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1、第十章 革兰氏阴性需养杆菌内容提要* 第一节 布氏杆菌属 第二节 假单胞菌属 第三节 波氏菌属 第四节 军团菌属 第五节 弗朗西斯菌属 第六节 摩拉菌属 第七节 不动杆菌属第一节 布氏杆菌属(Brucella)布氏杆菌（布鲁氏菌）布氏杆菌病（人兽共患病）一、形态及染色特性* 呈球杆形或短杆形，单在，革兰氏阴性菌* 柯兹罗夫斯基或改良Z-N、改良K氏染色红色布鲁氏菌染色照片* 染料（沙黄、孔雀绿）迟染的特性二、培养及生化特性血液肝汤琼脂：形成灰白色菌落，不溶血* 细菌专性需氧，初代分离（5-10 CO2）* 血清、血液、肝汤、葡萄糖促进生长* 初分离生长缓慢（7-14天），传代（2-3天）* 菌
2、落有光滑(S)型、粗糙（R）型和黏液(M)型肝汤肉汤：轻度混浊、粘稠沉淀物血清肝汤琼脂：无色透明、湿润、闪光的小菌落四、抗原性* 细胞壁低蛋白含量的脂多糖复合物A抗原与M抗原：* 抗原决定簇位于细胞壁的脂多糖蛋白复合物上* 光滑型布氏杆菌具有A和M两种表面抗原R抗原：* 非光滑型布氏杆菌的共同抗原决定簇。包括 A、M 及 R抗原（表面抗原）属外抗原属内抗原六、抵抗力l 本菌对外界环境的抵抗力较强* 在污染的土壤和水中可存活1-4个月* 咸肉中40日，羊毛中1.5-4月* 皮毛2-4个月，乳、肉食品中约2个月，粪便中120dl 对湿热的抵抗力不强* 60-30min或70-5min即杀死、煮沸立
3、即死亡* 对消毒剂的抵抗力也不强七、致病性致病因子毒性较强的内毒素（细胞壁的脂多糖-LPS)l 引起人和多种动物（60多种）的布病* 一种重要的人兽共患病* 实验动物豚鼠（最易感）、小鼠和家兔等感染人羊布氏杆菌感染最多，其次猪布氏杆菌， 流产布氏杆菌最少。主要绵羊、山羊；另外牛、猪、鹿、骆驼、人等 马尔他布氏杆菌（羊布氏杆菌）主要牛、马、犬；另外也感染水牛、羊、鹿人等 流产布氏杆菌（牛布氏杆菌）主要猪； 另外也感染牛、羊、鹿、人等 猪布氏杆菌u易感动物：牛、羊、猪，其次马、鹿、骆驼。人 亦易感，家禽较少感染* 细菌在胞内寄生（肝、脾、骨髓、吞噬细胞等） 故治疗较难和彻底感染途径：主要消化道，其
4、次皮肤、粘膜、伤口、 生殖道。呼吸道较少感染。动物感染* 一般无明显临床症状，多属隐性传染* 病变多局限于生殖器官流产、睾丸炎、乳腺炎、子宫炎、关节炎等布氏杆菌病木乃伊胎儿（四月龄）布氏杆菌病 流产胎儿（7月龄），皮下水肿母猪子宫内死胎布氏杆菌病 流产胎盘，水肿及子叶出血、坏死八、微生物学诊断* 因表现为慢性或隐性感染 血清学检查变态反应检查细菌学检查流产1.细菌学检查病料流产胎儿胃内容物、流产胎盘和羊水、道分泌物染色镜检查革兰氏、柯兹洛夫斯基染色分离培养鉴定：2.血清学检查* 血清中布氏杆菌抗体检查* 病料中布氏杆菌检查3.变态反应检查反应强度时间（月份）1 2 3 4 5 6 7 8 9
5、1011 12凝集反应补体反应变态反应变态反应出现晚，不宜作早期诊断（山羊和绵羊）布氏杆菌水解素皮内发生红肿阳性反应第二节 假单胞菌属 (Pseudomonas)鼻疽假单胞菌 鼻疽假单胞菌惯称鼻疽杆菌，现称鼻疽伯氏菌属动物等单蹄兽鼻疽的病原、人兽共患病病原 无芽孢、无荚膜、不运动、单在、成对或成群的中等大小杆菌，革兰氏阴性。一、形态及染色特性第二节 假单胞菌属(Pseudomonas)鼻疽假单胞菌 鼻疽假单胞菌惯称鼻疽杆菌，现称鼻疽伯氏菌(Burkholderia mallei)为属动物（马、骡、驴）等单蹄兽鼻疽的病原，也能感染人、其他家畜和多种野生动物，为重要人兽共患病病原。此病可呈急性或慢
6、性经过，病变特征为皮肤、鼻腔黏膜、肺脏及其他实质器官形成小型的鼻疽结节和溃疡。 本菌为无芽孢、无荚膜、不运动、单在、成对或成群的中等大小杆菌，革兰氏阴性。一、形态及染色特性二、培养及生化特性 本菌为专性需氧菌，在普通培养基上生长缓慢，加入适量血红蛋白、甘油、血液、血清、葡萄糖等可促进生长。甘油肉汤：呈均匀轻度浑浊，并逐渐形成灰白色粘稠沉淀物，培养10-15d液面 形成菌膜。甘油琼脂：培养24h，形成灰白色乃至黄色有光泽的正圆形菌落，边缘整齐， 表面湿润粘稠，加入生长促进物质（血红蛋白等），则菌落直径 显著增大；血液琼脂中不溶血。 正常菌落为S型；变异型菌落为R型、皱襞型(C)、矮小型(D) 粘
7、液型(M)、伪膜型(P)等。三、致病性 本菌不产生外毒素而仅有耐热（120 ，1.5h）的内毒素。内毒素对健康动物毒性不强，但注射于感染鼻疽的动物，则可引起剧烈的病灶激发反应。自然条件下： 主要感染马属动物，驴和骡最易感，马较差；骆驼、犬、猫、狮、虎、狼、貂等均可感染。绵羊、山羊、猪、牛及鸽不感染。 实验动物：猫、仓鼠最易感，豚鼠其次。 人也感染，经创伤或吸入含菌材料（呼吸道）而感染。四、微生物学诊断 鼻疽的诊断和检疫主要采用变态反应检查和血清学检查，而细菌学检 查只有在特殊病例才被应用。1. 变态反应检查：患病动物较长时间（8-10年或终生）保持变态反应检查 阳性反应。检出急性、慢性、潜伏性
8、等。点眼反应最常用。 方法：鼻疽菌素3-4滴滴入被检动物一侧眼结膜囊内，分别于点眼后，3、 6、9、及24h观察反应。如眼结膜红肿并排除脓性分泌物，即为 阳性反应。2. 细菌学检查： 被检材料：未破溃脓肿采取的穿刺物、鼻汁、皮肤溃疡分泌物、病变组织 和 器官等。 分离培养：病料接种于1%血液甘油琼脂上分离培养；甘油肉汤增菌培养。 获纯培养物进一步鉴定。应注意该菌与类鼻疽杆菌相区别。 动物试验：接种于雄性豚鼠腹腔后，可引起典型的睾丸炎和睾丸周围炎， 睾丸肿胀化脓而破溃，称为Strauss反应具有一定的诊断价值。 3. 血清学检查： 以补体结合反应为主，但本方法对活动性鼻疽检出率较高，慢性病例 检出率低（10%-25%）。故本方法只能作为附加诊断方法。五、免疫防治 本病不会引起大流行，动物呈隐性感染，目前无可用菌苗进行免疫。 发现开放性鼻疽，采用扑杀办法予以淘汰。第十章 复习思考题 1.布氏杆菌属有哪些种和型，形态、染色及培养特点如何？2.试述布氏杆菌病的微生物学检疫诊断方法和免疫防治措施。3.试述鼻疽杆菌的主要微生物学特性和鼻疽的微生物学诊断方法。
