《第五章化学发光分析教学教案》由会员分享,可在线阅读,更多相关《第五章化学发光分析教学教案(21页珍藏版)》请在金锄头文库上搜索。
1、第五章 化学发光分析 什么是化学发光(chemiluminescence)? 化学发光是某种物质分子吸收化学能而产生的光辐射。根据化学发光的强度测定物质含量的分析方法叫化学发光分析。1、不需光源,避免了杂散光的干扰;2、检测灵敏度高;3、仪器设备简单、操作简便。 特点:BPCLB. 敏化化学发光反应:是指某些化学反应中的由于激发态产物本身不发光或发光十分微弱,但通过加入某种能量接受体(荧光剂)可导致发光。常见的化学发光体系1、鲁米诺化学发光体系n根据所用的氧化剂不同,Luminol体系又可以分为不同的反应体系,如:Luminol-H2O2体系、Luminol-KMnO4体系、Luminol-I
2、2体系、Luminol-KIO4体系和Luminol-K3Fe(CN)6体系等。其中,应用最为广泛的是Luminol-H2O2体系。CL systemAnalyteDetection limitLuminol-H2O2-HRPH2O24 MLuminol-H2O2-HRPH2O28 MLuminol-H2O2-HRPFe (II)0.5 pMLuminol-H2O2-HRPCu (II)1.5 g/LLuminol-H2O2-HRP(CE/FIA)Co (II)0.5 pMLuminol-H2O2-quinineCr (VI)1.2 mMLuminol-H2O2-EDTACr (III)0.1
3、6 fMLuminol-H2O2Ag (I)270 nMLuminol-H2O2-SnCl2Hg (II)0.8 g/LLuminol-H2O2-Cu(LC)阿米卡星50 g/LLuminol-H2O2 (FIA)雌激素51 nMLuminol-H2O2 (FIA)卡托普利2 g/LLuminol-H2O2 (FIA)甲状腺激素27 g/mLLuminol-H2O2 (SIA)烷基苯磺酸酯类70 pM2、过氧化草酸酯化学发光(PO-CL)体系 3、吖啶酯CL体系 4、碱性磷酸酯酶(ALP)化学发光体系nALP能够催化磷酸单酯、磷酸核苷以及磷酸糖类等的水解,在释放磷酸盐的同时,生成相应的醇、酚或胺。nALP应用最为广泛的底物为金刚环氧磷酸(AMPPD)。 AMPPD在碱性条件下,被AP酶解生成相当稳定的AMP-D阴离子,其有230min的分解半衰期,发出波长为470nm的持续性光,在15min时其强度 达到高峰,1560min内光强度保持相对稳定。示例:化学发光免疫分析化学发光免疫分析