第十八章 支原体Mycoplasma,第一节 概述,支原体（Mycoplasma）,缺乏细胞壁，呈高度多形性 能通过滤菌器 能够在无生命培养基中生长繁殖的最小原核细胞型微生物,柔膜体纲,支原体目,肺炎支原体，人型支原体，生殖支原体，穿透支原体，发酵支原体，梨支原体等,解脲脲原体,分类,支原体科,无胆甾原体科,螺原体科,支原体属,脲原体属,形态染色,细胞个体小，直径0.3-0.5 mm 无细胞壁，只有细胞膜，呈高度多形性 革兰氏染色阴性，不易着色细胞膜结构,细胞膜厚度7.5-10 nm，有外、中、内三层 内外两层为蛋白质及多糖 中间层为含胆固醇的脂质成分 凡能作用于胆固醇的物质，如皂素、毛地黄甙、二性霉素B等均能破坏细胞膜，使支原体死亡 有的支原体有荚膜、特殊的顶端结构等特殊的顶端结构,肺炎支原体、生殖支原体、穿透支原体等具有特殊的顶端结构，呈烧瓶状 顶端结构具有黏附于宿主上皮细胞表面的作用，与支原体的致病性有关培养特性,营养要求： 高于一般细菌，培养基中需加入血清以提供胆固醇与其它长链脂肪酸，多数支原体还需添加酵母浸液、组织浸液、核酸提取物和辅酶 pH： 适宜pH为7.6-8.0，低于7.0时易死亡。
但解脲脲原体最适pH为6.0-6.5培养特性,氧气： 兼性厌氧，但大多数寄生性支原体在37时在微氧环境（含5% CO2和90% N2）中生长最佳 繁殖方式： 通常以二分裂繁殖，也可以出芽、分枝、断裂等方式增殖菌落形态,支原体生长缓慢，3-4 h繁殖一代在固体培养基中培养48-96 h 形成菌落 在琼脂含量较少的固体培养基上，2-7天后形成“荷包蛋”样菌落（“fried egg” colony） 菌落中心致密隆起，深入琼脂，周边为较薄的透明颗粒区支原体典型菌落,液体培养基： 清亮，用颜色变化单位（CCU）表示肺炎支原体培养结果 1. 培养基对照；25. 肺炎支原体培养第25天,1 2 3 4 5,支原体与细菌L型,支原体有许多特性与细菌L型相似,无细胞壁，呈多形性 能通过滤菌器 对青霉素不敏感，对低渗敏感 “荷包蛋”样菌落 临床表现相似，为间质性肺炎等支原体与细菌L型的区别,生化反应,抗原结构,支原体抗原结构主要来自细胞膜，由蛋白质和糖脂组成 不同支原体均有其特有的抗原结构，交叉较少，在鉴定支原体时有重要意义抗原结构 补体结合试验可检测糖脂类抗原 ELISA试验可检测蛋白质类抗原 血清抗体鉴定： 生长抑制试验（growth inhibition test, GIT） 代谢抑制试验（metabolic inhibition test, MIT）,抵抗力,抵抗力比细菌弱，易被脂溶剂及常用消毒剂杀灭，对紫外线、低渗、干燥及热敏感。
对醋酸铊、结晶紫和亚碲酸钾抵抗力强 对影响细胞壁合成的抗生素不敏感对干扰蛋白质合成的抗生素和阻碍DNA复制的药物敏感致病性,黏附素、荚膜、毒性代谢产物、超抗原、其他：如穿透支原体黏附侵入CD4T细胞引起损伤支原体主要寄生于细胞外，一般为表面感染，大多不侵入血液及组织细胞内致病物质:,固有免疫 适应性免疫 体液免疫： 抗膜蛋白的抗体包括IgM、IgG和SIgA 细胞免疫： 主要是特异性CD4Th1 细胞分泌细胞因子免疫性,以体液免疫为主，细胞免疫也起作用第二节 主要病原性支原体,肺炎支原体 Mycoplasma Pneumoniae 解脲脲原体 Ureaplasma Urealyticum 穿透支原体 Mycoplasma Penetrans,肺炎支原体,菌体大小为0.2-0.3 mm，呈短细丝状,具有特殊的顶端结构位于该结构表面的P1蛋白，是肺炎支原体与宿主细胞膜受体结合的部位P1表面蛋白（170 kDa）和P30（32 kDa）为主要的黏附蛋白肺炎支原体,生物学特性,初次分离应在含血清和新鲜酵母浸出液的培养基中，一般10天左右长出菌落，多次传代后生长加快 产生过氧化氢和溶血素 能发酵葡萄糖，不分解精氨酸与尿素。
致病性与免疫性,主要侵犯呼吸系统 传播途径：通过飞沫传播 夏末秋初为多发季节，以5-20岁青少年发病率最高 流行特点为间歇性每4-6年出现地区性流行，流行持续数月至一年所致疾病,引起的病理改变以间质性肺炎及急性细支气管炎为主，又称原发性非典型性肺炎（primary atypical pneumonia） 临床以咳嗽、发热、头痛、咽痛和肌肉痛为主 有时有呼吸道外并发症，如皮疹、心血管和神经系统症状免疫性 血清特异性IgM、IgG及SIgA和致敏的淋巴细胞； 呼吸道局部黏膜产生的SIgA对防止再感染有较强 保护作用； 出现IgE介导的I型超敏反应，促使哮喘病急性发作致病性与免疫性,血清学检查 冷凝集试验 用病人血清与人O型血红细胞或自身红细胞混合，4过夜时可发生凝集，而在37时凝集又分散解离开，但仅50左右的患者才出现阳性此反应为非特异性 快速诊断 ELISA：检测P1和P30蛋白mAbs PCR：从痰标本中检测16S rRNA或P1蛋白基因微生物学检查,PCR,分离培养 37，1-2周,典型菌落,鉴定,生化反应,形态染色,GIT, MIT,标本,DNA测序,ELISA,防治原则,疫苗的预防效果尚无定论。
治疗首选大环内酯类抗生素 青霉素类及头孢类抗生素无效人型支原体,（一）生物学性状 分解精氨酸最适pH7.27.4； 固体培养基上形成200300 m的菌落，呈典型 的“油煎蛋”状 （二）致病性 寄居于泌尿生殖道，通过性接触传播，可引起附睾炎、盆腔炎、产褥热等； 新生儿感染则可引起肺炎、脑炎和脑脓肿三）微生物学检查法,人型支原体在液体培养基中的生长 左图：培养基对照； 右图：人型支原体分解精氨酸产碱，酚红指示剂变红病原体检测 液体和固体培养基接种； 特异抗血清做GIT与MIT进一步鉴定核酸检测 PCR检测： 检测16S rRNA基因此法快速、特异，适宜于大批量标本检测预防： 加强宣传教育，注意性卫生，切断传播途径 治疗： 人型支原体对大环内酯类抗生素不敏感，对红霉素（100 mg/L）不敏感； 可用四环素类、喹诺酮类药物治疗，但有耐药株产生四）防治原则,生殖支原体,生殖支原体基本形态为烧瓶状，能发酵葡萄糖使培养基变酸； 培养基上不生长，须在无醋酸铊SP-4培养基生长但缓慢，菌落呈典型的“油煎蛋”状； 顶端结构有黏附素MgPa，140 kDa，能黏附在人泌尿生殖道上皮，主要引起尿道炎； 较难培养，生长慢，不适宜于常规实验室分离培养。
实验室最好的诊断方法是核酸检测穿透支原体,1991年Lo首次从1例艾滋病患者尿中分离出一种新支原体，其形态为杆状或长烧瓶状，一端为顶端结构，具有黏附与穿入的作用穿透支原体电镜照片,穿透支原体黏附并穿入红细胞,穿透支原体发酵葡萄糖，分解精氨酸，不分解尿 素，在SP-4培养基上生长形成典型的“油煎蛋” 状菌落； 顶端结构能黏附于人红细胞、单核细胞、CD4T 淋巴细胞及人尿道上皮细胞，导致宿主细胞受损 或死亡； 可能是艾滋病发病的一个辅助因素解脲脲原体,单个或成双排列，直径0.05-0.3 mm，丝状体少见 固体培养基中菌落小，直径15-60 mm生物学特性,培养需要胆固醇和酵母浸液 pH要求较低，最适pH为6.0-6.5 具有尿素酶，能分解尿素产生氨和CO2，使培养基pH升高 不分解糖类和精氨酸致病性,传播途径：性传播、垂直传播 引起非淋菌性尿道炎（non-gonococcal urethritis，NGU）、前列腺炎、附睾炎等泌尿生殖道疾病 还与自然流产、早产、死胎和不孕有关微生物学检查,PCR,液体培养基（含有酚红和尿素）,标本,典型菌落,鉴定,生化反应,GIT，MIT,阳性（红色）,阴性（黄色）,固体培养基 37、5%CO2、90%N2,DNA测序,微生物学检查与防治原则,解脲脲原体病原体检测与防治原则与人型支 原体相同； 核酸检测可从患者泌尿生殖道标本中检测尿 素酶基因、多带抗原基因和16S rRNA基因。
防治原则,加强宣传教育，注意性卫生，切断传播途径 治疗选用四环素类、喹诺酮类药物，但有耐药株产生思考题,何为支原体？主要致病性支原体有哪些？各引起何种疾病？ 支原体与L型细菌的主要区别有哪些？,。