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1、Word文档只会菌株保藏可不行!还缺这一步!定期检查菌种保藏效果,有污染或退化迹象时,要准时分别纯化复壮。每次检查要有具体记录。 (一)复核的定义 对保藏的各类微生物菌种,在接收和保藏过程中,为保证菌种质量而对鉴定结果进行的核查。包括对菌种活性、纯度、稳定性等的检测,以及采纳最新分类学观点对分类地位发生变化的菌种的重新鉴定。 (二)复核菌株的基本信息 复核记录应标明所复核菌株的以下基本信息:保藏中心名称、保藏方式、菌株保藏编号、菌株名称(原定名)、复核日期、复核内容及结果(所进行的试验项目及各项试验结果)、复核结论、复核人员姓名、中心负责人签字以及需要补充说明的有关内容。 (三)存活性检测 微
2、生物菌株复核时有必要进行存活性检测。该项检测应将采纳不同保藏方法保存的培育物接种于适当的培育基,在合适的条件下培育,检查其保藏后的生长状况,确定适用的长期保藏技术方法。 (四)纯度检测 微生物菌种复核时必需进行纯度检测。规定以下两种检测方法同时进行。 1.显微镜观看 全部的细胞个体形态相像,染色反应全都或与原纯菌的描述全都。 2.培育并确认 将培育物制成悬液,重新倾注平板,或平板划线培育后,所形成的全部菌落形态全都或相像。 (五)复核鉴定 1.细菌的复核鉴定 针对详细类群,从以下几个方面选择有代表性、鉴别性的特征特性进行复核鉴定。 (1)显微形态观看 如细胞外形、鞭毛、芽孢以及放线菌的菌丝、孢
3、子丝和孢子的观看;革兰氏染色和抗酸染色反应等。 (2)培育特性 水溶性色素和非水溶性色素的观看,其他特定培育基上特征的观看。 (3)细胞化学组分分析 对于放线菌和部分高G+C含量革兰氏阳性细菌应对细胞壁化学组分进行必要的分析。 必要时进行序列测定。 2.酵母菌的复核鉴定 对于多数常用或常见的酵母菌,可依据表型信息对鉴定结果的正确性进行核查。 (1)培育特性 菌落质地、颜色、高度、生长速度、对温度的适应范围等。 (2)显微形态观看 如细胞大小和形态、无性繁殖方式、假菌丝形成与否;有性生殖方式、子囊孢子或担孢子的形态特征。 (3)生理生化特征 可采纳商业化的生化鉴定系统,或通过手工配制生理生化特性鉴定培育基,检测菌种的生理生化特性。 必要时进行序列测定。当需复核的菌种缺少序列测定数据时,应将测定26S rDNA D1/D2和ITS区的碱基序列作为复核鉴定的内容之一。 3.霉菌的复核鉴定 霉菌的复核鉴定主要依据不同分类群的培育特征和显微形态特征。 (1)培育特性 菌落(菌丛)质地、颜色、菌落反面的颜色、生长速度、气生菌丝高度、对温度的适应范围、色素的产生状况。 (2)养分体细胞的构造 显微镜观看养分体细胞的构造。 (3)无性生殖或(和)有性生殖特征 显微镜观看无性生殖或(和)有性生殖特征。 4