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1、细菌药物敏感性试验新检测方式得临床应用价值细菌药物敏感性试验新检测方法的临床应用价值众所周知，在抗菌药物敏感性试验（AST）方法中，纸片扩散法 （ K - B ）和微量肉汤稀释（BMD）方法在日常临床工作应用最广泛。在常用AST自动化仪器中，如凤凰（Becton，Dickinson Phoenix），贝克曼 （MicoscanWalkAway）和梅里埃（bioMrieux Vitek 2），都基于BMD是测试药物对于于细菌的最小抑菌浓度（MIC）。但是，这些方法有一定的局限性，如需要相对大量的活菌、复杂的分析前处理、获得结果的时间和受成本支出等因素的影响。目前，有许多种AST方法，且每一种都有
2、其长处和短处。下面，我们将简要介绍几种未来有可能替代目前的标准方法（BMD）的抗菌药物敏感性试验技术 一、AST新的替代方法 1. 基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）质谱除了用于快速鉴定临床分离的病原体外，其检测AST的方法也有一定的价值。已报道的方法有: （1）测抗生素水解酶（如-内酰胺酶）的活性。（2）确认是否存在指示抗药性（例如vanA，mecA或NDM-1）的PCR产物。（3）是否存在与药敏变化相关的抗菌药物的情况下，观察细菌蛋白质谱的变化。2. 流式细胞仪（Flow cytometry，FC）流式细胞荧光技术药敏试验 （FCST）则是根据FC所检测到的荧光
3、强度来判断经药物处理后的培养液中细菌的存活率，从而预测某种药物对于于特定病原体感染的治疗效果。FCST常用的三种荧光染料分别为膜非渗透性、膜渗透性和膜电位敏感性。3. 振动悬臂称重微生物细胞（Microbial cell weighing by vibrating cantilevers）悬臂包含有助于微生物经过进程的小管道，并可以使其不断振动。当细菌经过进程时，它们的重量（在飞克范围内）将导致悬臂运动的频率发生变化。密度较低的细胞与密度较高的细胞会引起不同的变化。当用抗菌剂处理细菌时，其浮力质量密度会发生变化并可以被测量。悬臂可以使用纳米技术进行多路复用，从而可以同时针对于于单个生长培养物测
4、试不同浓度的多种抗生素。悬臂技术也被曾用于评估万古霉素与细胞壁前体的结合和测量多粘菌素对于于铜绿假单胞菌的影响作用。4 . 等温微量热法（IMC）使用IMC进行药物敏感试验并不是新的方法，已有成功应用于细菌AST的报道。如分枝杆菌，包括结核分枝杆菌和真菌。当使用一段时间内的净热量作为细菌生长的替代指标时，IMC与BMD方法以及与CLSI和/或EUCAST的折点有良好的相关性。另外，IMC可用于评估抗微生物药物的协同作用。5. 磁珠旋转(Magnetic bead rotation)基于异步磁珠旋转 （AMBR）生物传感器的生长抗菌药敏性试验已经被报道。在这个系统中，随着细菌的生长，可以观察到细
5、菌对于于旋转磁场中自组装磁性微珠簇的旋转和形状的影响。6. 微滴中测试（Testing in microdroplets）最近，制备了含有单个细菌细胞的液滴。这一技术可以小型化，并且对于于每个细菌的抗生素测试的数量容易多路复用，而且测试的持续时间可以短到一个或几个细菌复制周期。显然，在将这种方法作为一种常规AST对于象进行评估之前，有必要对于于技术重复性进行评估，并开发足够的参考MIC数据库 AST的未来技术方法基于噬菌体的策略已成功地适用于结核分枝杆菌的检测，并经过进程加入包含荧光素酶基因的重组噬菌体实现了优化。结果表明，荧光素酶测定可以在2天之内以低成本进行，并可以成功天时用于发展中国家的
6、实验室。然而，尽管某些创新方法似乎很有希望，但尚未获得广泛的接受。实时显微镜是创新技术之一，在不久的将来可能应用于AST。基于高分辨率相机系统的仪器已经商业化，并且显示出很高的效率。该技术已拓展应用于在有或无抗生素的情况下观察微菌落和系列摄影，可为阳性血液培养瓶中的细菌做到“1天AST”。这表明看似简单、老式的检测形式仍然可以改造成能更好地满足患者需求的自动化系统。但是，需要注意的是，对于于于所有AST的未来技术方法，其数据库开发尚未完成，而且这些技术的前景目前仍然不十分明朗。三、小结常规AST有其诊断局限性，通常耗时且测试结果滞后,尽管其方法非常可靠和备受推崇，通常也有CE(Conformite Europeenne)和FDA(Food and Drug Administration) 认证。AST老手艺可以快速和自动化， 但任何AST老手艺都必须与当前的参考标准方法（BMD）相比对于于，然而，呈现出显著改进的方法目前尚未见报道。但是，正如我们所综述的，未来几种简单、快速、稳定和特异的AST方法可能很快就会出现。 3Word版本
