《液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍教学提纲》由会员分享，可在线阅读，更多相关《液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍教学提纲（16页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍 资料收集：生化 多肽- 5988-6316EN升温对于反相 HPLC分离强疏水肽的影响 (B27)Polypeptide流动相: A: 含0.05%三氟乙酸的水B: 含0.05%三氟乙酸的乙腈2% B / min进样量: 100L (50g的6M脲/5%乙酸)UV: 210 nm流速: 1 mL/min室温液相色谱柱: ZORBAX StableBond-C18色谱柱尺寸: 4.6 x 250 mm 5m 室温300C400C500C600C700C提高柱温，可增加柱效（提高灵敏度）环保样品: 除草剂流动相: 52/48 0.1 M乙酸钠/甲醇, pH 6流速
2、: 0.45 mL/min温度: 40, 90检测: UV除草剂: 柱温的影响Herbicides: Effect of Column Temperature1. 西玛津2. 敌草隆3. 扑灭津4. 扑灭净5. 异丙甲草胺1. Simazine2. Diuron3. Propazine4. Prometryn5. etolachlor液相色谱柱: Zorbax StableBond-C18色谱柱尺寸: 4.6 x 150 mm, 5m4090提高柱温，可增加柱效（提高灵敏度）生物制药液相色谱柱: Zorbax StableBond-C8色谱柱尺寸: 150 mm, 5m减小毛细管内径来提高低浓
3、度样品的检测灵敏度Reducing Capillary ID to Improve Sensitivityfor Concentration-Limited Samples流动相: 60%乙腈/40%水流速: 内径 0.3 mm-4 uL/min内径 0.5 mm-10 uL/min内径 1.0 mm-50 uL/min内径 4.6 mm-1.0 uL/min温度: 室温检测器: UV 254 nm样品: 200 ng联二苯 (100 nl) 减小柱径，可增加柱效（提高灵敏度）色谱柱技术 5988-6454EN使用小体积色谱柱对于检测器响应时间的重要性 (TE32)液相色谱柱: ZORBAX
4、StableBond-C18色谱柱尺寸: 4.6 x 15 mm 3.5m流动相: 乙腈: 1%甲酸=32: 68UV: 254 nm流速: 1.0 mL / min. 30C进样量: 5 L响应时间: 4.0秒响应时间: 2.0秒响应时间: 1.0秒响应时间: 0.5秒响应时间: 0.1秒1.尿嘧啶2.乙酰水杨酸3.N-乙酰苯胺1.Uracil2.Acetylsalicylic acid3.Acetanilide缩短检测器响应时间，可增加柱效 （提高灵敏度）色谱柱技术 ：不同硅胶类型比较 (TE1)流动相: 含0.05%甲醇的二氯甲烷 液相色谱柱1.toluene2.benzanilide3
5、.phenol4.benzyl alcoholZorbax SilSpherisorbZorbax Rx-Sil1.甲苯2.N-苯甲酰苯胺3.苯酚4.苯甲醇使用高纯硅胶，可增加柱效（提高灵敏度）有机化学 5988-6366ENpH对苯胺取代物分析的影响 (ORCH1)流动相25mM磷酸: 甲醇=58: 42 流速: 1 mL/min 22C液相色谱柱: ZORBAX StableBond-C18色谱柱尺寸: 4.6 x 150 mm 5m1.对位甲氧基苯胺2.间位苯甲胺3.3-氨基-苯甲腈4.对位氯苯胺5.间位氯苯胺6.邻位氯苯胺pH: 2.5pH: 7.0改变流动相pH，可增加柱效（提高灵敏
6、度）生化 肽 5988-6293EN三氟乙酸浓度对于反相肽的分离的影响 (B10)Peptide流动相: A: 水和三氟乙酸B: 乙腈和三氟乙酸0 - 30% B （30 min.内）流速: 1 mL/minUV: 254 nm进样量: 6uL十肽菌素标样S1-S5（疏水性有略微差异）40C液相色谱柱: ZORBAX 300 SB-C8色谱柱尺寸: 4.6 x 150 mm 5m1.0%三氟乙酸0.05%三氟乙酸0.25%三氟乙酸改变流动相pH，可增加柱效（提高灵敏度）食品分析 5988-6360EN流动相强度对单糖和二糖分离的影响 (FD4)流动相: 乙腈/水如图流速: 1 mL/min示差
7、折光检测器液相色谱柱: ZORBAX NH2 色谱柱尺寸: 4.6 x 250 mm 5m1.果糖2.葡糖3.蔗糖4.Palatinose5.海藻糖6.异麦芽糖乙腈/水70/30 乙腈/水75/25 改变有机相%，可增加柱效（提高灵敏度）色谱柱技术 5988-6468EN有机改性剂和pH对于选择性的影响 (TE5)流动相: 25 mM磷酸缓冲液流速: 1.0 mL/min.22C液相色谱柱: ZORBAX StableBond-CN色谱柱尺寸: 4.6 x 150 mm 5m1.anisidine2.m-toluidine3.4-cl-aniline4.3-aminobenzonitrile5
8、.3-cl-aniline6.2-cl-aniline1.甲氧基苯胺2.间位苯甲胺3.4-氯-苯胺4.3-氨基苯甲腈5.3-氯-苯胺6.2-氯-苯胺42%甲醇 ：58%缓冲液 30%甲醇 ：70%缓冲液pH 2.6pH 3.0改变有机相%，可增加柱效（提高灵敏度）色谱柱技术 5988-6453ENZORBAX Eclipse系列色谱柱的选择性 (TE31)液相色谱柱: ZORBAX Eclipse XDB-Phenyl色谱柱尺寸: 4.6 x 150 mm 5m流动相: 甲醇 : 水=70: 30UV: 254 nm流速: 1.0 mL / min.室温Zorbax Eclipse XDB-苯
9、基Zorbax Eclipse XDB-C8Zorbax Eclipse XDB-C181.尿嘧啶2.苯酚3.4-氯-硝基苯4.甲苯5.萘1.Uracil2.Phenol3.4-Cl-nitrobenzene4.Toluene5.Naphthalene改变键合相，可增加柱效（提高灵敏度）生物制药液相色谱柱: Zorbax Extend-C18色谱柱尺寸: 2.1 x 150 mm, 5um三氟乙酸和氢氧化铵用于肽类RP-HPLCESI-MS分离的选择性比较Selectivity Comparison of TFA and NH4OH for Peptide RP-HPLCESI-MS Anal
10、ysis流速: 0.25 mL/min. 温度: 25 梯度: 5-60% B in 20 min.LC/MS: 正离子, ESI- Vf 70V, Vcap 4.5 kV, N2- 35 psi, 12 L/min., 300样品: 4L (各50 ng)三氟乙酸条件: A- 0.1%三氟乙酸水溶液B-0.085%三氟乙酸 80%的乙腈溶液NH4OH条件: A- 20 mM NH4OH水溶液B- 20 mM NH4OH 80%的乙腈溶液改变有机添加剂，可增加柱效（提高灵敏度）生化 肽 十肽菌素 5988-6299EN酸对于反相肽的分离的影响(B16)decapeptide液相色谱柱: ZOR
11、BAX 300 SB-C8 色谱柱尺寸: 4.6 x 150 mm 5m1.十肽菌素 S12.十肽菌素 S23.十肽菌素 S34.十肽菌素 S45.十肽菌素 S51.decapeptide S1 2.decapeptide S2 3.decapeptide S3 4.decapeptide S4 5.decapeptide S50.1% 三氟乙酸0.025 M H3PO4改变有机添加剂可增加柱效（提高灵敏度）流动相: A: 含相应的酸的水相 B: 含相应的酸的乙腈 0%-30% B（30 min.内）进样量: 6L肽标样UV: 254 nm流速: 1 mL/min40C色谱柱技术 流动相对色谱
12、的影响(TE40)液相色谱柱: ZORBAX Eclipse XDB-C8色谱柱尺寸: 4.6 x 50 mm 3.5mUV: 254 nm流速: 1 mL/ min.室温1. Uracil2. Butylparaben3. Naphthalene4. Dipropylphthalate5. Acenaphthene1. 尿嘧啶2. 尼帕尔金丁酯3. 萘4. 二丙基邻苯二甲酸酯5. 苊刻度混合: Dial-a-Mix A: 水 B: 甲醇, 用泵抽取50% B体积比混合: Vol/Vol250 mL水 + 250 mL甲醇, 用泵抽取100%混合液定容混合: Mix-to-Mark 250 mL甲醇, 用水定容至500 mL, 用泵抽取100%混合液预混合（重量比混合）: Premixed (w/w) 200 g甲醇 + 200 g水, 用泵抽取100%混合液改变流动相配比方式，可增加柱效（提高灵敏度）谢谢观看！谢谢观看！资料收集：
