生物科学实验论文_图文

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1、拟盘多毛孑包菌生物学特性的初步研究摘 要:对引起日本珊瑚树叶斑病的拟盘多毛抱(Pestalotiopsis eriobotryfolia ), 进行不同氮源、不同温度及在一定温度下不同时间菌丝的生长情况的生物学特性 研究。结果表明:以硝酸钾和硝酸钠为氮源、25弋该菌长势较好。不同时间对菌 落生长的情况进行研究表明:该菌在4d生长速率达123mrtd , 8d生长速率达8. 78rwfd ,在16d后长出黑色的分生泡子泡子。关键词:拟盘多毛泡菌;生物学特性日本珊瑚树(Viburruun odomfissinmm乂名法国冬青,是一种很理想的绿化植物。叶革质椭圆形至矩圆形,生长快速,对煤烟和有毒气体

2、具有较 强的抗性和吸收能力。近年来日本珊瑚树作为观赏植物在学校、公园、厂矿和居 民小区等地大面积种植,但因种植的时间较长、面积较广,因此最近出现许多对 FI本珊瑚树的病害报道。在贵州省遵义市的三阁公园、风凰山公园等地发现一 种引起日本珊瑚树的致病菌,为了对此病害进行防治,我们对其进行分离,纯化 及分子生物学鉴定,最终确定该致病菌为拟盘多毛他菌(Pestalotiopsis eriobotryfolia ) 2-11,在此基础上对不同氮源、不同温度及在一定温度下不同时间 菌丝的生长情况进行生物学特性研究。1材料和方法11材料1.1.1菌株来源及材料供试菌株:由引起对引起FI本珊瑚树叶斑病的拟盘多

3、毛WPestalotiopsis eriobotryfolia)PSA培养基:马铃薯200g,蔗糖20g,琼脂20g,水lOOOmLo查氏培养基(Czapek):配方蔗糖30g,硝酸钠3g,磷酸氢二钾lg,氯化钾0. 5g,硫酸亚铁0. Olg,琼脂20g, 7水硫酸镁0. 5g,水1000ml?。1.2方法 1. 2.1不同温度对拟盘多毛抱菌菌丝生长的影响用5mm的打孔器打取培养3d的同一菌龄的供试菌种,接于PSA平板中央, 置于5、15、20、25、30、35、40 C共7个温度梯度下培养,观察菌落状况,6d后用十字交叉法测量菌落直径,计算生长速率(每个处理3次重复,下同)。1.2.2不同

4、氮源对盘多毛砲菌菌丝生长的影响以查氏培养基(Czapek)为基础培养基,分别以不同氮源(硝酸钠、草酸钱、硝酸钙、硫酸鞍、硝酸钾、硝酸钠、L-精氨酸、L苯并氨酸)等量的替换基础培养基中的氮源,制成不同氮源的平板,同时以不加氮源作为CKo 25 C培养, 6d后观察菌落情况,用十字交叉法测量菌落直径并计算生长速率。1. 2. 3不同时间对拟盘多毛砲菌丝的影响将供试菌株接种到PSA平板上,置于25C下培养,分别于2d、4d、8d、 16d、32 d观察菌落情况。2实验结果2. 1不同温度对拟盘多毛孑包菌丝生长的影响在不同温度下菌株在5-30C下菌丝都能生长,最适生长温度15-25C,其中 25C生长

5、较好,35C以上菌丝几乎停止生长(如表1 ,图1)。表1不同温度对拟盘多毛砲菌丝的影响温度厂C菌落平均直径mm菌落的生长速率(mm/d)菌落特性57.52. 95+1519.53.25+2049. 18. 18+2557.89.03+3053.38.88+3515.72.61+4050-注:“卄+”表示菌落致密:表示较致密:“+”表示稀疏:一表示不生长。(下同)图1不同温度对拟盘多毛抱菌丝的影响2- 2不同氮源对拟盘多毛抱菌丝的影响实验结果表明该菌种以硝酸钾为氮源和硝酸钠为氮源是生长最适应,在缺少氮源的培养基上几乎接近于不生长。生长情况如下(表2,图2 )对草硝硫硝斤表2不同氮源对拟盘多毛胞菌

6、丝的影响菌落平均直径mm菌落的生长速率(mm/d )菌落特性-66I17. 12.85+22.93.81+264.3354. 59. 08+45.3L-粘:氨酸34. 1I厂苯丙氨酸31.97.55. 685.31图2不同氮源对拟盘多毛鞄菌丝的影响2. 3不同的培养时间对拟盘多毛砲菌丝的影响由表3,图2可知,菌落初期为乳白色,到8d后菌落为灰白色并冇黄色物 存在(显微镜下未观察到分生砲子),到16 d后菌落表而就会出现黑色的小斑点 (显微镜下观察到分生抱子),32 d小斑点差不多部满菌落表而。表3不同的培养时间对拟盘多毛抱菌丝的影响培养时间d菌落平均直径mm菌落的生长速率(mm/d)菌落特性2

7、168+44912.3+8708. 78+16704. 38+32702. 19+图3不同的培养时间对拟盘多毛砲菌丝的影响3讨论从日本珊瑚树上分离纯化的致病菌拟盘多毛他菌Pestalotiopsis eriobotryfolia )作为供试菌株进行不同氮源、不同温度及在一定温度下不同时间 菌丝的生长情况的生物学特性,研究表明以硝酸钾和硝酸钠为氮源的培养基、 25C下菌株长势较好。菌株在PSA培养内16d 出分生抱子,菌落颜色由乳口色 逐渐转变为灰白色,且有黄色物质产生(分生砲子)。为对引起日木珊瑚树叶斑 病的进行防治,且不影响H本的珊瑚作为观赏植物的美观及避免喷施过多农药引 起对空气的污染,因

8、此对该致病菌的防治一般在喷施一定化学药剂防治的基础上 对其进行农业防治,而木实验对致病菌拟盘多毛他Pestalotiopsis eriobotiyfolia ) 生物学特性的研究为农业防治提供一定的理论基础。参考文献1JXU B S. Flora Reipablicae Popalaris SinicaeM. Vol 72. Beijing:Science Press. 1988:57-582 王忠文,陈卫平,韦刚,等中国拟盘多毛砲属的新组合种J.广西农业生物科学,2002, 21(3) : 151- 156.3 陈育新,韦刚,陈卫平.拟盘多毛砲属真菌的新种J 菌物系统,2002, 21( 3

9、): 316- 323.4 陈育新,韦刚,陈卫平,等.拟盘多毛抱屈的三个新种J.广西农业牛物科学,2003, 22(1) : 1-4.5 肖仲久,李小霞,许艾斌,等.贵州省铁树新病害叶枯病病原菌生物学特性研究J北方 园艺,2012, (16): 117-120.6 曾大兴,谢和,吴龙英几种分离鸡枫菌的方法研究Jl.lll地农业生物学报.1999, 18 ( 2):87-89.7 强胜.马唐牛防真菌弯殖霉(Curvulana sp.)菌株QZ-200的牛物学特性研究J植物 病理学报,2003, 33(6):524-529.8 方中达.植病研究方法(3版)M.北京:农业出版社,1998, 179-181.

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