苦荞黄酮的提取工艺以及抗氧化特性研究201422281057_2825689

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1、 本科毕业论文(设计)论文题目:苦荞黄酮的提取工艺以及抗氧化特性研究系 部: 专 业: 年级班级: 学 号: 学生姓名: 指导教师: 职称 目 录引言31 材料与方法71.1 实验材料71.2 主要实验仪器7实验方法7苦荞中总黄酮提取分离纯化7黄酮标准溶液的制备和标准曲线的绘制.7苦养麦麸皮总黄酮含量测定.8正交实验设计.8苦荞黄酮提取工艺.9苦荞黄酮、苦荞粉,苦荞籽,苦荞壳成分分析.92苦荞黄酮抗氧化活性能力的测定112.1 DPPH贮备液的配制11苦荞黄酮抗氧化活性能力的测定11不同浓度下不同物质的抗氧化活性能力的测定11不同pH条件下各物质的抗氧化活性能力的测定123 结果与分析133.

2、1 苦荞黄酮的提取工艺研究13苦荞黄酮得最佳提取条件133.2 苦荞黄酮的提取143.2.1 苦荞粉黄酮提取.143.2.2 苦荞黄酮、苦荞粉,苦荞籽,苦荞壳成分测定143.3 苦荞黄酮抗氧化性能163.3.1 苦荞黄酮、荞籽醇提液、荞壳醇提液的对DPPH自由基的清除能力比较173.3.2 不同浓度提取物对DPPH自由基清除能力比较.183.3.3 不同pH条件下各抗氧化剂对自由基的清除率.194 讨论205 结论21参考文献22摘要:对苦荞麦黄酮类物质的乙醇提取工艺进行研究。以芦丁为对照品用吸光光度法,利用正交实验研究苦荞黄酮提取过程中的提取所用时间、乙醇的浓度、料液比、提取温度,结果表明:

3、 对提取效果影响冈素依次为乙醇体积分数提取时间提取温度料液比。得到最佳提取工艺条件为:体积分数70乙醇、料液比1:10、提取温度70、提取时间5h,二级提取,提取率为3.2 ,纯度73.48 。采用最佳提取条件对苦荞粉进行苦荞黄酮的提取分离,再进行纯化,对苦荞黄酮进行成分分析,得到含量高达65 的高纯度苦荞黄酮。以维生素C、芦丁为对照,研究苦荞黄酮、荞籽醇提物、荞壳醇提物在不同浓度、不同pH下对DPPH自由基的清除能力。结果表明,苦荞黄酮清除DPPH自由基的能力仅次于维生素C,大于芦丁和荞籽醇提物,远大于荞壳醇提物,清除DPPH自由基的能力与其浓度成正比关系,在pH=28范围内,pH增大,清除

4、DPPH自由基的能力先降低后增大,在pH=7时最低。关键词:苦荞黄酮 正交实验 提取工艺 抗氧化性Abstract: the bitter buckwheat ethanol extraction technology of flavonoids were studied. With rutin as reference substance with absorbance spectrophotometry, using the orthogonal experimental study used buckwheat flavone extraction in the process of e

5、xtraction time, ethanol concentration, solid-liquid ratio, extraction temperature, the results show that the influence on the extraction effect, element followed by ethanol concentration extraction time extraction temperature solid-liquid ratio. Get the best extraction technology conditions for: vol

6、ume fraction of 70% ethanol, and solid-liquid ratio, extraction temperature 70 , extracting time 5h, secondary extraction, extraction rate was 3.2%, the purity of 73.48%. The best extraction conditions of buckwheat powder, buckwheat flavone extraction and separation, to purify, to analyze the chemic

7、al composition in buckwheat flavone, get high purity buckwheat flavone content as high as 65%. With vitamin C and rutin as comparison, the buckwheat flavone, seed alcohol extract, shell alcohol extract in different concentrations, the DPPH free radical scavenging ability under different pH. The resu

8、lts showed that buckwheat flavones ability to remove DPPHfree radicals after vitamin C, greater than rutin and Qiao seed alcohol extract, far more than Qiao shell alcohol extract, remove the ability of DPPH free radicals and its concentration is proportional to the relationship, within the scope of

9、the pH = 2 8, pH, after eliminating DPPH free radical ability to reduce, the lowest in the pH = 7.Keywords: buckwheat flavone extraction process of orthogonal experiment the oxidation resistance引言苦荞属双子叶蓼科荞麦属植物,又名春荞、野荞麦,学名鞑靼荞麦,为一年生或多年生宿根植物,原产于我国东北和西南部四川凉山地区。苦荞耐旱耐寒,耐酸耐碱,适应性较强,生长周期短,主要分布在海拔2000米左右的高原地带

10、,是一种药食两用植物,味苦,具有较高的营养价值和良好的医疗保健作用,富含蛋白质、淀粉、脂肪、矿物质及维生素等。更为重要的是含有极为丰富的生物活性成分黄酮类化合物,又称生物类黄酮,是植物经光合作用产生的一大类化合物。苦荞黄酮是存在于苦荞的花、茎、叶和籽粒中的一种多酚类天然产物,主要包括芦丁、槲皮素、山奈酚和桑色素等四种主要成分,其中芦丁含量最高,大约占四种黄酮化合物的85%左右。张琪等1从不同苦荞样品的总黄酮含量和芦丁含量的结果中发现,总黄酮的含量与芦丁的含量有一定正相关性;广西、甘肃、四川、贵州、山西的苦荞总黄酮含量较高;苦荞种子中有效成分高于甜荞;种子贮存时间越久有效成分含量越低。另外,在苦

11、荞中还发现儿茶酸、表儿茶没食子酸、表儿茶酸等生物类黄酮。一般能溶于水、乙酸乙酯、乙醇等极性溶剂中,难溶于乙醚、氯仿和苯。药效学动物实验及临床应用表明:苦荞功能成分的分布研究以苦荞黄酮最多,蛋白质次之,糖醇最少。苦荞黄酮的含量因不同阶段、不同器官而有所不同,以花、叶的含量最高。朱友春等14用比色法测定三个品种不同时期的总黄酮含量,表明黄酮含量高低顺序为幼苗植株籽粒。赵玉平等15通过对苦荞各器官中黄酮含量的研究显示苦荞根、茎、叶、花、籽分别为:0. 51%、1. 25%、5. 39%、6. 28%、2. 13%;并对不同器官及其组织中的芦丁进行定量测定,表明芦丁是苦荞中最主要的黄酮类物质。徐宝才等

12、16对四川苦荞籽粒中各部分的黄酮组分进行测定,结果差异不大,而总黄酮含量为麸皮外层粉壳心粉,麸皮、外层粉、壳中的芦丁占总黄酮的90%以上。Bonafaccia,等17对苦荞及其磨制品的蛋白质含量测定结果为:籽粒(11. 10.06)%、面粉(10. 30. 02)%。目前D-CI主要从苦荞麸皮中提取。苦荞被称为三降食品,具有降低血糖、血脂和胆固醇的作用。张月红等18的研究显示,苦荞提取物对(-葡萄糖苷酶)的抑制作用与阿卡波糖相当;小鼠体内实验显示苦荞提取物可降低实验小鼠口服淀粉、蔗糖后的血糖值,说明苦荞的降血糖作用可能与苦荞内含有-葡萄糖苷酶抑制剂类物质有关,可能是其降血糖作用的机制之一。祁学

13、忠19通过对苦荞黄酮药效学的动物实验研究表明:苦荞提取物120 mg/kg或125 mg/kg,给小鼠或大鼠灌胃1周或2周,有降低血清胆固醇和甘油三酯作用,还可降低肝甘油三酯,说明苦荞提取物有改善脂质代谢异常的作用;苦荞提取物与维生素C联合使用,对降低血脂有一定的增强作用。降血糖机制是通过增加胰岛素受体数量或(和)提高胰岛素与受体结合的敏感性,促进组织摄取葡萄糖等受体后效应而产生降糖作用20。薛长勇等21研究认为苦荞黄酮的作用途径可能是通过抑制糖苷酶、三酰甘油,激活过氧化物体增殖剂激活型受体和而实现的。由于苦荞黄酮类化合物的成分复杂,到底是哪种黄酮化合物表现上述作用,还需要更深入的探索。另外,

14、D-CI为胰岛素信号传递过程中的信使,糖尿病患者的胰岛素抵抗主要是由于体内缺乏足够的D-手性肌醇所致。苦荞糖醇可在人体肠道微生物的作用下被降解为D-CI,进而提高胰岛素的敏感性,对降低胆固醇和低密度脂蛋白也有一定的作用。黄酮作为一种功能成分,具有较显著的降血糖、降血脂、抗氧化、增强心血管功能等。芦丁又名芸香苷、维生素P,是苦荞中主要的黄酮类物质。现代医学证明,芦丁具有多方面的生理活性,可用来预防和治疗毛细血管脆性引起的脑出血、肺出血、出血性肾炎、胃炎、胃溃疡及牙龈出血等。国外还用芦丁制备多种芦丁衍生物,如檞皮素、羟乙基芦丁等。因此,开发苦荞麦具有广阔的市场和发展前景。本研究选用云南高寒山区苦荞麦为原料,采用乙醇热浸法提取分离纯化苦荞黄酮,利用DPPH自由基对其抗氧化活性进行了研究,可为云南苦荞的集成开发利用提供深厚的理论基础。黄酮类化合物以前主要是指基本母核为苯基的色原酮的化合物,现在泛指两个苯环通过中央三碳链相互联结而成的一系列化合物。天然植物黄酮类物质具有消炎、消肿、降压、降血脂、清除自由基等多种功能,其提取物质已用于食品、药品、化妆品等产品中。黄酮广泛存在于一些植物中, 在槐花米、荞麦、蒲公英、桑树叶、银杏中含量

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