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1、手足口病病原的荧光PCR法检测及其临床特点摘要：目的 探究手足口病病原的PCR检测方 法及临床特点。方法选取我市2012年1月2013年 1月确诊为手足口病的患儿40例作为研究对象，取其 血液40例及大便标本40例。应用荧光PCR检测法分 别对标本中肠道病毒筛选、柯萨奇病毒中A组16型 (CVA16)、肠道71型病毒(EV71)进行鉴别，并归 纳分析其临床表现。结果40例大便标本检测显示，8 例CVA16阳性，10例EV71阳性,20例EV-COM阳性。 CVA16及EV71阳性的患儿在热程、体温、住院时间、 尿素氮、血肌酉干、AST、ALT比较，差异无统计学意义 (P0.05)。结论对疑似者
2、发病早期的大便使用荧光 PCR检测，可及时诊断出病原。关键词：手足口病；荧光检测；临床特点手足口病(HFMD)是学龄前儿童中常见的一种急 性传染性疾病，属于我国法定的报告管理型丙类传染 病。病情严重者会导致脑炎、神经源肺水肿、无菌性 脑膜炎、心肌炎和急性迟缓麻痹等。手足口病的主要 致病病毒是肠道71型病毒(EV71)和柯萨奇病毒中A 组16型(CVA16)o部分患者在感染手足口病病毒后， 病情进展迅速，患者的死亡速度快1。笔者特于2012 年1月2013年1月选取我市收集的80例血液、大 便样本，应用PCR检测技术进行研究，取得较好的成 效，现将结果报告如下。1资料与方法1.1 一般资料 选取
3、我市2012年1月2013年1 月收入确诊为HFMD的患儿40例作为研究对象，取其 血液及大便标本共80例。手足口病的诊断参照我国卫 生部2011年修订的手足口病的预防控制指南2。年 龄1.113.1岁，平均（4.51.1）,发病至入院时间 0.68.1d,平均（4.10.7） d。其中，发热者40例， 口腔溃疡者38例，手部皮疹者40例，足部皮疹者39 例，臀部皮疹者13例。1.2仪器、试剂和检测方法1.2.1主要仪器及试剂 选择SLAN实时荧光定量 PCR检测仪器、离心机、金属浴等。使用由江苏硕世 生物科技有限公司提供的肠道病毒71型核酸检测试 剂盒（PCR-荧光探针法）、柯萨奇病毒A16
4、型核酸检测 试剂盒（PCR-荧光探针法）。1.2.2操作方法 所有患儿均在入院当日抽取4ml 静脉血和10g大便标本，静脉血置放在无菌真空管中, 分离血清后，大便灭菌后置入密闭盒中，两组标本均 于零下20C储存备用。对血清及大便标本进行RNA 提取及扩增或，由经培训的专业人员严格按照相关试 剂及仪器的使用说明书进行操作。1.3观察指标 对患儿入院及出院时的肌红蛋白、 肾功能、肌钙蛋白、肝功能及血常规等进行检测。1.4统计学处理 数据的收集与处理均由我单位数 据处理中心专门人员进行，保证数据真实性与科学性。 初步数据录入EXCELC2003版)进行逻辑校对与分析， 得出清洁数据采用四方表格法进行
5、统计学分析，分析 结果以P综上所述，HFMD是常见肠道疾病，其临床常见表现为手足臀皮疹、发热和口腔溃疡。临床 中对HFMD的病原检测可使用荧光PCR法，该方式应 用于早期检测，可及时准确地诊断出其病原，值得进 一步推广及应用。参考文献：1 吴茜，温柏平，杜曾庆，等.2009至2010年昆 明儿童手足口病病原及流行特点分析J.中国小儿急 救医学，2012, 19 (5)： 529-530.2 李小青,闫晓莉，史艳萍，等.陕西省26例危 重型手足口病的病原学特点及临床分析J.中国小儿 急救医学，2011, 18 (6)： 521-524.3 胡海？，乔蓉，沈琦,等.2009-2011年上海市手 足
6、口病病原学检测及其临床特点分析J .中华实验和 临床病毒学杂志，2012, 26 (5)： 341-343.4 Hu, X，Zhang, Y.，Zhou, X. et al.Simultaneously typing nine serotypes of enteroviruses associated with hand, foot, and mouth disease by a GeXP analyzer-based multiplex reverse transcription-PCR assayJ Journal of Clinical Microbiology, 2012, 50(2)
7、： 288-293.高宇，汪洪姣，金宛宛，等.24例皮损不典型 的重症手足口病临床及病原学研究J.中华皮肤科杂 志，2011, 44 (2)： 80-83.6 Hu, X.,Zhang, Y,Zhou, X. et al.Simultaneously typing nine serotypes of enteroviruses associated with hand, foot, and mouth disease by a GeXP analyzer-based multiplex reverse transcription-PCR assayJ Journal of Clinical Microbiology, 2012, 50(2)： 288-293.7 廖国东，吴文锋，许桂锋，等.实时荧光PCR技 术在手足口病检测中应用J.中华实用诊断与治疗杂 志，2010, 24 (11)： 1097-1098.8 段忠辉，李侗曾，杜晓菲，等.399例重症手足 口病的实验室检查及临床特征分析J.中华实验和临 床感染病杂志(电子版)，2012, 6 (6)： 541-544.编 辑/申磊
