《Ki67、PD-L1与非小细胞肺癌患者临床病理特征及预后的关系分析》由会员分享，可在线阅读，更多相关《Ki67、PD-L1与非小细胞肺癌患者临床病理特征及预后的关系分析（6页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、Ki67、PD-L1与非小细胞肺癌患者临床病理特征及预后的关系分析2019年浙江省癌症中心发布2015年浙江省肿瘤登记地区恶性肿瘤发病与死亡分析1,结果显示肺癌的发病率和致死率均居榜首,是浙江省肿瘤防治的重中之重。非小细胞肺癌占所有原发性肺癌的80%85%,发病患者多为老年人,确诊时大多已处于中晚期,且肿瘤的转移率、复发率高2,3。免疫检查点靶向治疗NSCLC是当前的研究热点,疗效显著,能延长患者生存期4,5,6。PD-L1是PD-1最主要的配体之一,主要表达于免疫淋巴细胞、恶性肿瘤细胞、巨噬细胞等7,8。细胞核相关抗原Ki67是一种与细胞增殖相关的蛋白,除G0期外,在整个细胞周期中均有表达,
2、可用于反映肿瘤细胞所处周期和增殖状态,与肿瘤的增殖、转移及预后关系密切9。当前,NSCLC的靶向治疗通常以PD-L1、Ki67、CTLA-4等靶点为主10,11,12。本研究通过检测浙江省立同德医院收治的90例NSCLC患者病理组织标本中PD-L1和Ki67的表达,探讨PD-L1、Ki67与NSCLC患者临床病理特征及预后的关系,为临床治疗提供参考。1、资料与方法1.1一般资料选取2017年11月2018年11月浙江省立同德医院收治的90例NSCLC患者。收集其临床资料,包括年龄、性别、病理分型、肿瘤直径、肿瘤分化程度、淋巴结转移、临床分期等。其中,男性54例,女性36例;年龄2683岁,平均
3、(60.6710.87)岁;临床分期:期15例,期19例,期32例,期24例。纳入标准:符合中国原发性肺癌诊疗规范(2015年版)13NSCLC的诊断标准。排除标准:术前接受过放化疗;有免疫系统疾病;正在接受免疫相关治疗的患者;临床资料、个人信息不全者。本研究经医院伦理委员会批准,患者或家属均知情同意并签署知情同意书。1.2研究方法1.2.1HE染色HE染色观察肺组织病变。所有手术切除标本经10%甲醛固定、石蜡包埋、连续切片(厚约4m)、脱蜡水化。苏木精染色8min,自来水冲洗至返蓝后盐酸酒精分化,伊红染色1min、放入TO型生物制片透明剂中10min,中性树胶封片,光镜下观察。1.2.2免疫
4、组织化学法免疫组织化学SP法检测肺癌组织中PD-L1和Ki67的表达。相关操作均严格按照试剂盒说明书进行,切片3%H2O2修复后加入一抗兔抗人PD-L1和鼠抗人Ki67,37孵育30min。PBS冲洗3次,加入二抗,37孵育30min,DAB显色。设已知阳性片和阴性对照,HE染色作组织学对照。单克隆抗体购自德国默克公司。免疫组织化学染色试剂盒、DAB显色剂购自北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司。1.2.3结果判定由2位病理医师进行结果判定。阳性细胞数5%为PD-L1或Ki67阳性,无染色或阳性细胞数25%为高表达。1.2.4随访随访时间截至2019年11月30日。通过电话、信函和查阅医院病案记录
5、等方式随访。所有患者具有完整随访资料。1.3统计学方法数据分析采用SPSS19.0统计软件,计数资料以率(%)表示,比较采用2检验;影响因素的分析采用多因素Logistic回归模型;Kaplan-Meier法绘制生存曲线,比较采用Log-rank2检验,P0.05为差异有统计学意义。2、结果2.1NSCLC患者肺组织中PD-L1、Ki67的表达HE染色结果显示,NSCLC患者肺组织中细胞较小,细胞核深染,细胞核质比增加,细胞呈弥散状排列(图1A)。免疫组织化学染色结果显示,PD-L1主要表达于细胞膜(图1B),Ki67主要表达于细胞核(图1C)。90例NSCLC患者中,PD-L1阳性62例(6
6、8.89%),阴性28例(31.11%);Ki67阳性58例(64.44%),阴性32例(35.56%)。图1NSCLC患者肺组织HE和免疫组织化学染色2.2PD-L1、Ki67与NSCLC患者临床病理特征的关系不同病理分型、肿瘤分化程度、淋巴结转移患者的PD-L1阳性率比较,经2检验,差异均有统计学意义(P0.05)。鳞癌、低分化、淋巴结转移患者PD-L1阳性率较高。不同性别、病理分型、肿瘤分化程度患者的Ki67阳性率比较,经2检验,差异均有统计学意义(P0.05)。女性、鳞癌、低分化患者Ki67阳性率较高。见表1。2.3NSCLC患者PD-L1、Ki67高表达的影响因素分析PD-L1高表达
7、的影响因素时,以PD-L1为因变量,病理分型、肿瘤分化程度、淋巴结转移为自变量,进行多因素Logistic回归分析;分析Ki67高表达的影响因素时,以Ki67为因变量,性别、病理分型、肿瘤分化程度为自变量,进行多因素Logistic回归分析。鳞癌、腺癌及其他病理分型分别赋值为0、1、2;低、中、高分化分别赋值为0、1、2;有无淋巴结转移分别赋值为0和1;男性和女性分别赋值为0和1。结果显示,病理分型OlR=2.716(95%CI:1.695,3.375)、肿瘤分化程度OlR=3.655(95%CI:1.737,8.096)、淋巴结转移OlR=3.054(95%CI:1.542,4.116)是P
8、D-L1高表达的影响因素;性别OlR=2.857(95%CI:1.609,4.641)、病理分型OlR=6.171(95%CI:1.613,9.675)、肿瘤分化程度OlR=2.282(95%CI:1.704,2.957)是Ki67高表达的影响因素。见表2。2.4PD-L1、Ki67与NSCLC患者预后的关系90例NSCLC患者中,失访6例,死亡38例。PD-L1阳性患者2年生存率(48.39%)低于PD-L1阴性患者(78.57%)(2=7.204,P=0.007)。其中PD-L1阳性患者的中位生存时间为42周,PD-L1阴性患者为65周,经Log-rank2检验,差异有统计学意义(2=5.
9、672,P=0.011)。Ki67阳性患者2年生存率(48.27%)低于Ki67阴性患者(75.00%)(2=6.037,P=0.014)。其中Ki67阳性患者的中位生存时间为41周,Ki67阴性患者为66周,经Log-rank2检验,差异有统计学意义(2=8.504,P=0.008)。见图2、3。表1不同临床病理特征患者的PD-L1、Ki67阳性率比较表2NSCLC患者PD-L1、Ki67高表达的多因素Logistic回归分析参数图2PD-L1阳性与阴性患者的生存曲线图3Ki67阳性与阴性患者的生存曲线3、讨论NSCLC是原发性肺癌的主要类型,约75%患者在发病时已处于中晚期,大多已错过最佳
10、手术时机14。不同人种、地区、民族之间存在基因的差异性表达。如东亚人和西方人在某些基因的表达上存在差异15。PD-L1是一种跨膜糖蛋白,在病理状态下通过与其受体PD-1结合,抑制免疫T淋巴细胞的活化和增殖,参与肿瘤免疫逃逸,促进恶性肿瘤的发生、发展16。Ki67是一种细胞增殖标志物,属于非组蛋白,对蛋白酶敏感性极高,其水平变化会引起信号转导异常,从而参与肿瘤发生、发展过程17。本研究纳入的NSCLC患者肺癌组织中细胞较小,细胞核深染,细胞核质比增加,细胞呈弥散状排列。PD-L1主要表达于细胞膜,阳性表达率为68.89%。Ki67主要表达于细胞核,阳性表达率为64.44%。与其他研究结果大致相似
11、18,19。以上结果表明,NSCLC患者肺癌组织中存在PD-L1和Ki67高表达。本研究结果显示,NSCLC患者的病理分型、肿瘤分化程度、淋巴结转移是PD-L1高表达的影响因素。鳞癌患者PD-L1阳性率高于腺癌和其他分型患者,与吴鸿念等20的研究结果一致。低分化患者PD-L1阳性率高于高、中分化患者;淋巴结转移患者PD-L1阳性率高于无淋巴结转移患者,这可能与PD-L1抑制CD4+和CD8+T细胞的活化和增殖有关21。此外,NSCLC患者的性别、病理分型、肿瘤分化程度是Ki67高表达的影响因素。男性患者Ki67阳性率高于女性;低分化患者Ki67阳性率高于高、中分化患者,说明Ki67可能与雌激素
12、的分泌、细胞增殖活跃程度有关22。鳞癌患者Ki67阳性率高于腺癌和其他分型患者,与单彬彬等23的研究结果一致。本研究结果显示,PD-L1阳性患者2年生存率(48.39%)低于PD-L1阴性患者,PD-L1阳性患者的中位生存时间为42周,低于PD-L1阴性患者的65周,说明PD-L1的表达与患者预后有关。Ki67阳性患者2年生存率(48.27%)低于Ki67阴性患者,Ki67阳性患者的中位生存时间为41周,低于Ki67阴性患者的66周,说明Ki67的表达与患者预后有关。PD-L1、Ki67对NSCLC患者生存率和生存期的估计具有一定指导意义。综上所述,NSCLC患者肺癌组织中存在PD-L1和Ki
13、67高表达。NSCLC患者的病理分型、肿瘤分化程度、淋巴结转移与PD-L1高表达有关;NSCLC患者的性别、病理分型、肿瘤分化程度与Ki67高表达有关。PD-L1、Ki67阳性患者预后较差。参考文献：1王悠清,李辉章,龚巍巍,等.2015年浙江省肿瘤登记地区恶性肿瘤发病与死亡分析J.中国肿瘤,2019,28(1):12-22.2王川丽,王俊峰.UCH37与非小细胞肺癌患者预后的相关性研究J.中国现代医学杂志,2019,29(5):35-39.4魏丹凤,郭元彪,王战豪,等.四川地区非小细胞肺癌患者EGFR基因突变分型与临床病理特征的相关性分析J.临床肿瘤学杂志,2018,23(10):915-9
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