七叶皂苷钠可通过上调水通道蛋白-4的表达抑制脂多糖诱导的血管内皮炎症损伤

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1、 七叶皂苷钠可通过上调水通道蛋白-4的表达抑制脂多糖诱导的血管内皮炎症损伤 摘要目的探讨七叶皂苷钠(SA)对脂多糖(LPS)诱导的血管内皮损伤致炎症作用及机制。方法IMDM培养基(含10%胎牛血清)体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测0.4、1.6和6.4 g/ml的SA对HUVEC的毒性,采用2.5 g/ml和作用时间为6 h的LPS构建炎症损伤细胞模型。实验分组为空白组、模型组(2.5 g/ml LPS)、低剂量组(2.5 g/ml LPS+0.4 g/ml SA)、中剂量组(2.5 g/ml LPS+1.6 g/ml SA)和高剂量组(2.5 g/m

2、l LPS+6.4 g/ml SA)。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组细胞白细胞介素(IL)-6的表达水平;实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组细胞中水通道蛋白-4(AQP4)的mRNA表达量;蛋白质印迹法(Western blot)和免疫荧光检测各组细胞中AQP4蛋白表达量。两组间比较采用非成对t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果CCK-8检测结果表明,0.4、1.6和6.4 g/ml的SA作用6 h后的细胞活性百分数与空白组比较,差异无统计学意义(91.8673.758、93.6954.638、95.8385.558比100.0000.000,F2.946,P0

3、.05)。IL-6的ELISA检测结果显示,低、中、高剂量组中IL-6的相对表达量均低于模型组(1.2240.017、1.1190.155和1.0090.012比1.2810.075,F5.673,P0.05);RT-qPCR结果显示,低、中、高剂量组中AQP4 mRNA的相对表达量均高于模型组(0.7700.013、0.8540.014和0.8950.014比0.7130.015,F102.237,P0.01);Western blot结果显示,低、中、高剂量组中AQP4蛋白相对表达量均高于模型组(0.7580.084、0.7740.079和0.9250.033比0.6680.132,F4.283,P0.05)。结论SA能抑制LPS诱导的HUVEC损伤及炎性因子表达,其机制很可能与上调细胞内AQP4表达有关。 -全文完-

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