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动物传染病学:传染性支气管炎

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传染性支气管炎 (Infectious Bronchitis,IB),传染性支气管炎(IB)是鸡的一种急性、高度传染性的病毒性呼吸道和生殖系统疾病; 临床症状:气管啰音、咳嗽、打喷嚏和产蛋下降; 发病率高死亡率低,但因影响产蛋量和品质而具有重要的经济意义一、历史 二、病 原 三、流行病学 四、临床症状 五、病理变化 六、诊断 七、防制 八、最新研究进展,一、历史,1930年Schalk和Hawn在美国北达科他州首先发现了鸡传染性支气管炎 1936年Beach和Schalm分离到了病原,确定了病因 1956年Jungherr等报道了Connecticut 株与Massachuetts 株能引起相似的疾病,但却没有交叉反应或交叉保护1962年Winterdield 和Hitchner 发现了肾型传染性支气管炎 我国于1972年由邝荣禄在广东首次报道了IB的存在 传染性支气管炎呈世界性分布 多种不同的血清型已经从不同的国家分离迄今已发现至少27个IBV血清型二、病原,传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis Virus,IBV)属于冠状病毒科冠状病毒属 病毒表面有特征性的杆状突起物;病毒有囊膜,呈圆型至多边形不定。

病毒主要存在病鸡呼吸道的渗出液中IBV电镜图,直径120nm, 纤突20nm.,不分节段的单股正链RNA,具有感染性,全长27.6kb,主要编码三种结构蛋白 纤突蛋白(S),裂解为S1和S2 (HI抗体和病毒中和(VN)抗体由S1诱导,病毒组织嗜性与S1有关) 膜蛋白(M) 核衣壳蛋白(N),形成RNP 小膜蛋白(E),少量,IBV结构组成,IBV结构模式图,对一般消毒剂敏感 56经15min,45经90min可以灭活大部分IBV病毒 -20 下长期保存不稳定,但-30 下可以存活24年 冬季户外可以存活56天IBV理化特性,S1蛋白决定了IBV的血清型,而S1蛋白具有很大的变异性,导致了IBV血清型众多 已有27个血清型,而且新的血清型还在出现 HI和VN进行血清分型 IBV S1基因的基因分型,以RFLP和序列同源性分析最为常用 单克隆抗体分型,针对纤突蛋白S1抗原表位IBV血清分型,血凝试验:不能直接进行血凝,需要1%胰酶或磷脂酶C在37处理3h IBV培养系统:鸡胚、原代和传代细胞IBV生物学特征,三、流行病学,鸡是感染IBV的唯一的禽类,并可导致发病 传染源:发病鸡和带毒鸡,由于感染动物的排毒期长,容易形成持续感染。

传播途径:飞沫、尘埃、饲料、饮水以及人员和设备的污染;经消化道感染 易感动物:各种龄期均易感,以雏鸡和产蛋鸡多发病 传播速度快,IB的潜伏期平均为3天,带毒时间长,康复后7周还可排毒四、临床症状,呼吸型:4周龄以下的幼鸡,喘气、咳嗽、打喷嚏、气管啰音和流鼻液;蛋鸡产异常蛋,蛋清稀成水样 肾病变型:2-4周龄的鸡,肉鸡呼吸道症状消失后,鸡群出现精神沉郁、羽毛松乱、饮水增加、白色稀便幼鸡有呼吸道症状和肾脏病变,成年鸡则表现为产蛋率下降,产畸型蛋 呼吸型和肾病型IB,在6周龄以内的鸡死亡率可达25%,6周龄以上的可以忽略不计喘气,呼吸型,病鸡精神沉郁,呼吸困难,产异常蛋,母鸡产蛋率急剧下降,降幅达3050%,恢复期出现畸形蛋,蛋壳变白、变软、变砂,蛋白稀薄如水,白色稀便,肾病变型,肾型传支病鸡呼吸道症状较轻微, 57天减轻,五、病理变化,呼吸型:鼻腔、喉头、气管、支气管有浆液性或干酪性渗出物;产蛋鸡输卵管变细变短,卵泡变形 肾病变型:肾脏外观呈斑驳的白色网线状,俗称“花斑肾”;严重病例中,尿酸盐还会沉积在其它组织表面 腺胃型(仅我国有报道):腺胃肿大、腺胃出血性溃疡肠型、肌肉型),气管内浆液性分泌物,呼吸型,气管内有干酪样渗出,卵泡充血、出血,输卵管囊肿、发育不全,输卵管狭小、闭塞,肾脏肿大,对照,肾病变型,肾脏外观呈斑驳的白色网线状,腺 胃 型 传 支,六、诊断,根据临床病史、病理变化、IBV抗体滴度升高、检测抗原的血清学方法以及病毒分离等可以做出诊断。

干扰试验:IBV在鸡胚中干扰NDV增殖 进行血清型和基因型鉴定 人工发病1.鉴别诊断,新城疫(ND):临床表现比IB严重,强毒感染可见神经症状,产蛋下降幅度要大于IB 喉气管炎( ILT ) :传染比IB慢,但呼吸道症状比IB严重 传染性鼻炎(IC)(副鸡嗜血杆菌):面部肿胀2.病毒分离鉴定,直至出现鸡胚死亡,IBV接种鸡胚后导致蜷曲矮小化,正常胚,感染胚,3. IBV检测,组织切片/组织触片免疫荧光或免疫过氧化物酶 鸡胚增殖病毒通过AGPT(琼扩)鉴定IBV的存在 当IBV的抗原量低时,用绒毛尿囊膜的切片或细胞沉积物进行免疫荧光或免疫过氧化物酶检测 RT-PCR,4.分子诊断,RT-PCR 可以通过型特异性引物进行基因型鉴定 PCR产物测序也可以进行基因型鉴定七、防制,弱毒苗:用于肉鸡的免疫以及种鸡和蛋鸡的首免 灭活苗:种鸡和蛋鸡开产前使用 最常用的疫苗株是Massachusetts株(M41)、H120株和H52株 如果当地有新的血清型流行,就应该在疫苗中加入流行血清型(二价苗)1.疫苗种类,2.免疫程序,肉鸡,滴鼻点眼H120弱毒株,H52弱毒株加强免疫一次,5-7日龄,2530日龄,蛋鸡和种鸡,产前灭活疫苗肌注加强免疫一次,滴鼻点眼H120弱毒株,H52弱毒株加强免疫一次,5-7日龄,2530日龄,?, IB和ND的活苗经常联合使用,如果IBV组分过量,就会干扰NDV的免疫应答。

3.疫苗使用中的问题,八、最新研究进展,S基因的点突变、插入、缺失或重组是IBV产生新的血清型或变异株的主要原因,且主要集中在S1蛋白上 S1蛋白的高变区与中和表位有关 抗原决定簇的特异性构像依赖于其中的某些氨基酸,单个氨基酸的改变都可能产生1个新的变异株1.血清型的分子机制,2. 诊断方法研究进展(ELISA),抗原检测 抗体检测,亚单位疫苗:大肠杆菌表达、酵母表达、杆状病毒表达S1基因 基因工程活载体疫苗:表达S1和S2蛋白的鸡痘病毒重组疫苗,检测到了IBV的中和抗体(Tomley) DNA疫苗:将S1蛋白基因作为免疫原性基因,构建质粒,结果表明诱导了IBV的体液和细胞免疫3. 疫苗研究进展,谢谢!,4.血清学检测,病毒中和试验(VN) 血凝抑制试验(HI) 单抗进行阻断或竞争ELISA,琼脂扩散试验(AGPT) 酶联免疫吸附试验(ELISA) 免疫荧光(IF),群特异性 (各血清型),一周采样检测IgM,两周采样检测IgG,血清转化,型特异性 (单一血清型),2. 诊断方法研究进展(ELISA),用单抗进行竞争ELISA,特异性与VN相当 IBV包被酶标板 被检血清 加入血清型特异的单抗 阻断效应与血清中抗体浓度成正比,交叉反应与交叉保护 血清分型与基因分型 特异性 群特异性与型特异性 气管环培养 持续感染 中和表位与中和抗体,思考题,。

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