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1、存档日期： 2017年6月 存档编号： 1425183206 连 云 港 师 范 高 等 专 科 学 校毕 业 论 文（设 计） 论 文 题 目： 银杏叶中有效成分的提取工艺进展 姓 名： 高 爽 学 院： 海洋港口学院 专 业 、 班 级： 14生物制药技术2班 指 导 教 师： 沈洁 教授 连云港师范高等专科学校教务处摘 要 银杏叶中的有效成分是人们一直以来重点研究的对象。其传统的提取工艺有溶剂法和水提法。随着科技的不断进步发展，许多新方法如超临界流体法、树脂吸附法、微波提取法、超声波提取法和高速逆流色谱等不断发展和应用，越来越多的方法被人们发现并用于提取银杏叶中的有效成分。为人们研究银杏
2、叶中有效成分提供了更多的途径。本文主要综述了银杏叶中有效成分的提取工艺及进展。关键词：银杏叶；有效成分；提取工艺；进展ABSTRACT The active ingredient of ginkgo biloba is the object that people always focus on research. The traditional extraction process is solvent and water extraction. With the continuous development of science and technology, many new metho
3、ds such as supercritical fluid method, resin adsorption method, microwave extraction method, ultrasonic extraction method and high-speed countercurrent chromatography continue to develop and application, more and more methods are found and used for extraction Ginkgo biloba in the active ingredient.
4、For people to study the active ingredients of Ginkgo biloba provides more ways. In this paper, the extraction technology and progress of active ingredients in Ginkgo biloba leaves were reviewed.Key words：Ginkgo biloba；active ingredient；extraction process；Process目 录1引言11 11222银杏叶中有效成分的提取工艺研究23 3 3 2萃
5、取法4 4 45563银杏叶中有效成分的提取工艺进展64结论6致谢8参考文献9银杏叶中有效成分的提取工艺进展1 引言银杏叶作为世界上公认的具有极高药用价值和经济价值的植物叶，已有几百年的历史。研究表明银杏叶具有活血化瘀，通络止痛，敛肺平喘，化浊降脂的功效，其药理作用十分的广泛，可用作对心脑血管及中枢神经的保护作用和抗肿瘤的作用等。因此人们对银杏叶的研究也越来越重视。据了解银杏叶中有效成分主要是黄酮类化合物和萜类内酯1。近年来，许多国家对银杏叶有效成分的分离提取进行了大量的研究，其提取工艺有了很大进展。目前银杏叶中黄酮类化合物提取工艺主要有有机溶剂法、水浸取法、超临界CO2萃取法等。萜类内酯的提
6、取工艺主要有溶剂浸取法、柱提取法、溶剂萃取柱提取法等2。除此以外，一些新技术如超声提取技术、酶工程技术和微波技术等也将不断发展投入使用。1.1 银杏叶简介银杏叶为银杏的干燥叶，多为皱状，上缘呈不规则的波状弯曲，有的中间凹入，完整的银杏叶为扇形，一般为浅棕黄色具二叉状平行叶脉。银杏叶一般在秋季叶尚绿之时采收，然后干燥制得。其性甘苦、气微、味微苦，归肺、心经，有益心敛肺、化湿止咳、活血化瘀、通络止痛等功效3。银杏叶作为药材使用已有几百年的历史，在很多国家都广泛使用。主要用于治疗心脑血管疾病和老年外周循环障碍等疾病。近年来还发现其对肿瘤的治疗有效果。我国作为银杏的故乡，拥有世界上一半以上的银杏资源。
7、因此我国在对银杏叶的研究上拥有先天的资源4。1.2 银杏叶中的有效成分根据一直以来人们对银杏叶的研究表明，银杏叶中含有黄酮类化合物、萜类内酯、生物碱、氨基酸、维生素和微量元素等物质5。其中最重要的成分是黄酮类化合物和萜类内酯。这两种物质是银杏叶具有药用价值最重要的原因。黄酮类化合物能有效地清除体内有毒过氧自由基，起抗炎抗组胺的作用，还是治疗心脑血管疾病的有效成分；而银杏内酯具有高度的抗血小板活化因子(PFA)的作用，能够有效地扩张血管增加心脑血液流量，同时也具有消炎镇痛、抗衰老、抗肿瘤和降血脂等功效。1.2.1 黄酮类化合物黄酮类化合物在银杏叶中所占的比率较高，约为2.55.9%。到目前为止，
8、从银杏叶中提取的黄酮类化合物约有40种。根据其结构不同，我们可以将它分为四大类：单黄酮、双黄酮、黄酮苷和儿茶素类2。其中单黄酮作为银杏制剂质量控制的重要指标之一，主要用于治疗心脑血管疾病；双黄酮据研究表明具有抗炎抗组胺等作用；儿茶素类黄酮则具有治疗肝中毒和抗肿瘤的作用。黄酮类化合物的一般提取方法有水浸取法、溶剂萃取法、超临界CO2萃取法和树脂吸附法等。1.2.2 萜类内酯银杏叶中有效内酯主要是银杏内酯A、B、C、J和白果内酯2。银杏内酯属于二萜类内酯；而白果内酯属于倍半萜类内酯，易溶于水，因此这导致了不同生产工艺产品质量不稳定。白果内酯是目前银杏叶中研究最多的一种，因为它具有促进神经生长的作用
9、，以及防止脑、脊髓神经脱髓鞘作用，近年来科学家们还发现白果内酯对防止老年性痴呆的发生有着不错的效果。研究表明银杏叶中萜类内酯具有抗血小板活化因子活性、抗炎抗过敏等作用。目前银杏叶内酯提取工艺有溶剂浸取法、柱提取法和两种方法的结合处理等。1.3 银杏叶中有效成分的研究现状银杏叶作为重要的医疗保健的原材料，其有效成分的研究一直以来都倍受人们的关注。人们对银杏叶的研究已有上百年的历史，而银杏叶中有效成分的药理作用是从上世纪60年代开始被人们所了解。我国作为银杏的发源地，拥有先天的银杏资源，并且我国的银杏品种优良，银杏叶中有效成分的含量高，具有很高的利用价值。但是我国对银杏叶的开发起步较晚，于上个世纪
10、60年代末才开展对银杏叶的研究，80年代我国首批以银杏叶黄酮为主要成分的制剂“天保宁”问世，至此拉开了我国对银杏叶有效成分研究的序幕6。目前世界上对银杏叶中有效成分在心脑血管系统、脑及中枢神经系统、抗肿瘤方面的药理作用机制有着重要的研究。2 银杏叶中有效成分的提取工艺研究由于银杏叶中的有效成分具有极高的药用保健价值，国内外科学家都在不断地探索优化其提取工艺。据有关文献报道，德国最开始于上世纪60年代采用溶剂法提取黄酮类化合物和萜类内酯，并且将其加工为生物制剂。随后逐渐在欧洲、美国、中国等市场建立起加工厂。溶剂法作为一直以来应用最为广泛的方法，在提取银杏叶中有效成分最开始的年代，有着重要的影响，
11、以至到目前为止都是主流的方法。以下分别列举了黄酮类化合物和萜类内酯的提取工艺。2.1 黄酮类化合物提取工艺人们对黄酮类化合物的研究始于上世纪30年代，日本学者古川周二首先从银杏叶中提取到银杏双黄酮的混合物，随后Baker等人应用逆流分配色谱法从黄酮混合物中分离出银杏黄酮、异银杏黄酮和白果黄酮。直到1966年联邦德国科学家从银杏叶中提取出具有降低胆固醇和通血脉作用的黄酮类化合物后，其药理作用才逐渐被人们发现。从此人们对银杏叶中黄酮的提取工艺进行了大量的研究，总结如下：2.1.1 水浸取法水浸取法7的提取工艺为：将干净的银杏叶烘干粉碎，放入pH为8的水中浸泡，在固：液为1：40，浸出温度为90摄氏
12、度时，浸取4次，每隔3小时浸取一次。此种工艺几乎能将银杏叶中所有黄酮浸取出来。其优点是用水作为浸取剂来源广泛、无污染、成本低。但缺点是浸取液所含杂质较多，如无机盐、蛋白质等。2.1.2 有机溶剂浸取法有机溶剂浸取法是一直以来应用最为广泛的一种方法。其中一种提取工艺8为：用乙醇、丙酮等有机溶剂浸泡银杏叶，然后通过浓缩水析，离心过滤得到浸膏，再通过萃取等方法提取出黄酮。以乙醇为例，一种用55%左右的乙醇浸泡银杏叶，固液比为1：8，在65摄氏度左右下浸取两次，每次3个小时 然后采用A-1和A-2混合树脂即可提取出黄酮，含量大约为30%。还有一种方法是取粉碎好的银杏叶，加入一定量的75%乙醇，浸泡过夜
13、，再放入55摄氏度左右的水浴锅中加热并不断搅拌，大约5个小时后趁热过滤，收集滤液。再将滤渣重复上述操作取两次滤液，置于分液漏斗中石油醚萃取12次每次石油醚用量约为滤液体积的4%，直至水层不含叶绿素；随后将分液漏斗中分出的水相用旋转蒸发器蒸发，同时回收乙醇，当蒸至少量液体时转入培养皿中，经干燥后得到棕红色粘稠物，这便是主要成分为黄酮类化合物的银杏叶提取物，其产率大约为17%。冯晓萍等叙述了以丙酮为溶剂的提取工艺，取银杏叶加入40%60%的丙酮在60摄氏度左右下浸泡，取浸提液浓缩、过滤，再加13倍的水，进行水析、离心、过滤，再用CCl4等非极性溶剂等体积萃取3次，调节pH89，沉降、离心、过滤，再
14、调节pH至34，取清液加硫酸铵，用C4C9酮和酯反复萃取，最后取有机相浓缩干燥，得到产品。 有机溶剂法是国内外使用最广泛，提取物质量高的一种方法，但由于生产成本高，不安全等因素也使得这种方法受到一定限制。2.1.3 超临界流体萃取法近年来，随着超临界流体提取技术的发展，超临界流体萃取法在天然产物活性成分提取中的应用越来越广泛，使用该技术来提取银杏叶中黄酮化合物也不断投入使用。刘志敏等首先用超临界CO2萃取法提取出银杏叶中的黄酮苷。超临界CO2萃取工艺4是利用超临界状态下的CO2和银杏叶在不同的蒸汽压力下所具有不同的亲和力和溶解力进行分离的操作。这种工艺与传统的溶剂萃取法相比有很多优点：提取效率高，无残留，无毒性等。此种方法提取黄酮含量高于35%，提取率达85%。超临界流体法将成为今后提取银杏叶中有效成分的重要工艺。2.1.4 树脂吸附法树脂吸附法9的提取工艺为先将银杏叶加入一定量的70%乙醇溶剂中浸泡加热回流，加热过程中要不停搅拌，并且控制温度在70摄氏度，浸取两次，每次两个小时，此时的浸提效果最佳。然后过滤得到提取液，加水搅拌均匀，离心，取离心液滤过D101或724树脂洗脱，再用70%的乙醇洗脱洗脱液通过聚酰胺柱，收集洗脱液加入亚硫酸氢钠作为保护剂后真空浓缩干燥即可得到银杏的提取物。此种工艺能使提取
