变频率很高的突变频率.p非典型非典型PRRS的出现的出现p欧洲发现由美洲型毒株引起的欧洲发现由美洲型毒株引起的PRRSp美国分离到欧洲型毒株美国分离到欧洲型毒株p中国分离到高致病性的变异中国分离到高致病性的变异PRRSV两种基因型两种基因型PRRSVvPRRSV分为分为2个不同的地理群或基因型个不同的地理群或基因型,即即:1.以欧洲原型病毒以欧洲原型病毒LV株为代表的株为代表的欧洲基因型（简称欧洲基因型（简称A群）群）2.以美国原型病毒以美国原型病毒ATCC VR-2
5、332株为代表的株为代表的北美洲北美洲基因型（简称基因型（简称B群）群）v两种基因形之间的基因序列和抗原性差异较大两种基因形之间的基因序列和抗原性差异较大,两两个基因型毒株的同源性仅为个基因型毒株的同源性仅为55 %70 % 。Gp5 (ORF5)Gp5 (ORF5)M protein (ORF6)M protein (ORF6)GP2, GP3, or GP4GP2, GP3, or GP4(ORF 2, 3, 4)(ORF 2, 3, 4)N protein (ORF7)N protein (ORF7)ssRNA(+)ssRNA(+)Lipid bilayerLipid bilayerAA
6、A病毒理化特性病毒理化特性o对温度、酸碱比较敏感。对温度、酸碱比较敏感。o对对脂溶剂脂溶剂敏感。敏感。o一一般般无无血血凝凝性性: 日日本本分分离离的的2个个PRRSV毒毒株株能凝集小鼠红细胞。能凝集小鼠红细胞。 A 原原代代细细胞胞: 猪猪肺肺泡泡巨巨噬噬细细胞胞（PAM)，猪猪脾脾巨巨噬噬细胞、脑小胶质细胞细胞、脑小胶质细胞.B 传传代代细细胞胞: 比比PAM更更常常用用，如如非非洲洲绿绿猴猴肾肾细细胞胞MA-104及及 在在 MA-104基基 础础 上上 克克 隆隆 得得 到到 的的MARC-145、 CL2621、CRL11171等细胞。等细胞。细胞培养特性细胞培养特性MARC-145
7、细胞细胞1a1b23456715 kb 1: RNA replicase 5: GP5 (25kDa) 2: GP2 (29-30kDa) 6: Matrix (19kDa) 3: GP3 (45-50kDa) 7: Nucleocapsid (15kDa) 4: GP4 (31-35kDa)PRRSVPRRSV基因组结构基因组结构PRRSV的复制和转录模式图的复制和转录模式图 GP5蛋白蛋白：PRRSV最主要的保护性抗原蛋白最主要的保护性抗原蛋白，能，能够诱导机体产生够诱导机体产生中和抗体中和抗体。GP5有诱导细胞凋亡的有诱导细胞凋亡的功能，与致病性相关。功能，与致病性相关。M蛋白蛋白：PR
8、RSV中最保守的蛋白，也是诱导中最保守的蛋白，也是诱导细胞细胞免疫应答免疫应答最强蛋白，具有强免疫源性，应用于血清最强蛋白，具有强免疫源性，应用于血清学诊断。另外，对病毒感染起重要作用。学诊断。另外，对病毒感染起重要作用。 结构蛋白结构蛋白三、三、流行病学流行病学 猪通过多种途径感染猪通过多种途径感染PRRSV，如口、鼻、眼、腹膜、如口、鼻、眼、腹膜、阴道等，其中呼吸系统是主要感染途径。阴道等，其中呼吸系统是主要感染途径。种猪：种猪： 母猪母猪 能通过分泌物（乳汁等）向外排毒。能通过分泌物（乳汁等）向外排毒。 公猪公猪 通过精液散毒期因猪的品种不同而不同，通过精液散毒期因猪的品种不同而不同，
9、约克夏约克夏 3-12d，长白猪长白猪24-78d，汉普夏介于两汉普夏介于两者之间。者之间。 p鸟类鸟类(主要是鸭主要是鸭) ：为亚临床感染，长距离传播。：为亚临床感染，长距离传播。p空空气气：短短距距离离(3km)。PRRS的的发发生生出出现现明明显显的的季季节节性性，尤以寒冷季节多发。尤以寒冷季节多发。p 蚊蚊虫虫与与苍苍蝇蝇：最最近近，美美国国明明尼尼苏苏达达州州立立大大学学猪猪病病控控制制中中心心（SDEC）研研究究发发现现，PRRSV在在蚊蚊虫虫和和苍苍蝇蝇肠肠道道内内分分别别可可存存活活6h和和12h，它它们们能能机机械械传传播播PRRSV，使使PRRS的的防制更加困难。防制更加困
10、难。流行特点o病病的的传传播播十十分分迅迅速速，2-4周周即即可可蔓蔓延延，传传播播随随风风自而定，呈明显的跳跃式，自而定，呈明显的跳跃式，o在在猪猪的的保保育育舍舍内内，PRRS的的发发生生可可持持续续多多年年，使使猪猪生生长长迅迅速速下下降降50-70%，残残次次率率增增多多，死死亡亡率率上升上升10-25%。 抗体依赖的病毒增强作用o病病毒毒的的抗抗体体滴滴度度在在中中度度水水平平或或亚亚中中和和滴滴度度水水平平时时（称称为为感感染染增增强强抗抗体体）与与病病毒毒形形成成病病毒毒- -抗抗体体复复合合物物，能能明明显显增增强强FcFc受受体体（FcRFcR）或或补补体体受受体体（CRCR
11、）阳阳性性细细胞胞对对该该种种病病毒毒感感染染，从从而而引引起起疾疾病病的的进进展展、导导致致疾疾病病的的进进一一步步恶恶化化及及对对疫疫苗苗的的应应用用产产生生明明显显影影响响，这这种种现现象象称称为为抗抗体体依依赖赖的的病病毒毒增增强强作作用用（ADEADE）。）。PRRS的感染和免疫反应继发感染o 副副猪猪嗜嗜血血杆杆菌菌、猪猪链链球球菌菌、多多杀杀性性巴巴氏氏杆杆菌菌、大大 肠肠 杆杆 菌菌 、 沙沙 门门 氏氏 菌菌 及及 呼呼 吸吸 道道 冠冠 状状 病病 毒毒（PRCV）等呼吸道病原等呼吸道病原o猪猪瘟瘟混混合合感感染染 即即在在免免疫疫猪猪场场中中发发生生猪猪瘟瘟时时，从其血清
12、中检出从其血清中检出PRRS抗体，混合发生抗体，混合发生o圆环病毒感染圆环病毒感染四、四、临临床症状与病理床症状与病理变变化化 o怀怀孕后期流孕后期流产显产显著增多，著增多，o产产弱仔增多，弱仔增多，o受精率下降，受精率下降，o未断奶仔猪死亡率高，未断奶仔猪死亡率高，o下一下一轮发轮发情推情推迟迟，o严严重的呼吸道疾病等重的呼吸道疾病等。 PRRS 临床症状临床症状母母猪猪：主主要要表表现现为为厌厌食食、发发热热、嗜嗜睡睡，早早产产、流流产、死胎、弱仔、木乃伊等繁殖障碍。产、死胎、弱仔、木乃伊等繁殖障碍。公公猪猪：除除表表现现与与母母猪猪相相同同，还还有有性性欲欲缺缺乏乏、精精液液品质的降低、
13、精液产量的降低。品质的降低、精液产量的降低。其其他他年年龄龄的的猪猪：主主要要表表现现为为呼呼吸吸困困难难、断断奶奶前前死死亡率的增加、二次感染发病率的增加。亡率的增加、二次感染发病率的增加。病理病理变变化化 o特征性特征性间质间质性性肺炎肺炎和淋巴和淋巴结结的的轻轻度或中度度或中度肿肿大大 o流流产产胎儿胎儿的的血管周血管周围围出出现现以巨噬以巨噬细细胞和淋巴胞和淋巴细细胞浸胞浸润为润为特征的特征的动动脉炎脉炎心肌炎和心肌炎和脑脑炎炎病猪病猪流产的死胎流产的死胎病猪病猪卧床不起卧床不起仔猪仔猪呼吸困难呼吸困难病猪耳部病猪耳部皮肤严重发绀，呈皮肤严重发绀，呈“蓝耳蓝耳”症症状状肺炎病变，显示出
14、血性炎症肺炎病变，显示出血性炎症间质性间质性肺炎肺炎五、诊断五、诊断 临床诊断：初步诊断临床诊断：初步诊断(可能可能) 实验室诊断：确诊实验室诊断：确诊 病原检测病原检测病毒分离病毒分离 很少应用很少应用病毒蛋白检测病毒蛋白检测 很少应用很少应用病毒核酸检测病毒核酸检测 应用应用 抗体检测抗体检测 血清中和试验（血清中和试验（SN）较少应用较少应用 间接荧光抗体试验（间接荧光抗体试验（IFA）很少应用很少应用 酶联免疫吸附试验（酶联免疫吸附试验（ELISA)最常用最常用免疫过氧化物酶单层试验免疫过氧化物酶单层试验 (IPMA)很少应用很少应用乳胶凝集试验（乳胶凝集试验（LAT）常用常用 1.病
15、毒分离：病毒分离：准确，但病料的采集极为重要，极少用于诊准确，但病料的采集极为重要，极少用于诊断（因周期长）。断（因周期长）。 死胎或活产仔猪：肺、心、脑、肾、肝死胎或活产仔猪：肺、心、脑、肾、肝 和脾等和脾等 怀孕后期流产胎儿：胎儿血清，肺怀孕后期流产胎儿：胎儿血清，肺 哺乳仔猪、断奶仔猪和育肥猪：最哺乳仔猪、断奶仔猪和育肥猪：最 好采集肺，也可用脾、脑、扁桃体好采集肺，也可用脾、脑、扁桃体 等；母猪则可用血清、血浆。等；母猪则可用血清、血浆。 采集病料(一一) 病原检测病原检测p免疫组织化学技术免疫组织化学技术p免疫荧光抗体染色技术免疫荧光抗体染色技术p双抗夹心双抗夹心ELISA p反转录
16、反转录-聚合酶链反应聚合酶链反应(RT-PCR) 在诊断中逐渐得到了应用，但费用较贵。p核酸探针杂交技术核酸探针杂交技术 因繁琐，很少应用。2.病毒抗原（蛋白）检测病毒抗原（蛋白）检测3.病毒核酸病毒核酸(RNA)检测检测荧光抗体检测病猪细胞中的荧光抗体检测病猪细胞中的PRRSV抗原抗原（二）抗体检测（血清学方法）二）抗体检测（血清学方法） 细细胞胞培培养养显显微微镜镜，检检测测结结果果不不能能自自动动显显示示，不不适适合合大大规规模检疫，结果判定有一定的主观性。模检疫，结果判定有一定的主观性。1. 间接荧光抗体试验间接荧光抗体试验(IFA)特异性好，特异性好，4-6周才出现中和抗体，不适宜于早期诊断。周才出现中和抗体，不适宜于早期诊断。2. 2. 血清中和试验血清中和试验(SN)(SN)3.3.酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验(ELISA)(ELISA)六、防制六、防制 o 疫苗疫苗： 灭灭活苗活苗 灭灭活苗免疫猪后，可以刺激猪活苗免疫猪后，可以刺激猪产产生生针对针对ORF5、ORF6、ORF7所所编码编码的蛋白的蛋白的抗体，而且减少病毒血症的的抗体，而且减少病毒血症的发发生生，可有
