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1、 T7肽对肝癌移植瘤生长的抑制作用 2东营市东营区人民医院 山东东营 257000【摘要】目的：研究T7肽抑制肝癌裸鼠肿瘤生长的作用机制。方法：1建立HepG2肝癌裸鼠移植瘤模型，随机分为对照组，T7肽(4.4mg/kg/d)组，5-FU(20 mg/kg)组，每组10只，连续干预19天，观察T7肽对肿瘤生长的抑制作用。2.采用免疫组织化学法检测各组肿瘤组织CD34蛋白水平表达。结果：5-FU组，T7肽组与对照组肿瘤重量比较差异有统计学意义（P0.05）。两个给药组IR分别为52.1%、36.6%。对照组、5-FU组、T7肽组的MVD计数分别为8.41.8、4.01.2、5.91.4。T7肽组
2、MVD与对照组相比，差异有统计学意义（P0.05）。结论：T7肽可抑制HepG2肝癌组织血管生成，从而抑制肝癌的生长，降低肿瘤重量和体积。【关键词】T7肽；血管生成；微血管密度肿瘤抑素在研究肺-肾出血综合征时被发现1-2，它对肿瘤细胞具有明显抑制作用，具有强烈的抗血管生成和促进内皮细胞凋亡的活性1,3。研究发现T7肽为Tum5内部的74-98位氨基酸残基片段。本研究建立人肝癌细胞HepG2肝癌裸鼠移植瘤模型及肿瘤抑制实验的研究，探讨肿瘤抑素T7肽抗肿瘤生长的作用机制。1方法1.1细胞培养、动物模型的建立及分组HepG2肝癌细胞置于DMEM高糖基础培养液中，并添加10胎牛血清(FBS)、1青、链
3、霉素混合液。取对数生长期HepG2细胞，调整到细胞密度2*107ml,取2只裸鼠于腋部皮下接种，每侧0.2ml，4d后剥离肿瘤组织，切成约1.5mm3的瘤块，转种于30只裸鼠左侧皮下。接种后每隔一天用游标卡尺测量肿瘤的长径（A）以及与其垂直的短径（B）,肿瘤体积增大至30-50mm3时，裸鼠随机分为对照组、T7肽组，5-FU组，每组10只。对照组每天腹腔注射生理盐水，0.2ml/只。T7肽组(4.4mg/kg/d)腹腔给予注射合成的T7肽。5-FU组每隔2天腹腔注射5-FU剂量为20 mg/kg；给药19天后处死裸鼠取出瘤体。1.2统计学方法采用SPSS 17.0软件，所有计量数据均以xs表示
4、。组间数据比较采用One-way ANOVA两两比较法，P 0.05为差异有统计学意义。2结果2.1对肿瘤生长的影响5-FU组，T7肽组与对照组肿瘤重量比较差异有统计学意义（P0.05）。与对照组比较，两个给药组肿瘤体积缩小（P0.01），IR分别为52.1%、36.6%。2.2 T7肽对肿瘤组织中微血管密度的影响MVD计数参考Weidner N 4的方法，微血管散在分布，对照组，T7肽组，5-FU组MVD计数分别为8.41.8、5.91.4*、4.01.2*。与对照组相比，T7肽组、5-FU组对肿瘤MVD均有一定抑制作用（P 0.05）。3讨论原发性肝癌在全球的发病率仍继续上升5，是在世界上
5、男性发病率排第五、女性发病率排第九的恶性肿瘤。肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)占原发性肝癌的90以上。前期研究发现， Tumstatin在体内外均有抗血管生成作用6-7。T7肽是具备抗肿瘤细胞和抗血管内皮细胞双重功能的肿瘤抑素相关肽。我们成功构建肝癌细胞裸鼠移植瘤成瘤模型，对其进行T7肽实验发现，实验组中瘤体的重量明显低于对照组，这提示T7肽能够抑制肝癌细胞的生长。同时，免疫组织化学显示，CD34在实验组低表达，提示T7肽能够抑制肝癌血管生成。但现在的实验仅限于动物实验水平，它的抗肿瘤作用尚有待于在临床中得到验证。【参考文献】1 Maeshima Y，
6、colorado Pc，Torre A，et alDistinct antitumor propertiesof a type collagen domain derived from basement membraneJ Biol Chem 2000,275：21340-213482 Esipov R，Beyrakhova K，Likhvantseva V，et alAntiangiogenic and antivascular effects of a recombinant tumstatin-derived peptide in a corneal neovascularization
7、 modelJBiochimie，2012，96(6)：1368-13753 Maeshima Y sudhakar A，Lively JC，et aITumstatin, an endothelial cell-specific inhibitor of protein synthesis. Science,2002,295:140-143.4 Weider N, Carroll PR, Flax J, et al. Tumor angiogenesis correlates with metastasis in invasive prostate carcinomaJ. Am J Path
8、ol, 1993, 143(2):401-409.5Torre LA, Bray F, Siegel RL, et a1. Global cancer statistics, 2012J CA Cancer JClin, 2015, 65(2):87-108.6 Li J, Luo YQ，et alOverexpression of tumstatin in genetically modified megakaryocytes changes the proangiogenic effect of plateletsJTransfusion，2014，54(8)：2106-21177 Maeshima Y，Sudhakar A，Lively JC，et a1Tumstatin，an endothelial cell specific inhibitor of protein synthesisJScience，2002, 295(5552)：140-1432-全文完-
