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1、牛冷冻精液和配种技术应用 牛冷冻精液和配种技术的应用 鄂尔多斯市家畜改良工作站 张海军 二零一二年七月 讲述内容 第一章 概述 第二章 牛的生殖器官 第三章 母牛的发情 第四章 输精、受精与妊娠早期鉴定 第一章 概述 一 牛冷冻精液技术在畜牧业生产中的意义 二 牛冷冻精液的发展概述 一 牛冷冻精液技术在畜牧业生产中的意义 什么是冷冻精液? 冷冻精液的优点： 1、扩大配种数量 2、优秀种公牛的有效利用 3、减少种公牛的饲养 4、防止疾病 5、提高受胎 6、消灭不孕 7、远距离运输 8、长期保存 二 牛冷冻精液的发展概述 1 家畜冷冻精液的发展 2 牛冷冻精液的应用 第二章 牛的生殖器官 一 公牛
2、的生殖器官及精子的生成与保存 二 母牛的生殖器官及功能 一 、公牛的生殖器官及精子的生成与保存 公牛的生殖器官包括睾丸、阴囊、附睾、输精管、副性腺、尿生殖道、阴茎和包皮。 精子的生成与保存 性成熟 公牛初次释放有受精能力的精子，并表现出完整性行为能力的年龄，是公牛的初情期。 一般引进品种的猪、绵羊和山羊为7月龄；牛为12月龄；马1518月龄；兔为34月龄。国内地方品种相对提早。 性成熟是继初情期之后，青年公牛的身体和生殖器官进一步发育，生殖机能达到完善、具备正常生育能力的年龄。 各种公畜达到性成熟和体成熟的时间 精子的生成与保存 生成 公牛自初情期开始，直至生殖机能衰退，在整个生殖年龄，睾丸的
3、精细管上皮总是在进行着生精细胞的分裂和演变，使精子不断产生和释放。与此同时，生精细胞也以其独特的方式得到不断的补充和更新。母牛则早在胚胎期就形成并储备了全部终生需要的原始卵泡，这是公、母牛配子发生方面的重要区别之一。 保存 精子的保存分常温和低温两种。 低温保存又分低温（05）和超低温（-79-196）两种。超低温即指冷冻精液，是把种公牛的精液通过人工授精的方法采集后，经品质检查，加适量稀释保护液，分装在不同类型的特殊包装后，进行冷冻保存。 冷冻精液的形式分颗粒和细管两种，颗粒已逐步淘汰，普遍使用细管方法。细管的种，普遍使用的是0.25毫升（法国）。 二、母牛的生殖器官 母牛的生殖器官包括卵巢
4、、输卵管、子宫、阴道和外生殖器等组成。 2.1卵巢 位置 未孕母牛的卵巢在没有较大的卵泡和黄体时，形态和位置如下： 牛卵巢的形态为扁椭圆形，附着在卵巢系膜上，有血管和神经从卵巢门出入。中等大小的母牛，卵巢平均长为34厘米、宽1.52厘米，厚23厘米。 母牛的卵巢一般位于子宫角尖端外侧。初胎和胎次少的母牛卵巢位于耻骨前缘之后，多胎母牛因子宫下垂，卵巢亦前移至耻骨前缘的前下方。 卵巢的组织结构 牛的卵巢组织分为皮质部和髓质部，两者的基质都是结缔组织。 皮质内含有卵泡，卵泡的前身和续产物（红体、黄体和白体）。由于卵巢外表无浆膜覆盖，卵泡可在卵巢的任何部位排卵。 卵巢的组织结构含原卵细胞、卵泡（上皮）
5、细胞、卵母细胞、次级卵泡，生长卵泡，卵丘、卵细胞，间质细胞以及上述续产物。 卵巢的功能 （1） 卵巢的发育和排卵 卵巢皮质部分布着许多原始卵泡。原始卵泡是由一个卵母细胞和周围一单层卵泡细胞构成。它经过次级卵泡、生长卵泡和成熟卵泡发育阶段，最终排出卵子，排卵后，在原卵泡处形成黄体。 （2）分泌雌激素和孕酮 卵泡膜的血管性内膜分泌雌激素，一定量的雌激素是导致母牛发情的直接因素。 排卵后形成的黄体，黄体能分泌孕酮，它是维持妊娠所必需的激素。 2.2 输卵管 输卵管的形态和位置 输卵管是卵子进入子宫的必经通道，包裹在输卵管系膜内，细长而弯曲，长12-30cm,前1/3较粗，称为壶腹，是卵子受精的部位。
6、其后部分较细，称为峡部。靠近卵巢的部位扩大呈漏斗状，叫漏斗，是接纳卵子的部位。 输卵管的功能 （1）承受并运送卵子 卵子输卵管伞部漏斗部壶腹部受精壶峡部子宫角 （）精子获能，受精及卵裂的场所 （）分泌机能 发情时分泌含营养的粘液，是卵子，精子及早期胚胎的营养液。 2.3子宫 子宫的形态和位置 子宫分子宫颈、子宫体和子宫角三个部分。牛子宫角基部之间有一纵隔，将两角分开，称对分子宫。 （）子宫角，子宫体 牛的子宫角长30-40cm，角的基部粗1.5-3cm;子宫体2-4cm。初胎牛的较小。子宫体粘膜有突出表面的半圆形子宫阜70-120个，没有宫腺，基部含丰富的血管，怀孕时子宫阜即发育成母体胎盘。
7、（）子宫颈 牛的子宫颈长5-10cm,粗3-4cm，壁厚而硬，不发情时管壁封闭，发情时也只是稍微开放。子宫颈阴道部粗大，突入阴道2-3cm，粘膜有放射状皱襞，经产牛有时呈菜花状。 子宫的功能 （）发情时，输送精液至输卵管；分娩时，排出胎儿。主要是借肌纤维收缩的力量。 （）为胎儿提供营养，是胎儿发育的场所。 （）对卵巢的机能影响。 （）子宫颈是子宫的门户。 （）子宫颈是精子的“选择性贮库之一”。 2.4阴道 阴道是牛的交配器官，又是胎儿娩出的通道，长22-28cm.具交配；精子贮存，保护生殖道不受外生物侵害；排出胎儿及子宫、输卵管分泌物等多项功能。 第三章母牛的发情 一、性成熟 二、卵子的发生
8、三、卵泡的发育和排卵 四、黄体的形成与退化 五、发情和发情周期 六、牛的发情周期特点与发情鉴定 一、性成熟 初情期 母牛初次发情和排卵的时期称为初情期。 性成熟期 性成熟是指母牛初情期以后的一段时期，此时生殖器官发育成熟，具备了正常的繁殖能力，被称为性成熟期。此期体成熟尚未完成，需推后配种。 一、性成熟 适配年限 根据具体发育情况而定，一般要求奶牛18个月，380公斤体重，也有14-16个月配种，要特别注意营养。 体成熟 母年出生后达到成年体重的年龄称为体成熟期。 繁殖能力停止期 母牛达到一定年龄，繁殖能力消失时期称为繁殖能力停止期。 各种母畜的生理发育期 二、卵子的发生 卵子的发生 母牛在胎
9、儿阶段，卵巢皮质内的卵原细胞经有丝分裂发育成为初级卵母细胞。 初期后，初级卵母细胞发生第一次减数分裂（成熟分裂），生长发育成为次级卵母细胞。 在受精过程中，次级卵母细胞完成第二次分裂，并成熟为卵子（第二极体）。 卵子的发生过程包括原细胞增殖，卵母细胞生长（初级次级），卵母细胞成熟三个过程。 卵子 卵子的结构包括放射冠、透明带、卵黄膜、卵黄。 三、卵泡的发育和排卵 卵泡的发育及其形态特点 卵泡发育是指卵泡由原始卵泡发育成为初级卵泡、次级卵泡、三级卵泡和成熟卵泡的生理过程。 （）原始卵泡：位于卵巢皮质部，少数发育成熟。没有卵泡膜和卵泡腔。 （）初级卵泡：由原始卵泡发育而成，未发育卵泡膜和卵泡腔。
10、（）次级卵泡：初级卵泡进一步发育而成，位于皮质部较深层，卵黄膜与卵泡细胞之间形成透明带，但尚未形成卵泡腔。 （）三级卵泡：形成卵泡腔，但不规则。 （）成熟卵泡：是三级卵泡进一步发育至最大体积，卵泡壁变薄，卵泡腔内充满液体。 牛的成熟卵泡直经可达10-14mm. 排卵 成熟的卵泡破裂即发生排卵。排卵数，牛一般每次只排一个卵子，个别也有排两个的。 牛属自发性排卵，即自发排卵和自动生成黄体。 四、黄体的形成与退化 成熟的卵泡破裂排卵后，由于卵泡液被排空，血管破裂，血液在卵泡腔内凝块，呈红色，称为红体。此后由于吸收类脂质而使颗粒细胞变黄称为黄体。 牛一般在发情周期的第7天（按天为一个周期、发情日为天）
11、，黄体内的血管生长及黄体细胞分化完成，第天达到最大体积。 母牛如未配种或配种未孕，此后黄体就逐渐退化，此时的黄体称为假黄体或性周期黄体。 如配种妊娠，则黄体一直维护到母牛临近分娩前，此时的黄体称为妊娠黄体或真黄体。 在整个妊娠期中，黄体体积变小，颗粒细胞被纤维细胞代替，形成一个瘢痂，称为白体。一般存在到下一个周期。 五、发情和发情周期 发情 母牛达到一定的年龄时，由卵巢上的卵泡发育所引起的，受下丘脑垂体卵巢轴系控制的一种生殖生理现象叫做发情。 发情周期 母牛自第一次发情后，如果未配或未孕，则每间隔一定时间便开始下一次发情，如此周而复始直到性机能停止活动的年龄为止。这种周期性的活动，称为发期周期
12、。 各种家畜的发情周期和发期持续期 影响发情周期的因素 遗传因素、环境因素（包括光照、气温和湿度）和饲养管理水平。 牛的发情周期特点 母牛发情周期的特点 了解和掌握牛发情周期的特点对于进行发情鉴定以确定并掌握最适配种时间，提高受情率和配种受胎率，达到提高繁殖率有着十分重要的意义。 1、发情周期和发情期 母牛的发情周期平均为天，但青年牛比成年牛短。 母牛的发情期因季节略有差异，一般夏季较短；春、秋较冬季短；营养好比营养差的短。 牛的排卵发生在发情停止后10-15小时，牛的发情行为表现比较明显。 、卵巢的变化特点 牛右侧卵巢的排卵机率较左侧大。发情周期第10天左右黄体最大，直径2.02.5cm。成
13、熟的黄体为球形或椭圆形，突出于卵巢表面。 发情鉴定 发情鉴定 （）外部观察法：常用，主要看母牛的外部表现和精神状态加以判断。如：精神兴奋不安，食欲减退，外阴肿胀，湿润有粘液分泌排出及粘液的数量，颜色和粘稠度，排尿频繁，爬跨或被爬跨程度。 试情法：应用试情公牛对母牛进行试情。 阴道检查法：用开张器进行观察，其阴道粘膜的颜色、湿润度、子宫颈的颜色，肿胀度及开口大小和粘液数量、颜色、粘稠度等。 直肠检查法：将手伸入母牛直肠内，隔着直肠壁触摸卵巢上的卵泡发育程度，以确定配种时间的方法。需要技术熟练，触诊卵泡进要手轻，切勿用力挤压。 还有电测法、激素测法、鉴定器法，超声波仪等等。 发情鉴定 （）牛的发情
14、鉴定 通常采用外部观察法和直肠检查法综合判断。 母牛发情的外部表现 发情初期有公牛或母牛跟随、欲爬，但不接受；兴奋不安、哞叫、阴道和子宫呈轻微充血肿胀，流透明粘液，量少；食欲下降，产减少，排尿增多。 发情盛期接受爬跨或爬跨其它母牛，粘液增多，牵缕性强；子宫颈呈鲜红色，明显肿胀发亮，开口较大，尾根部或荐部表皮通常磨破，后躯常粘有污泥或粪便。 发情后期接受爬跨减少，粘液变稠变厚，牵缕性变弱。 母牛发情时的卵泡发育规律 一般不用直肠检查法，但现在普遍采用深部输精（至子宫角）或对一些营养不良或排卵没有规律的母牛要进行直肠检查，判断卵泡发育情况。 在卵泡生长发育期，卵巢增大，卵泡直径0.5-1.5cm，
15、呈球状，逐渐有波动感。随着卵泡增大，发情逐渐明显，卵泡达到最大时，发情逐渐减弱。卵泡成熟后，卵泡不再增大，但泡壁变薄，有一触即破之感。随着卵泡破裂排卵，卵泡液流失，形成一个小的凹陷，排卵后6-8小时，红体与黄体随即生成，凹陷消失。 夜间排卵较白昼多，右侧卵巢排卵较左侧多。 第四章输精、受精 正确的输精方法和准确的输精时间是保证和提高受胎率的关健措施。 受精是指精子和卵子结合，产生合子的过程。受精部位是在母牛输卵管壶腹部。 一、输精 准备 1 母牛的准备 把经过发情鉴定后的母牛，拉入输精架或牛床上予适当保定。 将尾巴拉向一侧，清洗阴部及会阴部，再用消毒液（0.3%高锰酸钾或0.5%新吉尔灭）进行消毒，然后用灭菌生理盐水冲洗，灭菌布擦干。 2 输精器材的准备 现在普遍用卡苏式输精器，金属部分用75%酒精棉球擦试消毒，待酒精完全挥发后使用。 输精器外套一定是每头牛一次一支，外套包装拆封后要注意污染。 3 精液的准备 取出冷冻精液一支，用38-40温水解冻15-20秒。解冻容器要专用，解冻温度要准确。解冻后的冷冻精液，用专用剪截去封口端，将棉栓封口端向后，正确装入输精枪。 4 输精人员的准备 需穿工作服，指甲剪短磨光，手洗净擦干，用75%酒精消毒。需带一次性长臂手套涂抹灭菌润滑剂。 输精要求 适宜的输精时间通常是根据
