第1章组织学绪论Introduction of Histology 组织组织 学（histology） 研究机体微细结细结 构及其相关功能的科学 研究水平：组织组织 、细细胞、亚细亚细 胞和分子 （例：心脏脏）研究内容发展简史学习方法技术简介组织组织 学组织组织意义义图图1-3 组织组织 （tissue） 构成：细细胞群和细细胞外基质质 细细胞：机体结结构和功能的基本单单位，成人约约有1015 个、200 余种 细细胞外基质质：由细细胞分泌形成 类类型：上皮组织组织 、结缔组织结缔组织 、肌组组织织和神经组织经组织 组织组织 以不同的种类类、数量和方式组组合形成器官；若干功能相关的器官构成系统统研究内容发展简史学习方法技术简介组织组织 学组织组织意义义简简称光镜镜（light microscope，LM） 16 世纪纪末荷兰兰人发发明1665 年胡克命名“细细胞” 马马尔比基观观察了脾、肺、肾肾、表皮；列文虎克发现发现 红细红细 胞、精子、肌纤维纤维 ；格拉夫发现发现 卵泡1801 年比沙提出“组织组织 ”概念光学显显微镜镜细细胞学说说电电子显显微镜镜当代组组织织学研究内容发展简史学习方法技术简介 提出：施万、施莱登（1838、1839） 内容：细细胞是一切动动、植物体的基本结结构和功能单单位；细细胞内进进行着复杂杂的化学反应应；新细细胞由原有细细胞产产生光学显显微镜镜细细胞学说说电电子显显微镜镜当代组组织织学研究内容发展简史学习方法技术简介简简称电镜电镜 （electron microscope, EM） 发发明：1932 年 卢卢斯卡、科诺诺尔，使分辨率提高到 0.2nm 超薄切片术术（5080nm） 超微结结构（ultrastructure）：即细细胞膜、细细胞器、染色体等亚细亚细 胞结结构光学显显微镜镜电电子显显微镜镜当代组组织织学研究内容发展简史学习方法技术简介细细胞学说说 新仪仪器、新技术术的发发明和应应用 免疫组织组织 化学技术术、原位杂杂交技术术将组织组织 学引入分子水平 组织组织 工程学技术术拓展了组织组织 学的临临床应应用前景光学显显微镜镜电电子显显微镜镜当代组组织织学研究内容发展简史学习方法技术简介细细胞学说说 审视审视 角度 组织组织 水平：层层次顺顺序、特征性结结构和细细胞 细细胞水平：主要细细胞的分布、结结构特点（含重要细细胞的超微结结构）及功能 形态态和结结构相统统一 结结构是功能的基础础，功能是结结构的必然表现现 培养观观察能力：重视实习课视实习课 和图图像观观察 培养空间间思维维能力：将二维图维图 形还还原为为三维维构像研究内容发展简史学习方法技术简介 石蜡切片术术（paraffin sectioning）：取材、固定、脱水、包埋、切片（5 10 m 厚）、染色 苏苏木精- 伊红红染色法（hematoxylin-eosin staining， HE染色法）：苏苏木精为为碱性染料，使染色质质和核糖体着紫蓝蓝色；伊红为红为 酸性染料，使胞质质和细细胞外基质质着红红色 嗜酸性（acidophilia);嗜碱性(basophilia) 特殊染色光镜镜技术术电镜电镜 技术术组织组织 化学放射自显显影术术图图像分析研究内容发展简史学习方法技术简介图图5、6细细胞培养组织组织 工程图图4 透射电镜术电镜术 （transmission electron microscopy, TEM） 用于观观察组织细组织细 胞的超微结结构 戊二醛醛、锇锇酸双重固定树树脂包埋超薄切片（50 80nm 厚）电电子染色（醋酸铀铀、柠柠檬酸铅铅） 根据电电子束在不同结结构上被散射程度的差异表现为电现为电 子密度高（黑或深灰色）和电电子密度低（浅灰色）光镜镜技术术电镜电镜 技术术组织组织 化学放射自显显影术术图图像分析研究内容发展简史学习方法技术简介细细胞培养组织组织 工程图图7 扫扫描电镜术电镜术 （scanning electron microscopy, SEM） 用于观观察组织细组织细 胞表面结结构，具有真实实的立体感，无需制备备切片光镜镜技术术电镜电镜 技术术组织组织 化学放射自显显影术术图图像分析研究内容发展简史学习方法技术简介细细胞培养组织组织 工程图图8 组织组织 化学术术（histochemistry）为应为应 用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物学的原理和技术术，与组织组织 学技术结术结 合而产产生，在组织组织 切片显显示某种物质质的存在和分布状态态 分类类： 一般组织组织 化学术术 免疫组织组织 化学术术 原位杂杂交术术光镜镜技术术电镜电镜 技术术组织组织 化学放射自显显影术术图图像分析研究内容发展简史学习方法技术简介细细胞培养组织组织 工程 一般组织组织 化学术术：组织组织 中的某种结结构成分与所加试剂发试剂发 生化学反应应、并呈现现某种颜颜色，在显显微镜镜下可观观察到 糖类类： PAS（过过碘酸希夫）反应应，显显示多糖和糖蛋白，呈紫红红色 糖 多醛醛 品红红硫酸复合物 （希夫试剂试剂 ，无色）光镜镜技术术电镜电镜 技术术组织组织 化学放射自显显影术术图图像分析研究内容发展简史学习方法技术简介图图9细细胞培养组织组织 工程过过碘酸紫红红色反应产应产 物免疫组织组织 化学（immunohistochemistry） 根据抗原、抗体特异性结结合原理，检检测组织测组织 切片中的肽肽和蛋白质质 用标记标记 的抗体与组织组织 中的抗原结结合，标记标记 物可于显显微镜镜下观观察。
标记标记 物有荧荧光素（荧荧光显显微镜观镜观 察）、辣根过过氧化物酶（光镜镜或电镜观电镜观 察）、胶体金（多用于电镜观电镜观 察）光镜镜技术术电镜电镜 技术术组织组织 化学放射自显显影术术图图像分析研究内容发展简史学习方法技术简介细细胞培养组织组织 工程图图10-13原位杂杂交术术（in situ hybridization） 即核酸分子杂杂交组织组织 化学术术，检测检测基因（DNA片段）的有无、基因的表达活性（mRNA） 原理：用带标记带标记 物的已知碱基顺顺序的核酸探针针与细细胞内待测测核酸按碱基配对对原则进则进 行特异性原位结结合（杂杂交），并通过对标记过对标记 物的显显示而获获知待测测核酸的有无及相对对量 常用标记标记 物有放射性核素和地高辛光镜镜技术术电镜电镜 技术术组织组织 化学放射自显显影术术图图像分析研究内容发展简史学习方法技术简介图图14细细胞培养组织组织 工程 放射自显显影术术（autoradiography） 概念：通过过活细细胞对对某种放射性物质质的特异性摄摄入，以显显示该该物质质在组组织织和细细胞内的分布、含量和代谢过谢过 程，以反映细细胞的功能状态态 应应用举举例 用3H标记标记 的胸腺嘧啶嘧啶 核苷研究DNA合成和细细胞增殖状态态 用125I 观观察甲状腺滤滤泡内碘化部位光镜镜技术术电镜电镜 技术术组织组织 化学放射自显显影术术图图像分析研究内容发展简史学习方法技术简介图图15细细胞培养组织组织 工程 图图像分析术术（image analysis）又称形态计态计 量术术（morphometry）：应应用数学和统计统计 学原理对组织对组织 切片提供的平面图图像进进行分析，从而获获得立体的组组织细织细 胞内有形成分的数量、体积积、表面积积等参数，从量的角度显显示结结构与功能的关系 体视视学（stereology）：根据连续连续 的组织组织 切片应应用计计算机进进行三维维重建，以获获得微细结细结 构的立体模型光镜镜技术术电镜电镜 技术术组织组织 化学放射自显显影术术图图像分析研究内容发展简史学习方法技术简介细细胞培养组织组织 工程图图16细细胞培养术术（cell culture） 把从机体取得的细细胞在体外模拟拟体内的条件下进进行培养；培养组织块组织块 或器官则则称组织组织 培养术术或器官培养术术 用于研究细细胞、组织组织 的代谢谢、增殖、分化、形态态和功能变变化，各种理化因子对对活细细胞的影响 培养条件：营营养、生长长因子、pH值值、渗透压压、O2和CO2浓浓度、温度，控制污污染 用相差显显微镜观镜观 察光镜镜技术术电镜电镜 技术术组织组织 化学放射自显显影术术细细胞培养组织组织 工程图图像分析研究内容发展简史学习方法技术简介图图17、18组织组织 工程（tissue engineering） 用细细胞培养术术在体外模拟拟构建机体组组织织或器官的技术术 正在构建的有皮肤、软软骨、骨、肌腱、骨骼肌、血管、角膜等；其中以组组织织工程皮肤较为较为 成功，已成为为商品用于治疗烧伤疗烧伤 、皮肤静脉性溃疡溃疡 等疾病光镜镜技术术电镜电镜 技术术组织组织 化学放射自显显影术术细细胞培养组织组织 工程图图像分析研究内容发展简史学习方法技术简介 研究包括四个方面： 种子细细胞，即增殖旺盛的细细胞，多为为干细细胞 细细胞外基质质，可用生物材料（如牛胶原）和人工合成高分子材料 构建组织组织 或器官，即把细细胞置于细细胞外基质质中进进行三维维培养、并形成所需要的形状 将构建物移植机体的方法 光镜镜技术术电镜电镜 技术术组织组织 化学放射自显显影术术细细胞培养组织组织 工程图图像分析研究内容发展简史学习方法技术简介图图19 组织组织 学、组织组织 、嗜酸性、嗜碱性的概念 组织组织 学学习习方法要点 石蜡切片术术和超薄切片术术的基本原理 HE染色法本章重点图图1 心脏脏（左:器官 右:组织组织 光镜图镜图 ） 上皮组织结缔组织肌组织图图2 心脏脏 （心肌细细胞光镜图镜图 ）图图3 心脏脏 上:肌丝结丝结 构电镜电镜 图下:肌丝丝蛋白质质构成 模式图图图图4 HE染色，垂体远侧远侧 部图图5 镀银镀银 染色，小脑脑皮质质神经经元图图6 醛醛复红红与偶氮焰红红染色，肥大细细胞和弹弹性纤维纤维图图7 透射电镜图电镜图 ，浆细浆细 胞图图8 扫扫描电镜电镜 图图，血细细胞图图9 PAS反应应，小肠肠上皮杯状细细胞的黏原颗颗粒图图10 免疫组织组织 化学原理模式图图图图11 免疫组织组织 化学（荧荧光素标记标记 ）毛细细血管内皮细细胞呈vWF阳性 图图12 免疫组织组织 化学（辣根过过氧化物酶标记标记 ）胰岛岛B细细胞呈胰岛岛素阳性图图13 免疫组织组织 化学电镜电镜 图示上皮细细胞膜MAM6蛋白 （A 胶体金标记标记 B 辣根过过氧化物酶标记标记 ）图图14 原位杂杂交 主动动脉平滑肌细细胞呈弹弹性蛋白mRNA阳性图图15 放射自显显影 示幽门门部胃小凹底的干细细胞 （3H标记标记 的胸腺嘧啶嘧啶 核苷标记标记 ）图图16 计计算机三维维重建 示肝小叶血管图图17 体外培养的HeLa细细胞相差显显微镜图镜图图图18 体外培养的平滑肌细细胞 （免疫组织组织 化学染色显显示肌动动蛋白）图图19 实验实验 中的组织组织 工程耳。