《论文宫颈癌不同临床分期放疗抗拒与缺氧诱导血管新生的关系定稿》由会员分享，可在线阅读，更多相关《论文宫颈癌不同临床分期放疗抗拒与缺氧诱导血管新生的关系定稿（6页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、宫颈癌不同临床分期放疗抗拒与缺氧诱导血管新生的关系作者：戴饪辉，李小娟作者单位：河北省河北北方学院附属第一医院放射科【摘要】目的：探讨不同临床分期的宫颈癌放疗抗拒与肿瘤缺氧诱导血管新生的关系及 意义。方法 选取91例不同临床分期的宫颈鳞癌放疗患者，采用免疫组织化学SP法检测乏 氧细胞诱导因子(HIF-1 )、血管内皮生长因子(VEGF),并用CD 105标记新生微血管密度 (MVD)。结果 随肴临床分期的加重，肿瘤的放疗抗拒增大。VEGF、HIF-1在宫颈鳞癌lib IV期放疗后抗拒的阳性表达率升高，差异有统计学意义(P 0.05) = HIF-1、VEGF与MVD在 不同临床分期之间存在正相
2、关，且随临床分期的加重，MVD的计数逐渐增加，差异有统计 学意义(P0.05)。 随看宫颈鳞癌的临床分期加重，肿瘤的放疗抗拒加重，HIF-1、VEGF、 MVD的表达与之相关，可作为宫颈鳞癌放疗后判断预后的可靠依据。【关键词】肿瘤血管新生;HIF-1 VEGF;放疗抗拒Abstract Objective To investigate the relationship and significance between radiotherapy resistance and angiogenesis induced by hypoxia in patients with cervical squ
3、amous cell carcinoma (SCC) at different clinical stages.Methods 91 patients with cervical SCC at different clinical stages who were treated by radiotherapy were enrolled in the investigation.The immunohistrochemical assay was used to detect the expressions of HIF-1 , VEGF, COX-2, and microvessel den
4、sity (MVD) was marked by CD 105.Results The radiotherapy resistance of cervical SCC was increased with the aggravation of clinical stages.The positive expression rates of VEGF, HIF-1 at II b-IV stages after radiotherapy were significantly increased (P0.05).There was a positive correlation between HI
5、F-1 , VEGF and MVD at different clinical stages, furthennore, the count of MVD was gradually increased with the aggravation of clinical stages, and there was a significant difterence (P 0.05).Conclusion The radio由erapy resistance of cervical SCC is increased with the aggravation of clinical stages.T
6、here is a positive correlation between HIF-1 , VEGF, MVD and different clinical stages, which can be used as the reliable evidence for evaluating the prognosis of patients with cervical SCC after radiotherapy.Key words tumor angiogenesis;HIF-l VEGF;radiotherapy resistance试验显示，肿瘤乏皱对放射治疗不敏感，而肿瘤血管的新生又可
7、促进乏皱细胞再皱合， 进而部分缓解肿瘤细胞缺氧情况，但其在放疗抗拒中所扮演的角色仍然不清楚1。乏氧细 胞诱导因子(HIF-1 )是缺氧条件下存在肿瘤内的一种转录因子，可直接调控血管内皮生长I大 子(VEGF)的表达，促进肿瘤血管新生。本试验采用免疫组化SP法检测HIF-1、VEGF, 用CD 105标记微血管密度(MVD),研究不同临床分期的宫颈鳞癌放疗抗拒与缺氧诱导肿瘤 血管新生的关系，以期为临床放疗宫颈鳞癌提供可靠依据。1资料与方法1.1 一般资料收集河北北方学院附属第一医院2007年1月至2009年12月宫颈鳞癌放疗病例91例， 年龄2668岁,平均年龄46岁;临床分期(FIGO)按20
8、00年标准,II b期34例,III期39例， IV期18例。放疗前均经病理证实。1.2方法患者均采用宜线加速器外照射全盆腔，总量DT50Gy/25次/5周(DT3035 Gy时中线遮挡4 cm);3周时，高剂量率内照射(铉-192), DT57Gy/次，1周1次/57周。A点剂量: 内照射2/3、外照射1/3;B点剂量内照射1/3,外照射2/3。放射治疗前，患者均经宫领取材 SP法免疫组化，病例医师阅片、核实、诊断。1.3试剂兔抗人HIF-1、VEGF多克隆抗体、抗CD105单抗体，SP法试剂盒，MVD计数法。1.4判定标准判定HIF-1位于细胞核，阳性细胞核染成棕黄色(图1);VEGF为细
9、胞质内，染成棕黄色(图 2);阳性细胞(10个高倍视野)的着色强度按无着色、黄色、棕黄色和棕褐色分别判为0、1、2、 3分，02分为低表达，视为阴性，36分为高表达，视为阳性。根据1979年WHO(World Health Organization)实体瘤近期客观疗效标准测量病变，完全缓解、部分缓解评定为放疗敏 感，无变化、恶化评定为放疗抗拒。MVD判定按照Weinder报道方法，高倍镜下(100)计数 CD 105抗体阳性的血管数目(图3),任何与附近微血管，肿瘤细胞及其他结缔组织明显分离 的福染的内皮细胞或内皮细胞簇均被认为是单个的微血管，计数5个100倍视野下的血管数 目，结果用平均数表
10、示。，图1 HIF-1表达于子宫颈鳞状细胞癌胞浆(SP200),图2 VEGF表达 于子宫颈鳞状细胞癌胞浆(SP 200),图3子宫颈鳞状细胞癌周围微血管密度(CD 105标记 100)1.5统计学分析 应用SPSS 16.0统计软件,计量资料以x.s表示,采用t检验，计数资 料采用2检验，相关性采用Spearman等级相关分析，P0.05为差异有统计学意义。2结果2.1 HIF-1与VEGF在不同临床分期宫颈癌中表达与疗效的关系在相同临床分期及不同临床分期的宫颈鳞癌中均存在放疗抗拒。随着临床分期的升高， 肿瘤的放疗抗拒增大。H1F-1在lib、III、IV阳性率分别是20.6%(7/34)、
11、30.7%(12/39)、 50.0%(9/18), VEGF在 II b、III、IV阳性表达率分别是 26.4%(9/34)、46.1%( 18/39)、66.7%(12/18),HIF-1、VEGF的表达在II b与III、II b与IV、III与IV比较差异有统计学意义(P0.05)。见表1。表1 HIF-1与VEGF在不同临床分期的宫颈鳞癌中的表达与疗效的关系2.2宫颈癌组织中HIF-1、VEGF的表达及MVDil数HIF-1、VEGF伴随临床分期的升高，MVD的计数逐渐增加，不同分期MVD计数差异 有统计学意义(P0.05)o HIF-1、VEGF阳性表达与MVD i|嗷呈正相关。
12、2.3三种临床分期中HIF-1表达、VEGF的表达与MVD计数的相关性HIF-1表达与VEGF的表达呈正相关性(r=0.648, P0.05), HIF-1表达与MVD计数呈正 相关性(r=0.547, P0.05), VEGF的表达与MVD计数呈正相关性(吐0.876, P0.05)。见表2。 表2HIF-1、VEGF在不同临床分期的宫颈鳞癌中的阳性表达与MVD的关系3讨论新生血管可为肿瘤生长提供营养和氧，但瘤体新生血管的生长与放疗疗效的关系并不明 确。研究显示，瘤体细胞乏氧可诱导HIF-1、VEGF的表达明显升高，可促进肿瘤血管新 生3。但同时乂有利于抑癌基因(p53)的突变4,促使肿瘤细
13、胞过度生长，并抑制了肿瘤细 胞的凋亡，有利于肿瘤细胞的生长和侵袭。因此，通过免疫组化染色监测HIF-1、VEGF 和Weinder的方法计数MVD可以作为判断宫颈鳞癌放射治疗后抗拒的重要分子标志物。HIF-1是缺氧条件下广泛存在于人体的一种异源二聚体转录因子5。VEGF是HIF-1最 重要的靶基因，其表达基因的转录起始点上游拥有HHIF-1结合位点，即缺氧反应元件 (HRE)6,7J, W与HIF-1形成转录起始复合物，从而启动利上调VEGF基因的转录与表达。 因而在缺氧环境下VEGF基因的表达上调，及其相应蛋白产物的增加，对放射治疗的抗拒 产生了重要影响。近年来，肿瘤分子生物学研究发现，VE
14、GF和血小板源性生长因子(PDGF)在肿瘤血管新 生中起重要作用8。这些新生的肿瘤血管可一为癌细胞的生长和侵袭提供营养和氧，同时电 离辐射对细胞的效应却又强烈地依赖于氧的存在，这就产生了一定的矛盾点;本课题组通过 免疫组化方法检测新生血管内上的CD105(CD105抗原是一种高度糖基化1型膜蛋白，它存 在于新生血管内皮中)来标记肿瘤MVD。本研究结果显示，HIF-1、VEGF随着宫颈鳞癌临 床分期的提高而表达增强，呈正相关关系(P 0.05),且HIF-1、VEGF对宫颈鳞癌放疗后的 肿瘤血管新生形成正调控。Weinder的方法计数MVD研究显示其同样也伴随着临床分期的 增高而增多。表明了不同
15、临床分期宫颈鳞癌患者细胞中HIF-1、VEGF的表达阳性率的不 同以及MVD的增高，可以影响宫颈鳞癌对放疗的敏化程度，进而影响宫颈鳞癌的放射治疗 效果9。综上所述，宫颈鳞癌是被证实具有多样血管生成能力的人体恶性肿瘤之一。本研究通过 监测缺皱诱导因子(HIF)通路的激活及HIF-1、VEGF的高表达，研究这些综合因素对宫颈 鳞癌血管的新生，及这些新生血管所提供的营养和氧对肿瘤的生长侵袭和细胞对放射线敏感 性关系的影响，进一步阐明不同临床分期的宫颈鳞癌对放射治疗的抗拒是不同的，缺氧诱导 血管生成与宫颈鳞癌抗拒之间确实存在相关关系。同时通过实验数据的结果分析说明，不同 临床分期的宫颈鳞癌确实存在着放射治疗敏感性的个体差异性，即需要解决肿瘤放射治疗个 体化的问题。也通过这些数据为设计和实施个体化放射治疗方案及放疗前进行个体肿瘤的放 射敏感性预测提供极大的帮助，可以进一步提高宫颈鳞癌放疗的疗效，提高宫颈鳞癌患者的 5年生存率和生活质量，为今后更深层次的分子生物学研究提供一个新视角。文章来源: 20801865
