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细菌形态、放线菌形态观察(可编辑)

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文档ID:205424075
细菌形态、放线菌形态观察(可编辑)_第1页
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细菌形态、放线菌形态观察实验材料和方法:材料:菌种Staphylococcus arueusEscherichia coliBacillus subtilisProteus vulgaris细黄链霉菌(Streptomyces microflavus)其他显微镜、载玻片、盖玻片、染色试剂等1、 细菌特殊结构的观察(根据实验指导提供的方法)细菌芽饱细菌鞭毛细菌英膜2. 细菌形态观察(活体染色)制片:在载玻片上滴一滴无菌水,取菌,涂片,制成菌悬液,盖上盖玻片后用吸水纸吸 去水后观察观察:低倍镜高倍镜3. 放线菌的观察玻璃纸观察法:观察时,揭下玻璃纸,固定在载玻片上直接镜检,这种方法既能保持放 线菌的日然生长,也便于观察不同生长期的形态特征在载玻片上滴一滴水后,从培养皿 中剪取一小块玻璃纸,菌面朝上放于载玻片上,盖上盖玻片后观察制片法:在载玻片上滴一滴水后,从培养皿玻璃纸下面的培养基中取一小块菌放于载玻 片上,然后取一盖玻片盖上后轻轻压一下后、再放上一片滤纸压一下,再观察印片法:取一洁净载玻片置于火焰上微热后,盖在菌苔上,轻轻按压,使培养物(气丝、 泡子丝或泡了)粘附(“印”)在后一块载玻片的中央,有印迹的一面朝上,通过火焰2〜3 次固定。

实验结果:1、 大肠杆菌和变形杆菌都是周身鞭毛的细菌若在正常情况下,经染色后菌体呈深褐色, 鞭毛呈褐色但是实验当天我们并为观察到鞭毛2、 芽泡杆笛经染色后,我们可以观察到呈绿色的芽泡,其中菌体是红色的芽泡一般长在 菌体中间,(有的菌体长在两端,但不是本实验的情况)也有出芽后的芽泡若不染色,也 可观察到芽抱,芽地在显微镜下较菌体光亮3、 木实验没有采用标准菌株褐球固氮菌,而选取了日己本组培养基内较水亮的菌株作为观 察对象,并为观察到英膜4、 本实验采用的实验材料为细黄链霉菌,即链霉菌属中的一种放线菌,放线菌有三种不同形 态的菌丝,分别是基内菌丝(营养菌丝)、气生菌丝、泡子丝其中在显微镜下观察下,基 内菌丝色浅、较细,气生菌丝色深、较粗,泡子丝呈现一串串的念珠状,粗细程度似气生菌 丝下图为手绘三种菌丝图:5、观察活动细菌的运动中,我们选用变形杆菌为实验材料,在光镜下,可以看到呈杆状的 细菌左右晃动或是逆水流游动的景象分析:1、 在取菌落到载玻片上的蒸僵水中时,注意不能搅动,轻轻晃动即可因为鞭毛属于细菌 的附属结构,比较脆弱,若用力搅动,会使其断裂,从而无法观察鞭毛是细菌的运动“器官”,直径通常是0.01〜0.02 um。

这一尺度已超过了显微镜的分辨力, 因此需要对其染色才能观察到在鞭毛染色过程中,媒染剂吸附并沉积在细菌鞭毛上,使其 直径加粗,从而能在光学显微镜下被观察到实验过程中可能在晃动细菌过程中或是染色过 程中操作不当,没观察到鞭毛判断一个未知的菌落的细菌是否含有鞭毛,有两种方法:1、菌落较薄,且扩散得大;2、通 过接种穿刺的方法,如果在接种线周围比较浑浊,则可能含有带鞭毛的细菌2、 芽泡是一•些细菌长到一定阶段在菌体中形成的休眠体,壁厚,通透性低,不易着色所 以本实验选用着色能力强的染色剂孔雀绿对其着色,该染色剂在加热调节下能进入到菌体和 芽泡中,进入菌体的染料经水洗后脱色,而芽抱内的染料难以洗脱,故使芽抱染上色3、 英膜是细菌细胞外的一层胶状粘液物质,其成分为多糖、糖蛋白或多肽,与燃料的亲和 力低通常采用衬托染色法染色,使菌体和背景之间形成一透明圈本实验采用红墨水作为染料,使其菌体着色在显微镜下菌体颜色应该比较暗,在周围呈现 一圈明亮的透明圈即为荚膜4、 观察放线菌菌丝时注意调节光线的强弱基内菌丝(substrate mycelium):也称营养菌丝, 生长于培养基内,主要功能是吸收营养物质和排池代谢废物,营养菌丝一般无隔膜,内含有 许多核质体,直径约为0.2-0.8 U m,但长度差另lj很大。

气生菌丝(aerial mycelium):营养菌 丝发育到一定时期,长出培养基外伸向空间的菌丝称为气生菌丝它叠生于营养菌丝上,以 至可覆盖整个菌落表面,在光学显微镜下菌丝较粗、颜色较深,直径约为1-1.4 u m0泡 子丝(sporophore):放线菌生长发育到一定阶段,在其气生菌丝上分化出可形成饱了的菌丝, 该菌丝称为抱了丝泡了丝的形状和在气生菌丝上的排列方式,随菌种而异,有直形、波曲、 螺旋状等之分泡了丝发育到一定阶段可形成泡了由于泡了含有不同色素,成熟的抱了堆 也表现出特定的颜色,而且在一定条件下比较稳定故也是鉴定菌种的依据之一放线菌观察时不同方法的侧重点:玻璃纸观察法可•以看到三种菌丝,但是基内菌丝和气生菌 丝较多,抱了丝不常见;制片法主要用来观察基内菌丝;印片法主要用来观察气生菌丝,但 也有一部分的泡子丝,因为泡子丝长在气生菌丝上,由气生菌丝分化而来5、 任何染剂,都对细菌有一定的杀伤力因此,在观察细菌运动的实验中,我们并为对细 菌染色细菌的运动可分为布朗运动和鞭毛运动,其中前者只是在原处左右摆动。

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