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A粗糙脉胞菌顺序四分子分析杂交B植物染色体组型分析v说课材料

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A粗糙脉胞菌顺序四分子分析杂交B植物染色体组型分析v说课材料_第1页
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单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版副标题样式*1.粗糙脉胞菌顺顺序四分子 分析(杂杂交).植物染色体组组型分析.粗糙脉胞菌顺顺序四分子分析(杂杂交)实验目的:l1.了解粗糙脉胞菌的生活周期及特性;l2.学习粗糙脉胞菌的培养方法和杂交技术;l3.学习顺序四分子的遗传学分析方法,进行有关基因与着丝点距离的计算和作图第八周)粗糙脉胞菌(粗糙链孢霉)l真菌门、子囊菌纲、球壳目、脉孢菌属l菌丝为单倍体n=7无性孢子分生孢子有性孢子子囊孢子粗糙脉胞霉的遗传(n=7) 有性生殖过程: +、-接合型菌丝接合受精在子囊果的子囊菌丝细胞中形成二倍体合子(2n)减数分裂形成4个单倍的子囊孢子(四分孢子)有丝分裂形成8个子囊孢子、按严格顺序直线排列在子囊内脉胞菌减数分裂的4个产物保留在一起,称为四分子(子囊的外形狭窄,以致分裂的纺锤体不能重叠,只能纵立于长轴中,所有分裂后的核8个子囊孢子都从上到下顺序排列)顺序四分子四分子分析:对四分孢子进行遗传分析,通过四分子观察,可直接观察其分离比例,检验其有无连锁实验材料1粗糙链孢霉野生型菌株,Lys+(分生孢子粉红色);2粗糙链孢霉赖氨酸缺陷型菌株,Lys-(分生孢子白色)。

实验步骤1菌种活化:l为使菌种生长得更好,先要进行菌种活化把野生型和赖氨酸缺陷型菌种从冰箱中取出,分别接在两支完全培养基试斜面上,28温箱培养5天左右培养到菌丝的上部有分生孢子产生2杂交:l()同时在杂交培养基上接种两亲本菌株的分生孢子或菌丝(先接缺陷型,后接野生型),然后在培养基上放入一灭菌的折叠滤纸,25温箱进行混合培养l注意要贴上标签,写明亲本菌株、杂交日期、自己的名字记号笔写在试管上)l在杂交后5-7天就能看到许多棕色的原子囊果出现,以后原子囊果变大变黑成子囊果,在约21天左右,就可在显微镜下观察实验步骤接种环的制作酒精灯灯芯的制作无菌操作技术练习实验预期结果:l实验用赖氨酸缺陷型(Lys-)与野生型(Lys+)杂交,得到的子囊孢子分离为4个黑色的(+)和4个灰色的(-)l黑色孢子是野生型,而赖氨酸缺陷型孢子成熟迟,在野生型孢子成熟变黑时,还未变黑,而呈浅灰色l根据黑色孢子和灰色孢子在子囊中的排列顺序,可知合子在减数分裂时,基因和着丝粒之间发生交换的情况注意事项:l观察子囊孢子时,要掌握适当的时期如果时间偏早,虽有子囊,但孢子均未成熟,无论野生型还是缺陷型都显灰色;l过迟都成熟了,全为黑色,都不能分辨子囊类型;l最好在子囊果发育至成熟大小,子囊壳开始变黑时,每日取几个子囊果压片观察,到合适时期置于45冰箱保存。

从一个脉孢霉子囊壳来的子囊照片 一对等位基因(野生型和突变型)通过减数分裂所产生的子囊孢子的分离和有序排列方式.植物染色体组组型分析 实验目的:l1.了解染色体组型分析原理及各项参数的意义;l2.学习染色体组型分析的方法实验原理:l染色体组型分析(核型分析)就是分析细胞中染色体的数目、大小、形态、着丝点的位置以及次缢痕、随体的有无等形态特征,并用表格、图示将这些特点展示出来l染色体的形态以有丝分裂中期最为显著,所以一般都分析该时期的染色体l另一类是分析减数分裂(粗线期)时期的染色体数目和形态,以得到染色体组型 核型分析通常包括两方面的内容:lA. 确定一物种的染色体数目lB. 辨析每条染色体的特征染色体组型分析常用指标:1. 染色体数目:l一般以体细胞染色体数目为准,至少统计510个个体、30个以上细胞的染色体数目为宜,在个体出现不同数目时,则应该如实记录其变异幅度和各种数目的细胞或百分比,而以众数大于85%者为该种类的染色体数目A. 确定一物种的染色体数目染色体的排列原则:l染色体的大小(即长度)l着丝粒的位置l特殊标记,如随体的有无B. 辨析每条染色体的特征 用碱性染料对染色体进行染色,当两个臂被染色时,着丝点不着色,在光镜下,好象染色体在此区域是中断的。

于是又称着丝粒区域为主缢痕(初级缢痕)(primary constriction)B-染色体次缢痕随体B-染色体染色体组型分析常用指标:2. 染色体绝对长度:以微米表示,可在显微镜下通过测微尺测量,也可在放大的照片上进行,然后按下面公式计算:放大的染色体长度(mm)放大倍数 1000绝对长度(m) =绝对长度往往不稳定!染色体组型分析常用指标:3. 相对长度:以百分数表示,即:相对长度(%)=待测的单个染色体长度整套染色体组的总长度 100整套染色体组的总长度 = 该细胞单倍体全部染色体长度(包括性染色体)之和eg: 大麦 2n=14, n=7染色体组型分析常用指标:4. 染色体长度比:l指核型中最长染色体与最短染色体的比值,即:染色体长度比=最长染色体最短染色体 可以简写为Lt/Ls,这一数值在核型分析中是衡量核型不对称程度的主要指标之一染色体组型分析常用指标:5. 臂比值:l指长臂和短臂的长度(分别量到着丝点中部)比值,即:臂比值=长臂短臂(精确到0.01)染色体组型分析常用指标:6. 着丝点位置:l根据臂比值可将染色体分成以下几种类型:臂比值与着丝点位置的关系染色体组型分析常用指标:7. 次缢痕及随体l次缢痕的有无及位置,随体的有无、形状和大小都是重要的形态指标,也应仔细观察记载。

l带随体的染色体用SAT或星号“*”标记实验步骤:1.将洗印好的显微摄影照片上的每条染色体进行随机编号2.测量每一条染色体的长臂、短臂长度(mm)随体长度可计入染色体全长,需标注带随体染色体的编号3.计算每一条染色体的长度(放大照片上长度:mm)及臂比值4.根据染色体长度和臂比值进行同源染色体配对随体是一个重要参数,正常细胞中的某对同源染色体要么都带随体,要么都不带随体实验步骤:5.计算同源染色体中两条染色体长、短臂及总长的平均值,并把换算成相对长度,填表(P82)6.根据长、短臂的长度计算臂比值,并根据臂比值确定该染色体的类型7.根据照片上编号及同源染色体配对情况,剪下染色体,按从长到短的顺序排列,一对一对地短臂向上、长臂向下,各染色体的着丝点在一条直线上,贴成一完整的染色体组型图如果染色体全长相等,在按短臂长度顺序排列,长者在前性染色体或染色体一律排列在最后染色体核型分析系统 系统配置:三目生物显微镜CCD摄像机高性能计算机图文报告诊断软件分体式控制台(选配)实验结果及思考题1. 完成实验所提供的植物染色体组型分析图(大麦有丝分裂中期染色体),包括染色体组型图和数据表2. 为什么要用相对长度来表示染色体的长度?核型分析的意义?3. 杂交实验的注意事项?下周实验:果蝇的形态、生活周期及其饲养染色体组型反映了物种染色体水平的整体特征,研究和比较物种的染色体组型可以确定物种本身的遗传学特征,有助于对物种亲缘关系进行判断和分析,揭示遗传进化的过程和机制。

组型分析也是分析生物染色体数目和结构变异的基本手段,在染色体识别与鉴定中也起着重要作用,植物细胞分类学、细胞地理学、遗传育种学等都是以组型分析为基础的安徽省立医院发现的7例染色体异常核型被确认为世界首报染色体异常核型,将被录入新版的中国人类染色体异常核型数据库 新华网长春2005年8月14日电 ,经中国医学遗传学国家重点实验室确认,长春市一男性第3号和第13号染色体异常核型为全球首次发现,将被录入中国人类染色体异常核型数据库,国际上已决定把这个病例作为攻关课题进行研究 他的第3号和第13号染色体是经过断裂、重接而成的两个新的染色体,在医学上被称为染色体平衡易位,属于人类异常染色体核型正是这对新染色体使他形成了异常精子,导致妻子自然流产虽然该男性为染色体平衡易位携带者,没有基因丢失,外貌、智力都是正常的,发育上也没有任何缺陷,但是在正常受孕条件下生育正常后代的几率仅为118,后代染色体异常的几率为118,其余则为流产、死胎或畸胎这一发现不仅丰富了人类染色体异常核型项目库,更重要的是,对遗传学的临床研究和优生优育具有重要的现实意义人体细胞染色体总数为46条、23对异常染色体核型一种可能是从父母遗传过来的,还可能是在配子形成或早期卵裂的过程中发生了畸变。

大量接触农药、化学毒物、放射性物质、生物病毒等有害物质,是发病的一个重要原因但调查发现该男子并没有有毒物质接触史和放射线接触史。

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