徐州莎彙臓楽枚術畀宛毕业设计（论文）液■质联用进展及其在药杨分析中的应用Liquid Ms Analysis Progresses and its Application in PharmaceuticalAnalysis班 级 工业分析与检验（药物分析081）学生姓名 周游 学号 8303行044指导教师张惠 职称 副教授导师单位 徐州工业职业技术学院毕业专题（设计）任务书课题名称：液-质联用进展及其在药物分析中的应用课题性质： 毕业综述 系名称: 环境工程系 专 业： 工业分析与检验（药物分析）班 级： 药物分析0 8 1 指导教师： 张惠 学生姓名： 周游一、 课题名称：液-质联用进展及其在药物分析中的应用二、 毕业论文（设计）主要内容：液-质联用技术自20世纪70年代进行开创性研究以來，各种商品化仪器相 继问世，且应用日益广泛LC-MS联用技术集液相色谱的高分离与质谱的高灵敏 度，极强的定性专屈性于一体质谱检测器具有更高的灵敏度，样品用量少，分 析速度快，应用范围广，在选择合适电离方法的前提下，一般化合物都能被电离 得到检测，从而能获得更多的化合物结构信息HPLC可分离极性的、离子化的、 不易挥发的相对分子质量大和对热不稳定的化合物，同时LC-MS联机弥补了传统 检测器的不足。
作为一种具有广泛应用前景的检测方法，LC-MS联用技术在药学 领域中已得到广泛应用1、 查阅专业文献2、 制定科研工作计划3、 液■质联用技术及发展4、 液■质联用在药物分析中的应用5、 以科技论文格式写出毕业专题报告6、 完成毕业论文答辩三、 计划进度：1、 第一、二周：选择毕业专题的题目，设计毕业专题的方案，查阅专业资 料2、 第三、四周：进行资料整合，完成论文思路3、 第五周：初步完成转题报告4、 第六周：正式撰写报告，毕业答辩四、 毕业设计（论文）结束应提交的资料1、 毕业专题任务书2、 毕业专题实验报告3、 毕业专题答辩成绩4、 毕业专题成绩指导教师 年 月 日教研室主任 年 月 日论文真实性承诺及指导教师声明学生论文真实性承诺木人郑重声明：所提交的作品是本人在指导教师的指导下，独立进行研究工作所 取得的成果，内容真实可靠，不存在抄袭、造假等学术不端行为除文中已经注 明引用的内容外，本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果对 本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明如被发现 论文中存在抄袭、造假等学术不端行为，本人愿承担本声明的法律责任和一切后 果。
毕业生签名： 口期： 指导教师关于学生论文真实性审核的声明本人郑重声明：已经对学生论文所涉及的内容进行严格审核，确定其内容均由学 生在本人指导下取得，对他人论文及成果的引用已经明确注明，不存在抄袭等学 术不端行为指导教师签名： 口期：液■质联用进展及其在药物分析中的应用周游徐州工业职业技术学院环境工程系221140扌商要：LC-MS联用技术集液相色谱的高分离与质谱的高灵敏度，极强的定性专 属性于一体质谱检测器具有更高的灵敏度，样品用量少，分析速度快，应用范 围广，在选择合适电离方法的前提下，一般药物都能被电离得到检测，从而能获 得更多的化合物结构信息HPLC可分离极性的、离子化的、不易挥发的相对分 子质量大和对热不稳定的化合物，同时LC-MS联机弥补了传统检测器的不足关键词：液-质、灵敏度、质量、药物Abstract: By HPLC - MS coupled techniques sets of high performance liquid chromatographic separation and mass spectrum of high sensitivity, strong qualitative specificity at an organic whole. Mass spectrometry detector has higher sensitivity, sample consumption, analysis spee, wide application range, choosing appropriate ionization method, under the precondition of general compounds can be detected by ionization, thus can obtain more compound structure information. HPLC separable polarity, ionized, difficult to volatile molecular weight and on the thermal unstable compounds, and HPLC - MS online compensated for the conventional detector shortage.Keyword：Liquid Mass, Sensitivity, Quality, drug目录摘耍 4关键词 4Abstract 4Keyword 4第一章前言 6第二章液•质联用分析原理 6第三章液■质联用仪的组成及其分析条件的选择 73」LC-MS联用仪的组成 73.2 LC-MS分析条件的选择和优化 7321接口的选择 73.2.2正、负离子模式的选择 8323流动相的选择 83.2.4流量和色谱柱的选择 83.2.5辅助气体流量和温度的选择 8第四章LC-MS联用在药物分析中的应用 94」在化学合成药物中有关物质的检查 94.2在天然药物化学研究中的应用 94.3在定性分析及结构鉴定中的应用 94.4 在定量分析中的应用 104.5 在多肽类药物研究中的应用 104.5.1 多月太的月女图(peptidemap)分析 104.5.2 多肽的氨基酸序列分析 114.6糖的化学结构分析与鉴定 114.7 在药物代谢研究中的应用 114.8在药物筛选方面的应用 12第五章LC-MS进展 13第六章结 语 14参考文献 15致谢信 18A-A- *—第—早冃怕随着科学技术的发展，质谱技术在药物分析中发挥着越来越大的作用，主要 有气相色谱■质谱联用，液-质联用，气相色谱■原子光谱/质谱联用，超临界流体 色谱•电感耦合等离子•质谱联用，高效液相色谱•原子光谱/质谱联用，高效液相 色谱■电感耦合等离子/质谱联用等。
这些高新技术具有传统方法无法比拟的优 势，它们既发挥了现代色谱对复杂样品的高分离能力，又应用了质谱具有的高选 择性、高灵敏度以及能够准确提供化合物的分子量与结构信息的优点色谱与质 谱的结合，帮助人类在自然界中寻找和发掘新的物质，并分离鉴定出了某些微乎 其微的痕量物质高效液相色谱法(HigllPerformance LiqoidChro matography, HPLC)是六十年代末发展起来的采用液体作流动相的一种高效能色谱法在其分 析的化合物多数无需经过衍生化处理而直接进样在HPLC上得到分离，并进一-步 在MS获得准确的定性和定量，从而大大地缩短了分析时间，提高了分析的灵 敏度和准确性曾沿用高压、高速液相色谱法的名称自高效液相色谱法问世以 来，发展和普及寸分迅速，每年有关高效液相色谱法的文献报道呈指数函数增 长据报道1983年美国化学文摘就收载了 2501篇文章山已泛用于体 液中药物的分析和代谢产物的研究是临床化学检验、临床用药监护以及药代动 力学研究等方而必不可少的手段之一不仅具有气相色谱法的优点，而且还弥补 了气相色谱法的缺点和不足采用高效液相色谱法分析生物体液中的药物浓度， 具有快速、高效、灵敏度高、专属性强等优点，可用于不挥发的、可电离的、对 热不稳定的药物的分离测定，是近年来在体液分析方面应用广泛的一种分析方 法。
有机溶剂的采用液一固吸附色谱法，用硅胶作固定相，有机溶剂作流动相; 溶于水的药物如果是非离子型的，采用反相液，一液分配色潜常用十八烷基 化学键合相(ODS)等作固定相，用配比的甲醇、乙睛和水等极性溶剂法当作流动 相;对于离子型的药物，可采用离子对色潜或离子交换色谱法，实际测定时，先 选定色谱柱和固定相，适当改变流动相的配比肓至达到良好的分离为目的液・ 质联用技术在其分析的化合物多数无需经过衍生化处理而直接进样在HPLC上 得到分离，并进一步在MS获得准确的定性和定量，从而大大地缩短了分析时 间，提高了分析的灵敏度和准确性由于液■质联用技术对高沸点、难挥发和热不稳定化合物的分离和鉴定具有 独特的优势，因此广泛地应用于食品、医药、主化、环保等各方面第二章液■质联用分析原理液■质联用仪主要由高效液相色谱，接口装置(LC与MS之间的连接装置， 同时也是电离源)，质谱仪组成混合样品通过液相色谱系统进样，由色谱柱分 离，从色谱仪流出的被分离组分依次通过接口进入质谱仪的离子源处并被离子 化，然后离子被聚焦于质量分析器中，根据质荷比而分离，分离后的离子信号被 转变为电信号，传递至计算机数据处理系统，根据质谱峰的强度和位置对样品的 成分和结构进行分析。
液■质联用是通过一个“接口”來实现的，所用接口合适 与否，不仅会影响质谱仪的灵敏度，而且影响质谱仪所能提供的结构信息和应用 范围在接口研制方而，前后发展了有20多种⑺，其中主要有直接导入界面、传 送带界面、渗透膜界面、热喷雾界面和离子束界面，但这些技术都有不同方面的 限制和缺陷，直到大气压电离技术(API)成熟后，液■质才得以飞速发展，成为科 研和日常分析的有力工具大气压电离技术包括电喷雾电离和大气压化学电离 (APCI)o作为LC-MS联用仪的质量分析器，最常用的是四极杆分析器，离子阱 分析器和飞行时间分析器四极杆分析器由4根棒状电极组成⑶，当样品量很少, 而且样品中特征离子已知时，可以采用离子监测，这种扫描方式灵敏度高，通过 选择适当的离子使干扰组分不被采集，可以消除组分间的干扰飞行时间质量分析器的特点是质量范围宽，扫描速度快，既不需电场也不需 磁场但是，长时间以来一直存在分辨率低这一缺点，主要原因在于离子进入漂 移管前的时间分散、空间分散和能量分散日前，通过釆取激光脉冲电离方式， 离子延迟引出技术和离子反射技术，可以在很大程度上克服上述3个原因造成的 分辨率下降，这种分析器已广泛应用于液相色谱■质谱联用仪中。
离子阱质量分 析器的特点是结构小巧，质量轻，灵敏度高，而且还有多级质谱功能，其与四极 杆分析器类似，离子在离子阱内的运动遵守所谓马蒂厄微分方程，也有类似四极 杆分析器的稳定图在稳定区内的离子，轨道振幅保持一定大小，可以长吋间留 在阱内，不稳定区的离子振幅很快增长，撞击到电极而消失第三章液■质联用仪的组成及其分析条件的选择3.1 LC-MS联用仪的组成HPLC部分：高压输液系统、进样系统、色谱柱、检测系统、记录仪 MS部分：供电系统、进样系统、离子源、质量分析器、离子检测器 接口装置：(也是电禺源)3.2 LC-MS分析条件的选择和优化3.2.1接口的选择ESI适合于中等极性到强极性的化合物分子，特别是那些在溶液中能预先形 成离子的化合物和可以获得多个质子的大分子(如蛋白质)APCI不适合可带多个电荷的大分子，其优势在于弱极性或中等极性的小分 子的分析3.2.2正、负离子模式的选择选择的一般原则为:正离子模式适合于碱性样品，可用乙酸或甲酸对样品加 以酸化样品中含有仲氨或叔氨时可优先考虑。