《生药关于大黄的论文》由会员分享，可在线阅读，更多相关《生药关于大黄的论文（15页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、大黄含量测定中、日、欧药典比较及新测定方法拟定目录1 大黄简介31.1大黄的产地31.2大黄的化学成分313大黄的药理314大黄的功效32大黄中国2010药典含量测定及质量标准42大黄中国2010药典及日本药局方14版比较53.1测定方法532测定物质533标准品制备534供试品制备63.5含量规定64大黄欧洲2002药典含量测定分析65大黄中国2000药典及2010药典比较76对大黄含量测定新方法的拟定77参考文献88 备注12399附录一2010中国药典大黄附录二日本药局方14版大黄、大黄沬 附录三药典分析比较关键词：药典 大黄测定方法质量标准 对照品国之四维：礼义廉耻。而中药四维即为：附
2、子、人参、熟地、大黄。大黄为蓼科植物掌叶大黄RheumpalmatumL.唐古特大黄 RheumtanguticumMaximexBalf.或药用大黄 RheumoffcihaleBaill的干燥根和根茎。 苦，寒。归脾、胃、大肠、肝、心包经。大黄的产地包括：掌叶大黄主要产于甘肃礼县、宏昌、岷县、文县、临夏、武威，青海同仁、 同德、贵德，西藏昌都与那曲地区，四川阿坝与甘孜州的产量占大部分。唐古特大黄主产于青海和甘肃祁连山北麓，西藏东北部及四川西北部亦有少 量。药用大黄产于四川北部、东部、及南部盆地边缘，贵州北部西部，云南西北 部,湖北西部，陕西南部、产量很小，多销当地，通称马蹄大黄。大黄所包含
3、的主要的化学成分是：三种大黄均含有蔥醍及游离蔥醍衍生物， 含量以总蔥醍计，约2.0%-6.2%.也含有榦质、有机酸、糖类、挥发油等。大黄的主要药理作用：泻下作用、抗病原微生物作用利胆作用还有 抗消化道溃疡、抗肿瘤、免疫调节等作用。大黄的主要功效包括：泻下攻积，清热泻火,凉血解毒，逐瘀通经，利湿退 黄。用于实热积滞便秘，血热吐临，目赤咽肿，痈肿疔疮，肠痈腹痛，瘀血经闭， 产后瘀阻，跌打损伤,湿热痢疾,黄疸尿赤，淋证，水肿；外治烧烫伤。酒大黄 善清上焦血分热毒。用于目赤咽肿，齿龈肿痛。熟大黄泻下力缓，泻火解毒。用 于火毒疮疡。大黄炭凉血化瘀止血。用于血热有瘀出血症。经过查阅资料得到，最新的2010
4、版中国药典采用高效液相色谱法(HPLC) 对其进行含量测定，用甲醇进行提取，以芦荟大黄素对照品、大黄酸对照品、大 黄素对照品、大黄酚对照品、大黄素甲醛对照品做对照，规定以本品按干燥品计 算，含芦荟大黄素(C15H1005).大黄酸(C15H 806).大黄素(C15H1005).大黄酚 (C15H1004)和大黄素甲醛(C16H1205)的总量不得少于1.5%。现将2010中国药典药典、日本药局方(第16版欧洲药典(2002版)以 及中国药典2000版本进行含量测定的比较分析。2010中国药典与日本药典的比较。两者均采用了 HPLC高效液相色谱仪注1进行了含量的测定。首先他们均用 的“柱注2，
5、但流动相不同，中国采用的是甲醇0.1%磷酸溶液(85 : 15),而日 本采用稀醋酸(180):乙月青(4:1),其次检测波长也不相同，中国采用的是254nm , 而日本为340nnv当然造成这些差异的主要原因是他们所检查分析的物质不相同，中国检查的是芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚以及大黄素甲醛(结构OH O OHOH O OHOH O OH人萸奈CHQHCOOH大黄酸芦荟大黄素沁:k h - 乂黄启汗整X黄亲 火仁削卩册 A止陽而日本所检查的却是番泻昔(结构式如下)OCOOHCOOHxCH20HqAO 0稱泻昔D番斛G两分予蔥酿通过C厂Cr相互结合rxf芦荟大黄素、大堇酸、大黄素、大黄酚
6、和大黄素甲醛、番泻昔全部属于醍类化合 物，但前者属于蔥醞类衍生物，而后者属于二蔥酮类衍生物，它是由两分子的蔥 酮脱去一分子氢相互结合而形成的化合物。中国大黄检测的标准品的制备如下：精密称取芦荟大黄素对照品、大黄酸对 照品、大黄素对照品、大黄酚对照品、大黄素甲醛对照品适量，加甲醇分别制成 每1ml含芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚各80pg,大黄素甲K40pg的溶 液；分别精密量取上述对照品溶液各2ml ,混匀，即得（每1m1中含芦荟大黄素、 大黄酸、大黄素、大黄酚各16pg,含大黄素甲醛8咽）。日本标准品的制备为：P2O5减压干燥12小时以上，取Wmg用碳酸氢钠溶液 （1-1000）溶解至
7、50mL ,取 5mL 稀释至 20mLo中国测定的供试品溶液的制备：取本品粉末（过四号筛）约0.15g ,精密称定, 置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25ml ,称定重量,加热回流1小时，放冷，再 称定重量，用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过。精密量取续滤液5ml ,置烧瓶 中,挥去溶剂，加8%盐酸溶液10ml ,超声处理2分钟，再加三氯甲烷10ml ,加 热回流1小时，放冷,置分液漏斗中,用少量三氯甲烷洗涤容器，并入分液漏斗 中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取3次,每次10ml ,合并三氯甲烷 液，减压回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻 度，摇匀，滤过，取续滤
8、液，即得。日本的则为:取0.5g ,精密加碳酸氢钠溶液(1-1000 ) 50mL ,振摇30min , 滤过，即得。中国药典2010版规定，含芦荟大黄素(C15H1005).大黄酸(C15H 806).大黄 素(C15H1005).大黄酚(C15H1004)和大黄素甲醛(C16H1205)的总量不得少于 1.5%。日本的则规定以干燥品计,含番泻甘A0.25%以上。对欧洲药典的含量测定方法进行分析欧洲采用的UV法注3测定总蔥醞的含量。供试液的制备:0.1g，加水30mL , 水浴回流提取15min ,加50mg碳酸氢钠,离心，吸取100mL ,置100mL圆底烧 瓶中,加20mL三氯化铁溶液，
9、水浴回流提取20min，加1mL盐酸，加热20min , 并时时振摇,过滤,滤液用乙醛提取3次,每次25mL ,乙醛液用水洗2次，每 次15mL ,乙醛液用棉花滤过，定容至100mL.检测时，精密吸取W.OmL ,水浴上蒸干，加0.5%醋酸镁溶液溶解并定容至 10mLo于515nm处测定吸收值。计算如下：A*0.64/m式中，A为515nm处波长吸收度；m为药材的质量(g)欧洲药典02版规定，以大黄酸计算含的总醍量不得低于2.2%。 中国药典2005与2010版对照相较于10版的药典2005版的中国药典中大黄含量测定所采用的方法基本相 同,不同的仅仅是对照品，只包括了大黄素和大黄酚。规定，其以
10、干燥品计算， 大黄素和大黄酚的总量不得少于0.5%。 大黄含量测定新方法的拟定根据大黄所含的主要成分不仅包括各种蔥醍类，还含有有机酸、糖醇类化合 物，我们可以采用离子色谱法进行含量的测定。离子色谱法系采用高压输液泵系统将规定的洗脱液泵入装有填充剂的色谱 柱进行分离测定的色谱分析方法。注入的供试品由洗脱液带入色谱柱内进行分离 后，经过抑制器或衍生系统进入检测器，由记录仪、积分仪或数据处理系统记录 色谱信号。离子色谱法常用于无机阴离子、无机阳离子、有机酸、糖醇类、氨基 糖类、氨基酸、蛋白质、糖蛋白等物质的定性和定量分析。它的分离机理主要为 离子交换，即基于离子交换树脂上可解离的离子与流动相中具有相
11、同电荷的溶质 离子之间进行的可逆交换；离子色谱的其他分离机理还有离子对色谱、离子排阻 色谱等。采用的填充柱为聚甲基丙烯酸酯或聚乙烯聚合物，以碳酸盐缓冲液作为洗脱 液Q通过增加或减少洗脱液中酸碱溶液的浓度可提高或降低洗脱液的洗脱能力J 在洗脱液内加入适当比例的有机改性剂，如甲醇、乙腊等可改善色谱峰峰形。样 品处理需要通过稀释和0.45pm滤膜过滤后直接进样分析。如果是基质复杂的样 品,可通过微波消解、紫外光降解，固相萃取等方法去除干扰物后进样分析。至于含量的规定，需要大量实验后才能获得数据，本论文只提供方法。参考文献中国药典20W版中国药典21 II中国药典2005版日本药局方14版 日本药局方
12、16版欧洲药典2001版注1高效液相色谱法简介高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱: 柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。注入的供试品,由流动相带入柱内，各 组分在柱内被分离，并依次进入检测器，由积分仪或数据处理系统记录和处理色 谱信号。所用的仪器为高效液相色谱仪。仪器应定期检定并符合有关规定。检查 项目包括色谱柱检测器流动相。色谱系统的适用性试验通常包括理论板 数、分离度、重复性和拖尾因子等四个指标。其中，分离度和重复性是系统适用 性试验中更重要的参数。常用的测定测定法包括内标法外标法加校正因子 的主成分自身对照法不加校正因子的主成分自身对照法面积归一化法）注2碳
13、十八柱简介碳十八柱为（0DS/C18） , ODS柱是一种常用的反相色谱柱,也叫C18柱；ODS柱是十八烷基硅烷键合硅胶填料（Octadecylsilyl ,简称ODS1这种填料在 反相色谱中发挥着极为重要的作用，它可完成高效液相色谱70-80%的分析任 务。由于C1&ODS）是长链烷基键合相，,有较高的碳含量和更好的疏水性,对各 种类型的生物大分子有更强的适应能力，因此在生物化学分析工作中应用的最为 广泛。按键合到基质上的官能团可分为：反相柱：填料是非极性的，官能团为 烷疑,例如：C1&ODS）、C& C4等。正相柱：填料是极性的，官能团为 CN 氟基、NH2氨基等。离子交换键合相：阳离子官
14、能团：SO3H磺酸基、 COOH竣基等。阴离子官能团：令R4N +季钱基、氨基等。（由于硅胶基质 的键合相只能在pH = 275的范围内使用，而离子交换色谱要求有更宽的pH范 围,因此其基质现在仍主要使用聚苯乙烯和二乙烯苯。）流动相： 反相色谱最常用的流动相及其冲洗强度如下：H20v甲醇v乙月青v乙醇v丙醇v异丙醇 四氢咲喃最常用的流动相组成是甲醇H20”和“乙月青H20” ,由于乙月青的剧毒 性，通常优先考虑”甲醇-H2CT流动相。反相色谱中，溶质按其疏水性大小进行 分离，极性越大疏水性越小的溶质，越不易与非极性的固定相结合，所以先被洗 脱下来。流动相的pH对样品溶质的电离状态影响很大,进而
15、影响其疏水性，所 以在分离肽类和蛋白质等生物大分子的过程中，经常要加入修饰性的离子对物 质，最常用的离子对试剂是三氟乙酸（TFA ）,使用浓度为0.1% ,使流动相的pH 值为2-3,这样可以有效地抑制氨基酸上母麦基的离介，使其疏水性增加，延长 洗脱时间,提高分辨率和分离效果。完全离子化的溶质,例如强酸或强碱,其 在反相键合相上的保留值很低，近于死时间流出，不能进行分析。根据离子对色 谱的原理将一种与样品离子电荷（A+ ）相反的离子（B力称为对离子,加入 到流动相中，使其与样品离子结合生成弱极性的离子对，即中性缔合物，从而增 强了样品的疏水性，加大了保留值,改善了分离效果。正相色谱常用的流动相及其冲洗强度的顺序是：正己烷乙醛v乙酸乙酯异丙醇其中最常用的是 正已烷，虽然其价格较贵，但80%的顺、反和邻位、对位异构体仍然要用正相色 谱来进行分离。流动相的选择原则是：样品易溶,且溶解度尽可能大。化学 性质稳定，不损坏柱子。不妨碍检测器检测，紫外波长处无吸收。粘度低, 流动性好。易于从其中回收样品。无毒或低毒，易于操作。易于制成高纯 度，即色谱纯。废液易处理，不污染环境。）；主3紫外分光光度法简介紫外分光光度法的
